浙江省科技厅重点资助项目(021106133)
- 作品数：6 被引量：32H指数：4
- 相关作者：刘伟国杨小锋郑学胜陈向日罗鸣更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属第二医院上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅重点资助项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脑源性神经营养因子和神经干细胞联合移植治疗大鼠重度颅脑损伤的研究被引量：8
- 2005年
- 目的研究重度颅脑损伤大鼠采用脑源性神经营养因子(BDNF)和神经干细胞联合移植与神经干细胞单独移植治疗后神经功能的恢复及神经干细胞分化为神经元的比例,并探讨其可能的机制。方法将实验大鼠随机分为4组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为BDNF和神经干细胞联合移植组(实验组),Ⅳ组为单独神经干细胞移植组(对照组),均制成大鼠重度颅脑损伤模型,分别行BDNF和神经干细胞联合移植或单独神经干细胞移植,对实验大鼠进行行为学观察,于伤后第2、5、8、11、14天抽取大鼠股静脉血测定一氧化氮(NO)含量,伤后2周处死大鼠后取脑组织行免疫组化染色观察。结果各实验组大鼠均较对照组神经功能恢复好(P<0.05或0.01),分化为神经元的比例较对照组高(P<0.05),NO的含量比对照组明显降低(P<0.01)。结论BDNF可能是通过降低损伤后NO的形成从而有利于移植的神经干细胞向神经元分化,BDNF和神经干细胞联合移植较单独神经干细胞移植对神经系统损伤有更好的治疗效果。
- 杨小锋虞军刘伟国龚江标沈宏
- 关键词：BDNF重度颅脑损伤神经干细胞用脑
- 大鼠胚胎神经干细胞的培养及分化的观察被引量：7
- 2005年
- 目的探索大鼠胚胎神经干细胞的培养、传代和冻存、复苏的方法,以及观察胚胎神经干细胞在自然条件下分化为神经元细胞和神经胶质细胞的过程。方法从胚胎大鼠脑组织中分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养、传代和鉴定。诱导分化后采用SABC法对分化的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)检测以作细胞鉴定。结果成功培养出大鼠胚胎神经干细胞,并对其进行传代、冻存及复苏,培养的细胞能分化为神经元细胞和神经胶质细胞。结论大鼠胚胎神经干细胞能在体外适宜的培养条件下进行长期的培养、传代及冻存、复苏,并具有多向分化潜能。
- 刘伟国虞军龚江标
- 关键词：大鼠胚胎分化神经胶质细胞传代神经元细胞
- 不同数量神经干细胞移植治疗颅脑外伤疗效的对比研究被引量：9
- 2005年
- 目的观察脑外伤后不同数量移植神经干细胞的疗效是否存在不同,并找出受伤后进行干细胞移植的适宜量。方法成年大鼠制成脑外伤模型在伤后24h进行神经干细胞移植,移植量分别为20万,100万,200万。伤后1w动物运动神经功能评分后,处死取脑,行病理及免疫组化染色。结果伤后1w,接受100万单位干细胞移植的治疗组与损伤组以及其他治疗组(20万,200万)相比呈现明显的运动功能改善。结论移植量并不是越大越好,中等量移植效果比较理想,是适宜的移植量。
- 刘伟国陈向日郑学胜罗鸣杨小锋
- 关键词：神经干细胞颅脑外伤神经干细胞移植治疗颅脑外伤疗效运动功能改善移植神经干细胞神经功能评分
- 大鼠神经干细胞的荧光标记及脑内移植
- 2006年
- 增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）是绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）的人工改造型，在蓝色光（波长488nm）激发下可以稳定地发出绿色荧光，以EGFP示踪是目前细胞生物学示踪剂研究中的一种重要手段。笔者分离培养了胚胎大鼠神经干细胞（neural stem cells，NSCs），以逆转录病毒介导EGFP进行标记，探索标记方法的可行性以及EGFP对NSCs正常功能有无影响。并做标记细胞脑内移植实验，探讨EGFP在NSCs脑内移植中的示踪作用。
- 冯军峰刘伟国杨小锋江基尧郑学胜
- 关键词：神经干细胞脑内移植荧光标记胚胎大鼠增强型绿色荧光蛋白逆转录病毒介导
- 神经干细胞团的悬浮不稳定性及其解决方法
- 2006年
- 目的探讨体外培养的神经干细胞团不能稳定悬浮的相关因素,建立一种适合神经干细胞长期、稳定悬浮培养的方法。方法在培养过程中动态检测培养基密度和粘滞系数,神经干细胞团密度和半径,同时观测神经干细胞贴壁现象。探讨调节培养基密度和粘滞性、利用琼脂糖凝胶包被培养瓶等方法的抗贴壁效果,及其对干细胞增殖和分化的影响。结果神经干细胞团半径逐渐增大,同时细胞团的沉降速率明显增大。传代第3天细胞团开始贴壁。而培养基密度、粘滞系数和细胞团密度均无明显变化。通过调节培养基密度和粘滞系数,使细胞团保持悬浮,但S期标记指数(LI)下降,细胞逐渐死亡。通过在培养瓶底包被凝胶隔离层,神经干细胞团保持快速增殖而不贴壁,长期培养分化率低。结论神经干细胞团的悬浮不稳定性主要与细胞团体积相关。通过琼脂糖凝胶包被培养瓶底,可以防止贴壁,有利于神经干细胞持续增殖并保持未分化,适合神经干细胞长期培养。
- 郑学胜杨小锋刘伟国冯军峰胡未伟李谷罗鸣陈向日
- 关键词：神经干细胞贴壁
- 脑外伤后不同时间移植神经干细胞的疗效对比研究被引量：9
- 2006年
- 目的通过观察脑外伤后不同时间移植神经干细胞的疗效,探讨脑外伤后进行神经干细胞移植的最佳时机。方法将成年大鼠制成脑外伤模型,分别在伤后即时、24h、48h三个时点进行神经干细胞移植,治疗后比较其行为学、流式细胞仪计数、免疫组化染色、电镜观察等指标。结果移植组较对照组各项指标均有改善,24h移植组在流式细胞仪计数、免疫组化染色、电镜观察等指标上较其他各组改善更加明显(P<0.05),而行为学改善与其他实验组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论脑外伤后24h是进行神经干细胞移植的适宜时间。
- 刘伟国罗鸣郑学胜陈向日杨小锋
- 关键词：脑外伤神经干细胞
