江苏省卫生厅科研基金(H200317)
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
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- 氟伐他汀改善嘌呤霉素作用下足细胞β1整合素的表达
- 2011年
- 目的:探讨氟伐他汀(FLV)对嘌呤霉素(PAN)刺激下足细胞黏附分子β1整合素表达的影响及可能机制。方法:体外培养的永生化人足细胞分为以下四组:(1)正常对照组;(2)二甲基亚砜(DMSO,1mg/ml)对照组;(3)PAN(1.0μg/ml)组:PAN分别培养足细胞12h、24h、48h、72h;(4)PAN(1.0μg/ml)+FLV(1×10-8～1×10-5M)组,PAN分别与不同浓度FLV共同培养足细胞48h。用Western印迹和DCFHDA(2’,7’-二氯荧光素-3’,6’-二乙酸酯)分别检测以上四组足细胞β1整合素和活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的表达。噻唑蓝[3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,简称MTI]法检测足细胞活力。结果:与正常对照组相比,PAN分别作用24h、48h、72h后,β1整合素表达逐渐下降、ROS表达则明显升高(P<0.05)。FLV干预后,β1整合素表达水平升高、ROS表达水平下降,以FLV浓度为1×10-7M作用48h效果最明显(P<0.05)。相关性分析发现,PAN组以及PAN+FLV组足细胞β1整合素水平与细胞内ROS表达水平成负相关。MTT结果表明DMSO以及FLV浓度为1×10-8M和1×10-7M对足细胞的存活无明显影响(P>0.05),而FLV浓度为1×10-6M和1×10-5M、PAN组、PAN+FLV组,在24h均明显抑制足细胞的活力(P<0.05)。与PAN组相比,PAN与FLV1×10-7M共同作用48h足细胞活力有明显的改善(P<0.05)。结论:PAN可致体外培养足细胞的β1整合素表达下降,FLV上调β1整合素的表达,保护足细胞。此机制与FLV抑制足细胞内ROS的表达相关。
- 柴玉萍刘佳赵秀芬钱军孙彬邢昌赢王笑云
- 关键词：氟伐他汀足细胞嘌呤霉素活性氧簇
- 高糖腹透液对腹膜间皮细胞分泌VEGF的影响及氟伐他汀的干预作用被引量：1
- 2013年
- 目的:观察氟伐他汀(fluvastatin,Flu)对高糖腹透液(high-glucose peritoneal dialysate,HGPDS)诱导的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法:体外培养HPMCs,同步化48 h后,分组如下:正常对照组、HGPDS组、HGPDS+Flu组、单纯Flu组。倒置显微镜观察各组细胞形态,RT-PCR法检测各组VEGF的mRNA表达,Western blot检测各组VEGF蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,在HGPDS作用下,48 h后细胞由铺路石样转变为长梭形,1×10-6mol/L Flu可部分逆转HPMCs的形态改变。与正常对照组相比,在HGPDS作用下,人腹膜间皮细胞VEGF mRNA及蛋白表达明显增多(P<0.05),并呈时间依赖性,VEGF mRNA和蛋白分别在HGPDS干预后12 h和48 h达高峰(P<0.05)。Flu可明显抑制HGPDS诱导的VEGF的表达(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论:适当浓度的Flu可以抑制HGPDS刺激体外培养人腹膜间皮细胞VEGF表达增加。
- 武侠刘佳刘艳春徐亚光赵秀芬钱军邢昌赢
- 关键词：氟伐他汀人腹膜间皮细胞
