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国家教育部博士点基金(20060-392003)

作品数：1 被引量：3H指数：1
相关作者：林建华王长昇吴朝阳更多>>
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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇营养因子
  • 1篇源性
  • 1篇源性神经营养...
  • 1篇载体转染
  • 1篇人脑
  • 1篇人脑源性神经...
  • 1篇神经营养
  • 1篇神经营养因子
  • 1篇鼠骨
  • 1篇转染
  • 1篇细胞
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇腺病毒载体
  • 1篇脑源性
  • 1篇脑源性神经
  • 1篇脑源性神经营...
  • 1篇脑源性神经营...
  • 1篇基因
  • 1篇基因修饰

机构

  • 1篇福建医科大学

作者

  • 1篇吴朝阳
  • 1篇王长昇
  • 1篇林建华

传媒

  • 1篇中华实验外科...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人脑源性神经营养因子重组腺病毒载体转染大鼠骨髓间质干细胞的研究被引量：3
2011年
目的探讨增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因、人脑源性神经营养因子（hBDNF）为目的基因的重组腺病毒载体Ad5一hBDNF—EGFP体外转染大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的特点，从基因转录及蛋白表达水平检测hBDNF基因在体外rMSCs中的表达。方法分离、培养rMSCs，流式细胞仪检测CD34、C1M5、CD29、CD90的表达，腺病毒体外转染第3代rMSCs，荧光显微镜下观察绿色荧光信号，流式细胞仪检测转染率，逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）及Westernblot法检测hBDNFmRNA和hBDNF蛋白的表达。结果CD34、CD45、CD29、CD90阳性细胞比率分别为0．8％、6．8％、98．9％、99．9％。腺病毒转染rMSCs后可见绿色荧光信号，强度随腺病毒感染复数（MOI）的增加而增强；MOI为10、20、50、100、200时，转染3d后，转染率分别为20．2％、43．2％、67．2％、103．0％、103．0％；hBONFmRNA及hBDNF蛋白的表达水平亦随腺病毒MoI的增加而增加，当MOI=100时，表达到高峰，3～10d为表达高峰期。结论重组腺病毒体外有效转染rMSCs，成功获取基因工程干细胞hBDNF-rMSCs，该细胞可大量表达hBDNFmRNA及hBDNF蛋白。表达水平与MOI及转染时间明显相关。
王长昇林建华吴朝阳
关键词：腺病毒载体脑源性神经营养因子骨髓间质干细胞基因修饰
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