江苏省自然科学基金(BK2010357)
- 作品数：13 被引量：70H指数：5
- 相关作者：林梅于鸿焦霞肖蔚陈亚宝更多>>
- 相关机构：泰州市人民医院南通大学东南大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省“333工程”培养资金资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- RNA干扰生存素基因表达对肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2013年
- 目的采用RNA干扰技术探讨生存素(survivin)对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能的分子机制。方法采用脂质体介导将pGCsi-sh survivin与pGCsi质粒转染人肺腺癌细胞株A549,经G418筛选获得稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型;Western blot检测转染细胞survivin、p21、鼠双微体基因2(MDM2)蛋白表达;MTT比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性;流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果成功构建稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型。与对照组相比,反义组p21表达及细胞凋亡率显著增加,而MDM2表达及细胞增殖显著降低。结论下调A549细胞survivin表达后,细胞增殖降低而细胞凋亡增加,其作用机制与p21表达增加和MDM2降低有关。
- 郑一鸣贾卫光王鹏程焦霞朱晓蔚戴桂红蒋小芹肖蔚于鸿
- 关键词：RNA干扰生存素细胞凋亡
- 预防性糖皮质激素对实体瘤患者化疗后粒细胞减少的影响及机制被引量：3
- 2012年
- 目的研究预防性糖皮质激素的使用对实体瘤患者化疗后粒细胞减少的影响及机制。方法按照使用糖皮质激素与否,将39例患者分为激素组(20例)和非激素组(19例),采用Annexin-Ⅴ/PI方法检测化疗前(第1天)、化疗后(第6天)外周血粒细胞凋亡,同时检测粒细胞表面Fas的表达,并观察它们与粒细胞数目变化的关系。结果 (1)激素组化疗后粒细胞Fas表达高于化疗前(P<0.05),粒细胞计数、凋亡率差异前后未见统计学意义;非激素组化疗后粒细胞计数低于化疗前,凋亡率、Fas表达均高于化疗前,差异可见显著性差异(P<0.05)。(2)化疗前中性粒细胞计数与凋亡率负相关(r=-0.370,P=0.020);非激素组化疗后中性粒细胞凋亡率与Fas表达正相关(r=0.518,P=0.023)。(3)激素组、非激素组第6天粒细胞下降的患者分别为45%(9/20)、89.5%(17/19);而第8天粒细胞下降的患者分别为50%(10/20)、100%(19/19);激素组粒细胞下降的患者比例均低于非激素组(P<0.05)。结论糖皮质激素可以影响化疗药物对中性粒细胞的凋亡诱导作用,抑制中性粒细胞减少的发生,这个作用可能不全是通过Fas途径诱导凋亡导致的。临床上使用糖皮质激素的化疗患者粒细胞减少的规律不同于未用激素者。
- 张立新陈亚宝韩高华叶军黄俊星栾正云林梅刘玲李林赵晨星魏蓉吴正东
- 关键词：粒细胞缺乏糖皮质激素类
- CTGF基因转染对宫颈癌细胞MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因对人宫颈癌Hela细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及细胞增殖的影响,探讨CTGF在宫颈癌侵袭和转移中的作用机制。方法:经脂质体介导将含有CTGF重组表达质粒转染人宫颈癌Hela细胞株,用G418筛选阳性细胞克隆及实时荧光定量PCR、蛋白质印迹鉴定;采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测阳性克隆细胞MMP-2及MMP-9的表达;噻唑盐(MTT)比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果:成功建立稳定高表达CTGF的阳性Hela细胞克隆,证实其MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖活性均显著增高。结论:CTGF转染可显著增加宫颈癌细胞MMP-2及MMP-9的表达并促进其细胞增殖,CTGF可能是宫颈癌基因治疗的潜在靶点。
- 肖蔚焦霞钱华崔永安林梅王薇周彤敏窦荣荣于鸿
- 关键词：结缔组织生长因子基质金属蛋白酶-2细胞增殖人宫颈癌细胞
