辽宁省科技厅科技攻关项目(2006225001-14)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：任甫侯续伟尹波鲁亚成王萍更多>>
- 相关机构：辽宁医学院辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅科技攻关项目辽宁省教育厅基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- hTERT基因片段真核表达质粒载体的构建
- 2010年
- 目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的基因表达载体,为人们建立永生化的细胞系提供材料,为临床细胞移植的实验研究和疾病治疗奠定实验基础。方法根据hTERT全长cDNA序列设计引物进行PCR扩增,扩增用的模板是人胎脑cDNA文库,PCR扩增产物与pGEM-T载体连接后进行测序鉴定。结果 PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功。产物测序表明,hTERT基因片段与GenBank公布的相应基因同源性比较,核苷酸序列的同源性为98.87%,氨基酸序列的同源性为99.67%。结论成功构建了hTERT真核表达质粒。
- 王萍侯续伟尹波任甫
- 关键词：人端粒酶逆转录酶基因转染永生化
- 胰岛细胞移植治疗糖尿病的研究进展
- 2007年
- 侯续伟任甫
- 关键词：胰岛素治疗细胞移植治疗胰岛细胞移植胰岛素分泌细胞代谢性疾病
- SD大鼠胰岛的分离纯化及培养被引量：6
- 2011年
- 目的探讨分离纯化大鼠胰岛素分泌细胞的方法,并评价细胞的生物学特性。方法选用3～4周龄健康成年SD大鼠,常规外科手术显露SD大鼠胰腺和胆总管,在胆总管内插入4.5～5号头皮针后固定,逆行注入预冷的0.5mg/ml的胶原酶V溶液8～10ml,使胰腺膨胀后迅速取出胰腺放入6mlHanks液中38℃消化10min,用含10%胎牛血清的Hanks液终止消化,60目筛网过滤后用Ficoll400非连续梯度离心纯化胰岛。纯化后的细胞用DTZ染色和胰岛素释放试验来分析胰岛素的分泌情况。结果 DTZ染色后β细胞胞浆着色,为均一的猩红色。胰岛细胞分布于Ficoll400浓度为23%～20%和20%～11%的界面之间,纯度高达90%,并且细胞的胰岛素分泌情况良好。结论胶原酶V消化,Ficoll400纯化是一种简单高效的胰岛素分泌细胞分离纯化的方法,可以获取数量多,活性和纯度好的胰岛素分泌细胞。
- 侯续伟尹波任甫
- 关键词：Β细胞胰岛素SD大鼠
- 胚胎干细胞体外定向诱导分化为胰岛细胞的相关研究被引量：3
- 2007年
- 目的:了解胚胎干细胞作为种子细胞治疗糖尿病的应用前景以及诱导分化为胰岛细胞的相关研究概况。资料来源:应用计算机检索NCBI Pubmed数据库1980-01/2006-04关于胚胎干细胞诱导分化为胰岛细胞研究的文章,检索词为"embryonic stem cells,beta cells,insulin secreting cells",并限定文章语言种类为English。同时计算机检索CNKI数据库1980-01/2006-04关于胚胎干细胞定向诱导分化的文章,检索词为"胚胎干细胞,胰岛细胞,胰岛素分泌细胞",并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:!论据可靠的实验文章。#观点明确、条理清晰、信息量好的综述性文章。$文献主题与本课题相关的文章。排除标准:论据不充分、设计不合理、结论不可靠的实验性文章,观点模糊的综述性文章。资料提炼:共检索到40篇相关文献,30篇文献符合纳入标准,排除的10篇为内容陈旧或重复。符合纳入标准的30篇文献中,分别涉及胚胎干细胞治疗糖尿病的应用前景、胰腺发育过程相关调控机制、应用各种诱导因子和基因方法对胚胎干细胞进行调控的实验方法、对诱导分化的胰岛细胞进行功能检测等内容。资料综合:糖尿病是严重威胁人类健康的疾病之一,胰岛细胞移植是治愈糖尿病的可能方法,但由于胰岛细胞数量有限,不能满足临床需要,人们开始寻找胰岛细胞的可替代资源。胚胎干细胞具有广泛的功能,可以被诱导分化为各种组织细胞,用于各种疾病的治疗,因此胚胎干细胞成为人们研究的首选种子细胞。首先对胚胎干细胞进行培养鉴定,然后通过各种方法对其进行诱导分化,主要有两种分化方案:①可以通过加入各种诱导因子,使其朝人们所期望的方向分化。②利用基因工程技术,将胰腺发育过程中调控其发育的各种基因转入细胞,可将胚胎干细胞定向诱导分化�
- 鲁亚成任甫
- 关键词：干细胞胚胎学胰岛细胞细胞分化