- 氟伐他汀对腹膜透析大鼠腹膜组织转化生长因子β1表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨氟伐他汀对腹膜透析大鼠腹膜组织转化生长因子β1（TGF—β1）表达的影响。方法每日腹腔注射2．5％或4．25％的葡萄糖腹透液建立腹膜透析大鼠模型。SD雄性大鼠（体质量180～200g）随机分为7个组：（1）正常对照组；（2）生理盐水组；（3）氟伐他汀组；（4）2．5％PD组；（5）4．25％PD组；（6）氟伐他汀干预的2．5％PD组；（7）氟伐他汀干预的4．25％PD组。6周后留取大鼠壁层腹膜组织，光镜观察各组大鼠壁层腹膜形态学的变化，RT—PCR法及免疫组化法分别测定各组大鼠腹膜TGF—β1及纤维连接蛋白（fibronectin，FN）的mRNA及蛋白的表达量。结果光镜下Masson染色显示4．25％PD组与2．5％PD组大鼠腹膜较正常对照组明显增厚；氟伐他汀干预的42％PD组和2．5％PD组的壁层腹膜厚度薄于相应未干预的PD组，但仍厚于正常对照组；生理盐水组和氟伐他汀组大鼠腹膜的厚度较正常对照组未见明显改变。2．5％PD组与4．25％PD组的TGF-β1和FN的mRNA及蛋白的表达量均明显高于正常对照组（均P〈0．05），氟伐他汀干预的2．5％PD组和4．25％PD组的TGF-β1和FN的mRNA及蛋白表达量较无氟伐他汀干预的2．5％PD组和4．25％PD组均有显著减少（均P〈0．05）。生理盐水组和氟伐他汀组大鼠腹膜TGF-β1和FN的mRNA及蛋白表达量与正常组比较，差异无统计学意义。结论氟伐他汀能改善高糖腹透液环境下大鼠腹膜的厚度，同时降低高糖腹透液诱导的大鼠腹膜TGF—β1和FNmRNA及蛋白的表达，对腹膜有保护作用。
- 黄玉晗刘佳刘思武侠徐亚光刘艳春赵秀芬钱军邢昌赢
- 关键词：腹膜透析转化生长因子Β1氟伐他汀纤维连接蛋白
- 氟伐他汀在大鼠腹膜透析模型中对腹膜的保护作用
- 2014年
- 目的：探讨氟伐他汀（fluvastatin,Flu）对腹膜透析（peritoneal dialysis,PD）大鼠腹膜组织形态影响的初步研究。方法：通过SD雄性大鼠（体重180-200 g）腹腔注射4.25%浓度的葡萄糖腹透液的方式模拟腹膜透析。随机分为5个组：①正常对照组;②4.25%腹透液组;③单纯Flu组;④生理盐水组;⑤Flu干预的4.25%腹透液组。4周后留取各组大鼠壁层腹膜组织,光镜观察各组大鼠壁层腹膜形态学的变化,同时采用RT-PCR法测定各组大鼠腹膜转化生长因子-β1（transforming growth factor,TGF-β1）及纤维连接蛋白（fibronectin,FN）mRNA的表达。结果：光镜下HE染色显示4.25%腹透液组大鼠腹膜较正常对照组显著增厚,Flu干预组的壁层腹膜厚度薄于未干预组,生理盐水组和单纯Flu组大鼠腹膜的形态较正常对照组未见明显改变。4.25%腹透液组大鼠腹膜TGF-β1及FN mRNA的表达量均高于正常对照组（均P 〈 0.05）,Flu干预组两者mRNA的表达量均明显低于未干预组（均P 〈 0.05）,生理盐水组和单纯Flu组大鼠腹膜两者的mRNA表达量较正常组无明显统计学意义。结论：长期使用高糖腹透液会改变腹膜的结构,氟伐他汀在一定程度上对腹膜有保护作用,但具体机制仍需进一步研究。
- 黄玉晗刘佳刘思武侠徐亚光赵秀芬钱军邢昌赢
- 关键词：腹膜透析氟伐他汀转化生长因子Β1纤维连接蛋白