- 转染NDRG1基因对宫颈癌细胞COX-2、VEGF表达及增殖的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:通过研究人类N-myc下游调节基因1(N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1)对人宫颈癌SiHa细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达及细胞增殖的影响,深入探讨NDRG1抑制宫颈癌侵袭转移的作用机制。方法:经脂质体介导将含有NDRG1真核表达质粒转染人宫颈癌SiHa细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆及RT-PCR、蛋白质印迹鉴定;蛋白质印迹法检测阳性克隆细胞COX-2及VEGF表达的改变;噻唑盐(MTT)比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果:成功建立高表达NDRG1的阳性SiHa细胞克隆(N-12),并证实其COX-2和VEGF蛋白表达及细胞增殖活性均显著降低。结论:NDRG1可能通过下调宫颈癌细胞COX-2、VEGF的表达及抑制细胞增殖而起到抑制宫颈癌进展的作用。
- 钱华王华袁冬兰崔永安林梅肖蔚焦霞于鸿
- 关键词：环氧合酶-2人宫颈癌细胞
- 磁性纳米颗粒作为基因载体的研究进展被引量：7
- 2013年
- 作为非病毒基因载体,磁性纳米基因载体主要指无机非金属材料纳米氧化铁和铁氧体等,近年来其研究广受关注。文中对非病毒基因载体磁性纳米颗粒的种类、性质、制备方法和表面修饰进行综述,并介绍了磁性纳米基因载体介导的体内外基因转染,以及联合磁热疗与靶向治疗癌症领域的相关进展。
- 侯欣欣张皓张东生
- 关键词：磁性纳米颗粒基因载体非病毒载体基因治疗
- 加强临床生化分析前质控 提高检验质量被引量：30
- 2013年
- 分析前质量控制是检验结果准确性的重要前提和保证,影响生化分析前质控的因素很多,从临床医生的项目选择到患者的准备、标本采集、送检、标本的预处理等,其中任何一个环节出差都可能影响到检验结果的准确性。检验人员要不断提高自身的综合素质,加强与临床的联系和沟通,不断完善临床生化分析前质量管理体系,强化生化分析前质控每一个环节的管理,努力提高检验质量。
- 林梅张珍陈亚宝彭海林陈秀
- 关键词：临床生化分析前质控
- Egr1启动子介导的HSV-TK/GCV联合放疗对卵巢癌细胞的治疗作用
- 2013年
- 目的探讨Egr1启动子介导的HSV-TK/GCV自杀基因系统与放疗联合治疗卵巢癌的疗效。方法以MTT方法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞凋亡和坏死情况,倒置光学显微镜和电子显微镜观察治疗前后细胞形态学变化,并与单纯的辐射治疗比较。结果辐射-基因治疗对卵巢癌HO8910细胞有生长抑制和凋亡诱导作用,效果明显优于单纯的放疗,干预60 h、72 h、96 h后,辐射-基因治疗组的细胞增殖抑制率分别达到(56.88±5.35)%、(69.09±3.43)%、(86.91±0.75)%,而单纯辐射组对应的细胞增殖抑制率仅为(21.93±11.37)%、(37.99±7.24)%、(69.55±3.26)%。干预48 h后,辐射-基因治疗组的细胞死亡率为26.01%(凋亡率:19.45%;坏死率:6.56%),明显高于单纯辐射组的12.47%(凋亡率:8.68%;坏死率:3.79%)和阴性对照组的4.41%(凋亡率:2.52%;坏死率:1.89%)。细胞形态学观察结果也显示辐射-基因治疗组细胞呈现了典型的凋亡形态学特征,细胞生长状态远不如单纯辐射组和阴性对照组。结论辐射-基因联合应用具有较好的协同和互补效应,比单一的放疗具有更强的抗肿瘤作用。
- 林梅王华肖蔚于鸿李华叶军张立新沙敏郭婷
- 关键词：放射疗法卵巢肿瘤HSV-TK
- 沉默HCCR-2基因对胰腺癌细胞Bcl-2和Bax表达及细胞增殖与凋亡的影响
- 2012年
- 目的利用反义寡核苷酸(ASODN)干扰技术探讨人宫颈癌癌基因-2(HCCR-2)对人胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法经脂质体介导将HCCR-2ASODN转染人胰腺癌细胞株PANC-1,荧光显微镜观察细胞内荧光信号,流式细胞仪检测细胞转染效率及凋亡率;噻唑盐(MTT)比色法检测转染细胞的增殖活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测转染细胞HCCR-2、Bcl-2、Bax mRNA与蛋白表达。结果 HCCR-2ASODN转染PANC-1细胞的转染效率为85.04%。反义组、无义组和单加培养液组细胞凋亡率分别为(24.04±2.38)%、(2.44±0.13)%、(2.54±0.21)%,反义组较其他组细胞凋亡显著增加(P<0.01);相应的各组细胞增殖活性分别为2.38±1.03、3.78±1.69、3.72±1.54,反义组细胞增殖较其他组显著被抑制(P<0.01)。