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检测DuCV抗体ELISA方法的建立及应用: 鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)属于圆环病毒科圆环病毒属的成员之一,是一类没有囊膜的单链环状DNA病毒,该病毒最早于2003年由德国学者Hattermann测定了DuCV德国分离株的全基因组序列,随...; 刘少宁张兴晓邹金峰谢之景朱岩丽赵钦周恩民姜世金; 文献传递

广东地区鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及双重PCR检测方法的建立被引量：16: 2009年; 对来自广东地区疑似鸭疫里默氏杆菌病的病鸭组织进行了病原菌的分离培养和生化鉴定,确定得到20株鸭疫里默氏杆菌,动物回归试验结果表明,分离的鸭疫里默氏杆菌具有很强的致病性。对这20株鸭疫里默氏杆菌进行的药敏试验表明,分离株已广泛产生耐药性。参照已经发表的2对引物以细菌全菌体为模板建立双重PCR方法,结果均能扩增出2条目的片段,经测序证实为鸭疫里默氏杆菌,而对鸭源大肠杆菌、鸭源禽多杀性巴氏杆菌、鸭源沙门菌和鸭源葡萄球菌的扩增结果均为阴性。说明建立的双重PCR方法能快速、准确的检测出鸭疫里默氏杆菌,并具有高度特异性,可用于鸭疫里默氏杆菌的快速鉴定和快速诊断。; 魏秀丽张兴晓姜世金孙亚妮刘美丽杨灵芝; 关键词：鸭疫里默氏杆菌生化鉴定药敏试验动物试验双重PCR

我国自然发病鸭群中鸭圆环病毒的流行病学调查被引量：19: 2009年; 为了解鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)在我国鸭群中的感染状态,从我国养鸭业比较集中的山东、江苏、四川、福建、广东5个省份36个鸭群采集临床有发病表现的343只病、死鸭的病理组织样品,以提取的组织DNA为模板通过特异性斑点杂交和PCR方法检测DuCV的感染情况。结果显示上述5个省份的鸭均检出了DuCV,病、死鸭中DuCV的个体阳性率为81.63%(280/343),群体阳性率为94.44%(34/36)。结果表明我国鸭群中已普遍存在DuCV的感染。; 刘少宁张兴晓陈智高继明魏秀丽孔义波朱岩丽姜世金; 关键词：鸭圆环病毒流行病学调查

山东地区禽源致病性大肠杆菌氨基糖苷类药物耐药性及耐药基因的检测被引量：15: 2011年; 采用K-B纸片法对224株大肠杆菌进行5种氨基糖苷类药物的药敏试验,采用微量肉汤稀释法进行庆大霉素和阿米卡星最低抑菌浓度(MIC)的测定,三重PCR法检测全部菌株氨基糖苷类钝化酶基因ant(3’’)-Ia、aac(6’)-Ib和aph(3’)-Ⅱa,普通PCR法检测16S甲基化酶基因。结果显示:山东省禽源大肠杆菌对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素和阿米卡星的耐药率分别为84.4%、57.1%、55.8%、46.9%和40.2%;3种钝化酶基因ant(3’’)-Ia、aac(6’)和Ib、aph(3’)-Ⅱa的检出率依次为49.6%、25.0%和22.8%,介导高水平耐药的16S甲基化酶基因RmtB的检出率为11.6%(26/224),只有1株大肠杆菌检测到armA基因,没有检测到rmtA,且3种甲基化酶基因在低度耐药菌中检出率均为0;所检大肠杆菌中携带2种及2种以上耐药基因的菌株占33.5%(75/224),有1株大肠杆菌同时携带4种耐药基因。结果表明,氨基糖苷类钝化酶及16S甲基化酶广泛存在于禽源大肠杆菌菌中,其耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关,部分菌株的耐药性与耐药基因的检出率不一致,表明还存在其他耐药机制。; 孙慧雷战邹金峰魏宗王鑫谢之景姜世金; 关键词：大肠杆菌耐药性

鸭圆环病毒FJ0601株Rep蛋白的原核表达及其抗血清制备被引量：9: 2010年; 通过PCR方法扩增鸭圆环病毒(Duck circorirus,DuCV)FJ0601株Rep基因的完整ORF,按正确的阅读框架将其克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒转化BL21宿主菌后,经IPTG诱导表达。诱导菌体裂解物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,将表达产物从凝胶中回收,免疫4周龄小鼠,3次免疫后,采血分离血清。所得抗GST-Rep多克隆抗血清分别与经PCR检验为阳性的病鸭脾脏、胸腺、法氏囊组织的冰冻切片进行间接免疫荧光试验(IFA),结果在感染DuCV的发病鸭3种免疫器官中均可检测到由阳性细胞组成的局部病灶,表明大肠杆菌表达的Rep融合蛋白至少保留了部分天然Rep蛋白的抗原性。; 刘少宁杨金保张兴晓陈智高继明孔义波朱岩丽姜世金; 关键词：鸭圆环病毒 REP 原核表达 IFA

鸭圆环病毒核酸探针的制备与应用被引量：10: 2011年; 用地高辛标记鸭圆环病毒(DuCV)全基因组克隆制成核酸探针,与鸭病毒性肝炎Ⅰ型病毒(DHV-Ⅰ)的cD-NA、鸭瘟病毒(DPV)的DNA和DuCV的DNA进行斑点杂交以检测核酸探针的特异性,结果该探针只与DuCV的DNA杂交呈阳性。敏感性结果表明,该探针对DuCV的最低检出量约为5pg DuCV的DNA。应用该探针对从山东、江苏、四川等地采集的196只鸭病料,共980份脏器的组织DNA进行检测,结果个体阳性率为33.2%(65/196),在各脏器中法氏囊和肝脏中DuCV检出率较高,检出率分别为52.3%和49.2%。同时对上述样品进行PCR检测,核酸探针检测与PCR检测2种方法的符合率为87.5%。结果表明,制备的DIG标记的核酸探针特异性强、敏感性高,适合对DuCV进行诊断和流行病学调查。; 邹金峰刘少宁雷战孙慧魏宗王鑫姜世金; 关键词：鸭圆环病毒核酸探针

鸭圆环病毒核酸探针的制备与应用: 鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)于2003年由Hattermann在德国首次发现,目前已分别在匈牙利、美国、中国台湾及中国大陆等地被发现或报道。DuCV在临床上可使病鸭表现为发育不良、体重下降及羽毛...; 邹金峰刘少宁雷战孙慧魏宗王鑫姜世金; 文献传递

山东省禽源致病性大肠杆菌血清型鉴定及喹诺酮类药物耐药性检测: 大肠杆菌病在哺乳动物主要引起肠道疾病,而在禽类,当宿主防御能力下降时,常引起继发性局部或全身性感染。各个品种各个日龄的家禽均可发病,但肉仔鸡最易感,该病一年四季均可发生,但在冬季及夏季多发,饲养管理不良如氨气含量高,湿度...; 李莎莎孙亚妮孙惠辛英豪朱岩丽谢之景姜世金; 文献传递

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山东省自然科学基金(Q2006D04)