国家自然科学基金(30771467)
- 作品数：12 被引量：87H指数：5
- 相关作者：巩振辉黄炜李大伟逯明辉陈儒钢更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学河南科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 辣椒新型质核互作雄性不育材料H9A不育机理研究被引量：2
- 2009年
- 为研究辣椒雄性不育的机理,在花期,采用常规的石蜡切片法,对新型辣椒雄性不育材料H9A及其保持系H9B小孢子不同发育时期进行细胞形态学观察;采用DDRT-PCR技术对H9A与H9B小孢子发育过程进行mRNA差异显示,筛选差异表达的基因。切片观察发现:供试雄性不育材料的小孢子败育发生在单核前期,此时花蕾纵径0.526～0.572 cm,横径0.318～0.372 cm,花冠和花萼之比约为1∶4;通过DDRT-PCR,共获得27条差异表达的cDNA片段,其中在H9A中获得12条,在H9B中获得15条。结果说明新型辣椒雄性不育材料H9A的小孢子败育发生在单核前期,败育原因可能是绒毡层细胞程序性死亡异常并极度液泡化膨胀,四分体受挤压后破裂降解,不能形成正常的单核花粉粒。败育时期与花蕾外部形态相关。在败育期表达的27条差异cDNA片段为研究辣椒雄性不育机理的候选基因奠定了基础。
- 王建军彭婧巩振辉黄炜李大伟逯明辉陈儒钢
- 关键词：辣椒小孢子雄性不育
- 辣椒CaCP26基因的cDNA克隆和分析被引量：4
- 2011年
- 利用cDNA-AFLP方法,在辣椒雄性不育两用系的可育株花蕾与不育株花蕾获得阳性差异TDF（transcription derived fragment,转录衍生片段）,通过电子克隆的方法获得大小为865 bp的cDNA序列,并在辣椒雄性不育两用系HW58可育株花蕾中进行RT-PCR验证,测序结果与电子克隆结果的一致性高达99.61%。经Blast N比对,所克隆基因与烟草CP26基因序列的同源性高达90%,命名为CaCP26（GenBank登录号为GQ999612）。该基因871 bp,包含一个864 bp的开放阅读框,编码287个氨基酸,所编码的蛋白质为疏水蛋白,分子质量30 710.47 u,理论等电点为5.807,有跨膜域,无信号肽,二级结构以无规则卷曲为主;利用Swiss-model得到CaCP26蛋白（65~285aa）的三级结构;系统进化树结果显示,辣椒CaCP26与烟草CP26的亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析表明,CaCP26在小孢子单核期的辣椒雄性不育两用系可育株的相对表达量是不育株花蕾相对表达量的6.58倍。
- 李国琴吉姣姣巩振辉黄炜李大伟
- 关键词：辣椒基因克隆
- 辣椒不育系和保持系线粒体差异基因获得及SNP分析被引量：8
- 2010年
- 通过对辣椒细胞质雄性不育(CMS)系及其相应保持系育性相关基因的分析,检寻SNP位点,旨在探索其与辣椒细胞质雄性不育性的关系。以高盐-蛋白酶K法提取线粒体DNA,采用AFLP技术分析了辣椒不育系和保持系的mtDNA的差异,从128对引物扩增产物中发现了不育系和保持系的差异片段,经回收、克隆获得不育系特异片段CanLE长度140 bp,保持系特异片段CanLB长度126 bp。利用Blast对其进行序列比对分析,其中CanLE与细胞色素P450家族蛋白同源,CanLB和赖氨酰-tRNA合成酶同源。进一步分别克隆并获得了不育系和保持系辣椒细胞色素P450全长,序列分析发现,两者存在单核苷酸多态性(SNP),其中5个碱基差异,3个为同义突变,2个氨基酸发生改变。
- 刘光照巩振辉黄炜杜羽吉姣姣
- 关键词：辣椒MTDNA
- 辣椒雄性不育材料H9A小孢子败育机理被引量：26
- 2010年
- 运用光学、电子显微技术及生化指标测定法,对辣椒(Capsicum annuum)雄性不育材料H9A及其保持系H9B小孢子不同发育时期进行细胞形态学观察及生化特性分析。结果表明,雄性不育材料H9A的小孢子败育发生在单核前期,由于绒毡层细胞极度膨胀,四分体受挤压后破裂并降解,无法形成正常的单核花粉粒,属于孢子体败育。不育材料花蕾中的过氧化物酶活性从四分体时期开始明显高于保持系,保持系游离脯氨酸含量从单核小孢子期开始明显高于不育材料;不育材料小孢子发育各时期的可溶性蛋白含量都明显低于保持系,但丙二醛含量均高于保持系。
- 彭婧巩振辉黄炜李大伟陈儒钢逯明辉
- 关键词：生化特性细胞形态学雄性不育小孢子辣椒
- 大白菜碳酸酐酶基因的克隆与序列分析被引量：3
- 2010年