反义组、无义组和单加培养液组细胞HCCR-2mRNA表达量分别为0.29±0.16、0.55±0.31、0.57±0.33;Bcl-2mRNA表达量分别为0.31±0.14、0.63±0.28、0.62±0.35;BaxmRNA表达量分别为0.68±0.36、0.24±0.09、0.23±0.12;HCCR-2蛋白表达量分别为0.47±0.28、0.93±0.48、0.95±0.42;Bcl-2蛋白表达量分别为0.35±0.19、0.82±0.51、0.81±0.45;Bax蛋白表达量分别为0.91±0.42、0.42±0.21、0.39±0.20,较其他组,反义组细胞HCCR-2、Bcl-2mRNA及蛋白表达量显著降低(P<0.01),而Bax mRNA及蛋白表达量显著增加(P<0.01)。结论下调PANC-1细胞HCCR-2表达后,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡增加,其作用机制与Bcl-2表达降低而Bax表达升高有关。
- 姜琳孙灿林黄俊星林梅吴正东崔永安肖蔚焦霞叶军于鸿
- 关键词：基因,BCL-2BCL-2相关X蛋白质
- 上调NDRG1基因表达对人胰腺癌细胞MMP-9、VEGF表达及侵袭和迁移的影响被引量：5
- 2013年
- 目的建立稳定转染含N-myc下游调节基因-1(NDRG1)的SW1990细胞株,探讨NDRG1对SW1990细胞侵袭与迁移能力的影响及其可能的分子机制。方法经脂质体介导将含有NDRG1重组表达质粒转染人胰腺癌细胞株SW1990,用G418筛选阳性细胞克隆,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot鉴定阳性细胞克隆;采用RT-PCR及Western blot检测阳性细胞克隆MMP-9及VEGF mRNA与蛋白表达;采用Transwell小室侵袭实验与划痕实验分别检测细胞侵袭及迁移能力。结果 N17克隆组、转空载体组及未转染组NDRG1 mRNA表达量分别为0.53±0.25、0.26±0.11、0.25±0.13;相应的MMP-9 mRNA表达量分别为0.33±0.18、0.71±0.45、0.76±0.42;相应的VEGF mRNA表达量分别为0.27±0.16、0.68±0.36、0.69±0.38;相应的NDRG1蛋白表达量分别为0.27±0.13、0.11±0.04、0.12±0.06;相应的MMP-9蛋白表达量分别为0.12±0.04、0.38±0.15、0.36±0.14;相应的VEGF蛋白表达量分别为0.15±0.08、0.39±0.21、0.40±0.25。较其他组,N17克隆组NDRG1 mRNA及蛋白表达量显著增加(P<0.01),而MMP-9、VEGF mRNA及蛋白表达量显著降低(P<0.01)。N17克隆组、转空载体组及未转染组微孔滤膜外侧细胞数分别为31.27±11.54、58.93±17.23、60.26±19.38,N17克隆组较其他组微孔滤膜外侧细胞数显著减少(P<0.01)。N17克隆组、转空载体组及未转染组细胞迁移距离分别为51.35±18.24、120.68±42.97、124.54±51.66,N17克隆组较其他组细胞迁移距离显著减少(P<0.01)。结论 SW1990细胞NDRG1表达上调后,细胞侵袭和迁移能力受到显著抑制,其作用机制可能与MMP-9及VEGF表达降低有关。
- 刘庆宏姜琳孙灿林焦霞朱晓蔚林梅姚娟于鸿黄俊星
- 关键词：血管内皮生长因子类细胞运动
- 产前染色体疾病诊断方法的研究进展被引量：6
- 2011年
- 产前染色体疾病常规诊断主要应用短期培养的绒毛细胞、羊水细胞、脐带血细胞、外周血淋巴细胞制片后进行染色体显带分析及对未培养的间期细胞进行X小体、Y小体检查。这些方法在产前染色体疾病诊断上,发挥了很大作用,但单纯染色体显带分析方法因检测周期长、取材易被污染而致培养失败,不能检出染色体微畸变。近年建立的荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术,为具高灵敏度和特异度的染色体和基因分析技术,是对经典细胞遗传学方法的补充,在染色体疾病诊断中具重要价值,不仅可发现和确定染色体数目异常,而且可检出单纯染色体显带方法无法检出的染色体微畸变和异常片段,因而可极大提高染色体疾病的检出率。目前,荧光原位杂交技术已广泛应用于诊断各种染色体异常,用于外周血淋巴细胞、羊水或绒毛细胞筛查非整倍体、母亲外周血分离胎儿有核红细胞及宫颈冲洗收集滋养细胞等细胞数少、不适合常规染色体分析的染色体异常病变检测及胚胎植入前遗传学诊断(prei mplantation genetic diagnosis,GPD)。本文就产前染色体疾病诊断的常规细胞遗传学方法及分子细胞遗传学方法进行综述如下。
- 王华林梅
- 关键词：染色体核型分析荧光原位杂交
