陕西省农业科技攻关项目(2009K02-01)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：童德文许信刚王相国张建坡许勤更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学屏东科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省农业科技攻关项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”陕西省农业科技创新项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 布鲁菌外膜蛋白16纯化方法的改进
- 2013年
- 为了获得布鲁菌外膜蛋白16(Omp16),通过PCR技术扩增到Omp16基因片段,将其连接到pET32a载体,转化大肠埃希菌BL21,诱导其表达,应用改进的纯化方法,进行HIS-镍蛋白纯化柱纯化。结果表明,改进后的纯化方法增加了布鲁菌Omp16的可溶性,提高了蛋白纯化效率和纯度。试验确定的纯化程序可有效获得高纯度的Omp16,对其他重组蛋白的高效纯化具有借鉴意义。
- 杨磊张建坡王相国许勤靳亚平王爱华
- 关键词：布鲁菌原核表达纯化
- 猪瘟病毒囊膜蛋白在杆状病毒表面的展示及展示蛋白的免疫原性试验被引量：3
- 2009年
- 【目的】研制以杆状病毒表面展示系统为基础的猪瘟基因工程亚单位疫苗。【方法】利用杆状病毒表面展示(Baculovirus display)技术,构建展示猪瘟病毒(CSFV)囊膜蛋白的重组杆状病毒BacSC-E0E1E2,该重组杆状病毒带有His6标签,且胞质区域(CTD)和跨膜区域(TM)均来源于杆状病毒囊膜蛋白gp64的CTD和TM。对重组杆状病毒进行Western blot分析、激光共聚焦显微镜观察、免疫金电子显微镜检测、动物免疫试验、血清中和试验。【结果】Western blot分析结果表明,重组杆状病毒中表达了重组E0E1E2蛋白;激光共聚焦显微镜检测结果表明,重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf9后在昆虫细胞膜上表达了重组E0E1E2蛋白;免疫金电子显微镜观察表明,重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上;动物免疫试验表明,重组杆状病毒免疫小鼠血清OD450值达到1.82;血清中和试验表明,免疫小鼠的血清50%中和效价(PD50)达到512。【结论】成功构建了表面展示猪瘟囊膜蛋白的重组杆状病毒。
- 许信刚童德文刘宏仁
- 关键词：猪瘟病毒囊膜蛋白动物免疫试验
