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广东省中医药管理局基金(402024)

作品数:2 被引量:2H指数:1
相关作者:邓欣刘钦蒋小玲李辉伍欣星更多>>
相关机构:深圳市第三人民医院武汉大学更多>>
发文基金:广东省中医药管理局基金深圳市科技局资助项目深圳市科技局立项课题更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇病毒
  • 1篇多聚酶
  • 1篇多聚酶基因
  • 1篇乙肝
  • 1篇乙肝病毒
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇全基因
  • 1篇全基因组克隆
  • 1篇转染
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞模型
  • 1篇米夫
  • 1篇耐拉米夫定
  • 1篇拉米夫定
  • 1篇基因
  • 1篇基因转染

机构

  • 2篇武汉大学
  • 2篇深圳市第三人...

作者

  • 2篇李辉
  • 2篇蒋小玲
  • 2篇刘钦
  • 2篇邓欣
  • 1篇吴其恺
  • 1篇欧璇
  • 1篇聂广
  • 1篇伍欣星

传媒

  • 1篇中西医结合肝...
  • 1篇武汉大学学报...

年份

  • 2篇2006
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
耐拉米夫定乙型肝炎病毒变异株全基因组克隆及鉴定被引量:1
2006年
目的:扩增并克隆耐拉米夫定乙型肝炎病毒(HBV)变异株全基因组DNA,为构建含双体HBV YMDDDNA质粒和HBV YMDD变异株细胞模型及研究药物筛选奠定基础。方法:从一名耐拉米夫定的慢性乙型肝炎病人血清中提取HBV病毒DNA,用错配PCR结合限制性片段长度多态性(RFLP)进行变异分析,然后采用PCR方法在HBV负链开环缺口处及基因组中单一酶切点(SpeⅠ)处,设计两对引物从两个方向分别扩增1.15 kb和2.05 kb的单链及双链DNA区,利用基因重组技术,将两片连接后克隆至质粒pcDNA3.1-中,再进行DNA序列测定。结果:错配PCR结合RFLP分析证实该病毒存在YVDD变异,通过两段法克隆出HBV全基因组,经序列分析所得为HBV YMDD变异株全基因组。结论:成功克隆出HBV YMDD变异株全基因组。
邓欣李辉欧璇刘钦蒋小玲伍欣星
关键词:YMDD拉米夫定多聚酶基因乙型肝炎病毒
表达乙肝病毒YVDD变异株肝癌细胞模型的建立被引量:1
2006年
目的:建立能稳定表达乙肝病毒(HBV)YVDD变异株的细胞模型,为研究HBV YVDD变异株的生物学特性和进行抗病毒药物筛选提供细胞模型。方法:以pcDNA3·1-HBV-YVDD为模板设计两对引物,扩增带不同酶切位点的HBV全基因,扩增产物纯化后,经酶切、连接,得到pcDNA3·1-HBV-YVDD重组体。采用脂质体转染技术,将pcDNA3·1-HBV-YVDD重组体转染体外培养的HepG2细胞。细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg的检测用酶联免疫吸附法(ELISA)法,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HBV多聚酶的表达。结果:建立了HBV-YVDD变异株体外感染的细胞模型HepG2-2HBV-YVDD。该细胞模型能表达较高水平的HBsAg和HBeAg,并能检测到多聚酶的表达。结论:成功构建了能较稳定表达HBV-YVDD变异株的细胞模型。
邓欣李辉蒋小玲吴其恺聂广刘钦
关键词:细胞模型基因转染
共1页<1>
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