江苏省自然科学基金(BK2010332)
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
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- 相关机构：江苏大学附属人民医院江苏大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 汉防己甲素预防裸鼠白血病多药耐药性形成的研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨不同浓度汉防己甲素(Tetrandrine,Tet)在不同给药时间对白血病荷瘤小鼠耐药性形成的预防作用。方法建立K562荷瘤小鼠模型,随机分成4组(每组9只):Tet高(28 mg/kg)、中(18 mg/kg)、低(5 mg/kg)剂量组和对照组(生理盐水)。每组再根据注射Tet和生理盐水的时间不同分为24 h、48 h、72 h三个亚组(每组3只)。观察荷瘤动物的生长情况和肿瘤生长曲线,测定肿瘤生长抑制率,肿瘤生长延迟时间以及生存期的改变。免疫组织化学染色检测各组P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达情况。结果汉防己甲素的预防给药可增强阿霉素对小鼠K562实体瘤生长的抑制作用,且随浓度的增加和给药时间的提前,抑制作用增强,肿瘤生长延迟时间增长,生存期延长(P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示:对照组P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达分别呈强阳性(P<0.05),且随Tet浓度的增加和给药时间的提前,实验组P-gp、MRP1、LRP1蛋白的阳性率减弱(P<0.05)。结论在一定条件下,汉防己甲素具有预防白血病多药耐药形成的作用。
- 曹渊方悦秦蓉李皓许文林沈慧玲
- 关键词：汉防己甲素多药耐药白血病K562
- YB-1腺病毒载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞耐药性的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:构建携带人YB1基因的重组腺病毒载体,并观察其对乳腺癌细胞株MCF-7药物敏感性的影响,并分析其可能的机制。方法:设计含有BglⅡ和HindⅢ酶切位点的引物,PCR克隆人YB1基因,插入穿梭载体pAdTrack-CMV,与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠埃希菌BJ5183内同源重组,获得重组子pAdEasy-1-hYB1,转染293A细胞,包装获得含hYB1的重组腺病毒(AdYB1),体外转染MCF-7细胞。采用MTT法分析在As2O3作用下YB1对MCF-7细胞半数抑制浓度(IC50)的影响;采用Annexin V/PI双染法,经流式细胞仪分析在As2O3作用下YB1对MCF-7细胞凋亡的影响。结果:成功构建了含有hYB1基因的腺病毒载体AdYB1,该重组腺病毒能显著提高MCF-7细胞的YB1mRNA及蛋白的表达水平,转染YB1组能够增加MCF-7细胞对AS2O3的IC50值;通过Annexin V/PI检测证实YB1能够抑制早期细胞凋亡。结论:成功构建含有hYB1基因的腺病毒载体AdYB1,能高效感染MCF-7,并通过抑制早期细胞凋亡提高MCF-7细胞对As2O3的耐药性。
- 冷加燕许文林沈慧玲龙璐璐吴晓君陈巧云姚俊
- 关键词：MCF-7细胞腺病毒载体耐药
- 无血清培养联合多柔比星诱导A549细胞耐药
- 2012年
- 目的:探索快速建立肺癌耐药细胞模型的新方法,并探讨肺癌耐药和干细胞的相关性。方法:应用无血清培养联合药物筛选法建立肺腺癌细胞耐药株A549/ADM;MTT法检测其对多种常用化疗药物的耐药程度;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡、ABCB1和ABCG2的表达水平及细胞内多柔比星的浓度;细胞免疫荧光及流式细胞仪通过特异性表面抗原标记法(CD133)检测肿瘤干细胞含量。裸鼠皮下种植瘤试验评估A549/ADM的致瘤性。结果:A549细胞经无血清培养可见细胞球形成;A549/ADM细胞对多柔比星、长春新碱、紫杉醇均产生了耐药,其耐药指数分别为A549的13.167,12.86,3.4倍;与亲代A549相比,耐药株A549/ADM S期细胞比例由(45.76±1.41)%降低至(23.33±1.32)%,细胞凋亡百分率由(58.23±0.82)%减少至(16.49±0.77)%;耐药株A549/ADM中ABCB1和ABCG2的表达水平明显增高(P<0.05),且细胞内多柔比星浓度明显低于A549细胞;CD133细胞在A549/ADM和A549中的比例分别为(6.2±0.7)%和(1.9±0.2)%(P<0.05),免疫荧光检测A549/ADM细胞CD133表达水平较A549细胞高;A549/ADM具有高致瘤性。结论:无血清培养联合多柔比星诱导能高效富集肺癌干细胞,成功建立了人肺腺癌A549/ADM多药耐药细胞模型。