- 以大白菜雄性不育系和保持系花蕾差异表达片段EST H9为信息探针,在GenBank数据库中进行同源EST序列检索,并对亲缘关系近的同源EST序列进行拼接,得到大白菜EST H9的5-′cDNA序列。根据拼接组装所得的5-′cDNA序列,进行3-′RACE引物的设计,经RACE扩增、测序,获得了大白菜α-碳酸酐酶3基因的cDNA全长序列并将其登录到GenBank(登录号为GU143061),命名为BrACA3。该cDNA全长998 bp,编码270个氨基酸。同源分析显示该cDNA序列推导的氨基酸序列与拟南芥α-碳酸酐酶3一致性达78%。氨基酸序列分析表明,该蛋白具备跨膜功能,在第19和20个氨基酸之间存在一个信号肽序列,存在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸化位点。在大白菜花蕾败育过程中α-碳酸酐酶3基因不表达,只在保持系B7的大花蕾时期表达。
- 赵会芳巩振辉赵利民柯桂兰
- 关键词：大白菜细胞质雄性不育
- 辣椒热胁迫及耐热性研究进展被引量：13
- 2009年
- 热胁迫已经成为辣椒生产中不可忽视的环境因子。从热胁迫对辣椒生长发育的影响、辣椒耐热性的鉴定及提高辣椒耐热性的措施等方面,对近年来国内外有关辣椒耐热性研究的进展进行了综述,为进一步揭示辣椒耐热机制和提高辣椒耐热性的研究提供思路和参考。热胁迫下辣椒叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Cs)和蒸腾速率持续下降,花粉和花药正常发育受阻,抗氧化系统受到破坏,胞内Ca2+分布异常,激素比例改变,但使用耐热品种可减轻热胁迫的影响。辣椒耐热性的鉴定指标主要包括胁迫类、保护类、光合作用类和生殖类指标等。由于涉及的代谢过程较多,辣椒耐热性需从多方面进行综合评价。提高辣椒耐热性的主要措施有热锻炼、外源化学物质处理、培育耐热品种等,其中培育耐热品种是最经济有效,同时也是对生态环境最友好的方法。
- 逯明辉巩振辉陈儒钢黄炜李大伟
- 关键词：辣椒热胁迫耐热机制
- 辣椒疫霉菌复壮与保存及生长特性研究被引量：3
- 2012年
- 研究了辣椒疫霉菌3个生理小种的孢子囊诱导、回接复壮、短期固体培养基保存方法和复壮、培养基厚度、菌龄、生理小种对菌落生长及其形态的影响。结果表明:打菌饼诱孢较整皿光照诱孢速度快、产孢量大;发病辣椒茎段较发病叶片回接效率高,达到50%;疫霉菌在16℃下固体培养基上保存效果最好,保存时间为3～4个月;辣椒疫霉菌复壮前后Ph1、Ph3生理小种菌丝生长速率无显著差异,Ph2有显著差异,复壮后3个生理小种菌丝都变致密,致病性增强;培养基厚度可影响菌丝生长速率,10～15 mL体积的培养基较适合疫霉菌的培养;疫霉菌菌丝的菌龄对菌丝生长速率无影响;Ph1、Ph2、Ph3随着致病性的增强菌丝生长速率下降。
- 蒋兰君巩振辉赵倩
- 关键词：辣椒疫霉菌生理小种复壮生长速率
- 几个辣椒核质互作雄性不育材料的育性调查被引量：3
- 2012年
- 在5、7、9月,对18个辣椒核质互作雄性不育材料进行了花粉量、自然坐果率与单果种子数性状的调查。结果表明:1A、2A、4A、6A、8A、13A、17A、18A的花粉量均极少或没有,自然坐果率和单果种子数在开花坐果期一直为0,属于稳定型不育型材料;7A、12A、14A的在供试时期内可以自然坐果,但其单果种子数始终为0,也属于稳定型不育型材料;3A、5A、9A、10A、11A,可以坐果且有种子,表现出部分不育;15A、16A属于环境敏感性的不育材料,育性受环境因子的影响。
- 马越黄炜吉姣姣巩振辉尹川川
- 关键词：辣椒CMS育性
- 农作物花粉高温胁迫研究进展被引量：14
- 2009年
- 高温现已成为农作物生产不可忽视的环境因素,而花粉是农作物对高温最敏感的器官.本文从细胞学、生理学和分子生物学等方面对近年来国内外有关农作物花粉高温胁迫的研究进行了综述,以期为保持农作物在高温胁迫下的高生产力提供思路.高温对农作物花粉的细胞学影响表现在绒毡层粗糙型内质网排列方式改变、药隔维管束鞘细胞形状异常、花粉管高尔基体小泡产生减少等方面;生理学影响表现在Ca2+动态平衡无法及时恢复、生长调节物质含量改变以及糖代谢减慢等方面;分子生物学影响表现在热激蛋白诱导表达不足和其他花粉功能基因表达被抑制等方面.
- 逯明辉巩振辉陈儒钢黄炜李大伟
- 关键词：农作物花粉高温胁迫
- 辣椒花药胚状体发育相关基因的克隆与分析被引量：3
- 2008年
- 【目的】从辣椒花药中克隆与胚状体发育相关的基因,并对其进行序列分析。【方法】以LTP基因、GST基因同源序列设计简并引物,采用RT-PCR方法对辣椒小孢子胚状体发育相关基因进行克隆,测序后对其进行分析。【结果】获得2个可能与辣椒花药胚状体发育相关的基因片段PELTP(GenBank登录号为:EF583618)和PEGST(GenBank登录号为:EF583619),其长度分别约为750 bp和1 000 bp。序列分析表明,PELTP基因与辣椒LTP基因同源性为98%,PEGST基因与辣椒GST基因的同源性为99%。【结论】PELTP和PEGST基因可能在辣椒小孢子胚状体发育早期起着重要作用。
- 张菊平巩振辉马继鹏马维张兴志
- 关键词：辣椒花药培养胚状体基因克隆
