江苏省自然科学基金(BK2010335)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 二十二碳六烯酸通过活化T细胞核因子1调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化被引量：1
- 2017年
- 目的探讨二十二碳六烯酸（DHA）调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）表型转化的分子机制。方法采用组织贴块法培养大鼠PASMC。将PASMC分为常氧组、低氧组（1%O2、94%N2、5%CO2，低氧刺激12 h）、低氧（1%O2、94%N2、5%CO2）＋DHA（10 μmol/L）组（给予DHA处理后低氧孵育12 h），低氧（1%O2、94%N2、5%CO2）＋DHA（10 μmol/L）＋过表达NFATc1组（细胞转染过表达NFATc1载体24 h，然后再给予DHA及低氧刺激12 h）及低氧（1%O2、94%N2、5%CO2）＋DHA（10 μmol/L）＋敲低NFATc1组（细胞转染NFATc1小干扰RNA 24 h，然后再给予DHA及低氧刺激12 h）。使用三气培养箱制造低氧环境加以干预。分别采用实时定量PCR和Western blot法检测各组细胞的NFATc1mRNA和蛋白表达水平，分别采用免疫荧光染色、Western blot和实时定量PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平，采用实时定量PCR法检测平滑肌肌动蛋白相关蛋白22（SM22）mRNA表达水平，采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EDU）法检测PASMC增殖情况。
结果低氧刺激12 h，低氧组大鼠PASMC NFATc1的mRNA及蛋白表达水平均明显高于常氧组（P均〈0.05），而低氧＋DHA组则均明显低于低氧组（P〈0.05）。转染NFATc1过表达病毒及小干扰RNA 24 h后，低氧刺激大鼠PASMC 12 h，低氧组大鼠PASMC α-SMA阳性的细胞数、α-SMA蛋白及mRNA以及SM22 mRNA表达水平均明显低于常氧组（P均〈0.05），低氧＋DHA组则高于低氧组（P〈0.05），低氧＋DHA＋过表达NFATc1组则明显低于低氧＋DHA组（P〈0.05），而低氧＋DHA＋敲低NFATc1组又明显高于低氧＋DHA＋过表达NFATc1组（P〈0.05）。低氧组大鼠PASMC增殖率明显高于常氧组（P〈0.05），低氧＋DHA组则明显低于低氧组（P〈0.05），低氧＋DHA＋过表达NFATc1组则明显高于低氧＋DHA组（P〈0.05），而低氧＋DHA＋敲低NFATc1组又明显低于低氧＋DHA＋过表达NFATc1组�
- 谢其非陈蕊卢毅严金川刘朔李梅宋娟邵晨王中群刘培晶
- 关键词：肺动脉肌细胞平滑肌
- 二十二碳六烯酸干预低氧诱导大鼠肺动脉高压的研究被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨二十二碳六烯酸（DHA）对低氧性肺动脉高压的影响及机制.方法 实验SD大鼠分为常氧组、常氧DHA组、低氧组和低氧DHA组.肺动脉高压模型采用间断低氧法,大鼠肺小动脉形态学采用HE染色,肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）采用组织贴块法,细胞增殖及迁移分别采用噻唑蓝比色法和改良Boyden小室法.α-肌动蛋白、调宁蛋白和肌动蛋白相关蛋白（SM22α） mRNA水平采用RT-PCR法.结果 低氧组大鼠平均肺动脉压力[mPAP,（30.1±2.6） mmHg,1 mmHg=0.133 kPa],右心室肥厚指数[RV/（LV ＋S）,（40.4±4.2）％],肺小动脉管壁厚度与外径比值[WT％,（44.6±4.1）％]及管壁面积占血管总面积的百分比[WA％,（81.2±5.4）％]与常氧对照组相比均明显升高[mPAP：（18.4±1.2） mmHg；RV/（LV＋S）：（27.8±1.6）％；WT％：（17.7±3.3）％;WA％：（42.9±3.5）％,P＜0.05]；DHA干预的低氧组大鼠上述各指标[mPAP为（22.7±1.8）mmHg,RV/（LV ＋S）为（34.2±2.2）％,WT％为（21.6±4.1）％,WA％为（52.0±2.9）％]均低于低氧组（P＜0.05）；常氧DHA组,低氧DHA组与常氧组相比,上述指标无显著差别.在体外,DHA能显著抑制低氧诱导的PASMCs增殖、迁移（P＜0.05）.低氧时DHA能促进α-肌动蛋白,调宁蛋白和SM22α的mRNA表达.结论 DHA对低氧所致的肺动脉高压具有较好的抑制作用,其机制可能是通过抑制PASMCs增殖,迁移和表型转换而起作用.
- 陈蕊刘培晶严金川顾雨春
- 关键词：二十二碳六烯酸低氧