- 秦蓉许文林惠璐璐朱小兰龙露露陈巧云曹渊
- 关键词：多药耐药肿瘤干细胞多柔比星
- 人端粒酶逆转录酶与肿瘤相关性的研究进展
- 2015年
- 1938年,Hermann Muller通过X射线照射果蝇产生突变体,发现了染色体末端的特殊结构并命名为端粒（telomere）。端粒是真核细胞染色体的末端物质。它作为一种保护性的结构单位,在维持染色体稳定性中起着重要的作用。人类的端粒由TTAGGG重复序列构成,长度大约2~15 kb[1]。端粒在染色体末端形成T环,不但可以防止染色体重排和末端融合,而且可以保护编码DNA序列,防止DNA在复制中丢失,起到了维持染色体稳定性的作用。
- 曹渊沈慧玲许文林
- 关键词：肿瘤端粒端粒酶人端粒酶逆转录酶
- 汉防己甲素对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨汉防己甲素对人胃癌BGC-823细胞株的增殖抑制与诱导凋亡的作用。方法:通过MTT实验检测汉防己甲素对于细胞生长的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡比,Western blotting检测凋亡相关蛋白表达。结果:汉防己甲素显著抑制BGC-823细胞生长,呈时间-剂量依赖性。流式细胞术检测显示不同浓度汉防己甲素干预后,凋亡细胞比例明显增高,且呈浓度-时间依赖性。Western blotting检测显示Bax,Bad和Bak蛋白表达增加,Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达降低,Caspase-3和Caspase-9表达增加,用Caspase抑制剂z-VAD-fmk预处理4h后,z-VAD-fmk能抑制汉防己甲素引起的Caspase-3表达增加。结论:在一定条件下,汉防己甲素能够抑制胃癌BGC-823细胞增殖并且诱导其发生凋亡。
- 秦蓉曹渊方悦谢婵娟陈巧云沈慧玲许文林
- 关键词：汉防己甲素BGC-823增殖凋亡
- bcl-2与p53的表达对女性乳腺癌新辅助化学疗法影响的Meta分析被引量：3
- 2013年
- 目的评价凋亡相关基因bcl-2、p53的表达与乳腺癌新辅助化学疗法(化疗)疗效的关系。方法计算机检索Cochrane、Pubmed、Embase、中国知网、万方、维普等数据库,2003年4月-2013年4月bcl-2、p53蛋白与乳腺癌新辅助化疗的病例对照研究,应用RevMan 4.2统计软件进行定量分析。结果共纳入15篇病例对照研究,bcl-2与乳腺癌新辅助化疗6篇,治疗有效279例,其中bcl-2表达阳性159例;治疗无效115例,其中bcl-2表达阳性57例。p53与乳腺癌新辅助化疗13篇,治疗有效679例,其中p53表达阳性249例;治疗无效341例,其中p53表达阳性195例。Meta分析结果显示,bcl-2表达的阳性率与乳腺癌新辅助化疗疗效无统计学意义[OR=1.40,95%CI(0.89,2.18),P=0.14],而p53表达的阳性率与乳腺癌新辅助化疗疗效有统计学意义[OR=0.46,95%CI(0.26,0.80),P=0.007]。结论 p53可以作为乳腺癌新辅助化疗疗效敏感性的一个指标,对乳腺癌新辅助化疗有提示作用。
- 曹渊方悦秦蓉沈慧玲朱小兰李皓许文林
- 关键词：基因,BCL-2乳腺癌新辅助化疗META分析
- 白血病多药耐药裸鼠荷瘤模型的建立被引量：8
- 2013年
- 目的建立人白血病荷瘤小鼠多药耐药模型。方法将人白血病细胞K562接种于裸鼠背部皮下,持续低剂量瘤内注射阿霉素,逐步诱导建立耐阿霉素的白血病荷瘤裸鼠模型。绘制裸鼠移植瘤生长曲线;MTT法检测阿霉素诱导后移植瘤细胞对各化疗药物的敏感性;荧光定量PCR检测MDR1、MRP1、LRP1基因表达水平;免疫组化和流式细胞技术检测P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达;流式细胞技术检测移植瘤细胞周期分布和细胞内阿霉素浓度。结果裸鼠皮下移植瘤的成瘤率为100%;化疗组瘤细胞对ADR、VP16、DNR和VCR的IC50均明显高于对照组,其耐药指数分别为40.78、20.59、21.24、18.81;阿霉素诱导组MDR、MRP1、LRP1基因mRNA表达水平分别是对照组的31.55、3.35、3.16倍;免疫组化和流式细胞术检测结果均显示诱导组P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达较对照组明显升高;流式细胞术检测显示诱导耐药组瘤细胞S期比例[(8.0±1.32)%]较对照组[(56.92±1.41)%]明显降低,细胞内阿霉素浓度较对照组明显减少。结论成功建立白血病多药耐药动物荷瘤模型,为克服肿瘤继发多药耐药的深入研究奠定了基础。
- 曹渊惠璐璐秦蓉方悦许文林沈慧玲
- 关键词：移植瘤白血病多药耐药K562MRP1P-GP
