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江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CX07S-039Z)

作品数:2 被引量:5H指数:2
相关作者:徐开林陈翀李振宇曾令宇潘秀英更多>>
相关机构:徐州医学院附属医院更多>>
发文基金:江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇调节性
  • 2篇调节性T细胞
  • 2篇细胞
  • 2篇慢病毒
  • 2篇慢病毒载体
  • 2篇节性
  • 2篇病毒载体
  • 1篇载体介导
  • 1篇失活
  • 1篇转录因子FO...
  • 1篇淋巴
  • 1篇淋巴细胞
  • 1篇慢病毒载体介...
  • 1篇介导
  • 1篇基因
  • 1篇T淋巴细胞
  • 1篇FOXP3
  • 1篇FOXP3基...
  • 1篇病毒载体介导

机构

  • 2篇徐州医学院附...

作者

  • 2篇曹江
  • 2篇潘秀英
  • 2篇曾令宇
  • 2篇李振宇
  • 2篇陈翀
  • 2篇徐开林
  • 1篇程海

传媒

  • 1篇中华血液学杂...
  • 1篇四川大学学报...

年份

  • 2篇2009
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体的构建及表达被引量:5
2009年
目的构建携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体,并研究其在CD4+CD25-T细胞中的表达。方法构建含鼠Foxp3基因及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的双顺反子慢病毒载体。采用脂染法将慢病毒载体三质粒转染293T细胞,经共培养法感染免疫磁珠分离的小鼠CD4+CD25-T细胞,流式细胞术(FCM)检测基因转导效率,通过RT-PCR及Western Blotting法分别从mRNA和蛋白水平检测Foxp3的表达。结果成功构建了慢病毒表达质粒pXZ208-IRES-GFP/pXZ208-Foxp3-IRES-GFP,包装的重组慢病毒滴度达106IU/mL。以pXZ208-IRES-GFP为阴性对照组,共培养法感染CD4+CD25-T细胞,实验组细胞基因转导效率达55.95%,并且存在Foxp3 mRNA和蛋白水平的高表达。结论成功构建了携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体;该系统可有效的介导Foxp3基因在CD4+CD25-T细胞中表达。
曹江陈翀徐开林潘秀英李振宇曾令宇
关键词:慢病毒FOXP3调节性T细胞
自身失活型慢病毒载体介导的鼠基因工程调节性T细胞的制备和特性研究被引量:4
2009年
目的制备自身失活型慢病毒载体为基础的鼠基因工程调节性T细胞(Treg细胞),检测其表型变化,并观察其增殖能力及免疫抑制能力。方法构建含鼠Foxp3基因及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的双顺反子自身失活型慢病毒载体。采用脂质体转染法将慢病毒载体三质粒转染293T细胞,经共培养法感染免疫磁珠分离的小鼠CD4^+CD25-T细胞,流式细胞术(FCM)检测基因转染效率及细胞Foxp3、CD25、GITR、CTLA-4的表达,CCK-8法、ELISA法检测其增殖、免疫抑制能力及细胞因子分泌的变化。结果成功构建了慢病毒表达质粒pXZ208-IRES—GFP、pXZ208·Foxp3-IRES—GFP,包装的重组慢病毒滴度达10^6IU/ml。以pXZ208-IRES—GFP为阴性对照组,共培养法感染CD4^+CD25-γ细胞,实验组细胞Foxp3、CD25、CTLA-4、GITR表达升高。在抗CD3e单抗、抗原呈递细胞存在条件下,实验组细胞增殖能力及IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的分泌均低于阴性对照组(P〈0.01);且该细胞可显著抑制CI)4^+CD25-T细胞的增殖。结论成功构建了自身失活型慢病毒载体介导的鼠基因工程Treg细胞;基因工程Treg细胞具有与CD4^+ CD25^+ Treg细胞相似的表型及低增殖性和免疫抑制性。
曹江陈翀曾令宇李振宇程海潘秀英徐开林
关键词:慢病毒转录因子FOXP3T淋巴细胞调节性
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