- 氟伐他汀及氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导人足细胞VEGF表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:观察氟伐他汀及氯沙坦对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激人足细胞血管内皮细胞生长因子(vascu-lar endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:采用不同浓度的(10-9～10-5 mol/L)AngⅡ刺激人足细胞24 h以确定最适干预浓度;选择最适干预浓度(10-7 mol/L)的AngⅡ刺激0、6、12、24 h以确定最适干预时间;AngⅡ(10-7 mol/L)和不同浓度的(10-7～10-5 mol/L)氟伐他汀共同干预足细胞24 h以确定氟伐他汀最适干预浓度;AngⅡ(10-7 mol/L)和不同浓度的(10-6～10-4mol/L)氯沙坦共同干预足细胞24 h以确定氯沙坦最适干预浓度;氟伐他汀和氯沙坦(均为10-6 mol/L)共同干预足细胞24 h。Western blot检测人足细胞VEGF的表达。结果:①10-7 mol/L AngⅡ刺激人足细胞24 h后表达VEGF增加最明显;②氟伐他汀干预组与AngⅡ刺激组比较,VEGF表达明显下降,浓度10-5 mol/L下降最明显。氯沙坦干预组与AngⅡ刺激组比较,VEGF表达明显下降,浓度10-4 mol/L下降最明显;③10-6 mol/L氟伐他汀和10-6 mol/L氯沙坦共同干预人足细胞后,VEGF表达下降比氟伐他汀、氯沙坦单药干预组更明显(P<0.01)。结论:AngⅡ促进人足细胞表达VEGF,具有一定的时间和浓度依赖性,氟伐他汀和氯沙坦均可抑制此作用,且二者具有协同抑制效应。
- 卞帅博刘佳孙彬赵秀芬钱军邢昌赢王笑云
- 关键词：血管紧张素II足细胞氟伐他汀氯沙坦血管内皮细胞生长因子
- 氟伐他汀对高糖诱导人足细胞Nephrin和血管紧张素Ⅱ表达的影响
- 2012年
- 目的探讨氟伐他汀对高糖诱导的人足细胞nephrin和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)表达的影响。方法体外培养人足细胞,随机分为正常糖对照组(A组)、DMSO组(B组)、高糖组(C组)、氟伐他汀10-7、10-6、10-5 mmol/L处理组(分别为D1、D2、D3组)及高糖+氟伐他汀组(E组)。用Westernblot和放射免疫法分别检测足细胞nephrin和AngⅡ的表达水平。结果 B组、D1组、D2组nephrin表达与A组比较差异无统计学意义(P>0.05),而D3组nephrin表达较A组明显减少(P<0.05)。与A组相比,C组人足细胞AngⅡ表达增加,nephrin表达减少,并呈时间依赖性(P<0.05);而E组能明显逆转C组上述指标的变化(P<0.05)。结论氟伐他汀能抑制高糖环境下足细胞AngⅡ表达,上调nephrin表达,起到保护足细胞的作用。
- 徐亚光刘佳刘艳春赵鲁米许雪强赵秀芬钱军邢昌赢
- 关键词：高糖足细胞氟伐他汀NEPHRIN
- 氟伐他汀对高糖诱导人足细胞血管内皮生长因子表达的影响及机制被引量：2
- 2011年
- 目的探讨氟伐他汀对高糖诱导的人足细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及机制。方法体外培养人足细胞,随机分为A组(正常糖组)、B组(高糖组)、C组(高糖+氟伐他汀10-7mol/L组)、D组(高糖+氟伐他汀10-6mol/L组)、E组(高糖+氟伐他汀10-5mol/L组)和F组[高糖+胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059组]。用Western blot检测VEGF和磷酸化ERK1/2(pERK1/2)蛋白表达。结果 B组VEGF、pERK1/2表达较A组明显升高,并呈时间依赖性(P<0.05)。F组VEGF、pERK1/2表达较B组显著降低(P<0.01)。与B组比较,C、D、E组VEGF及pERK1/2表达亦明显减少,并呈浓度依赖性(P<0.05)。结论高糖刺激体外培养人足细胞VEGF表达增加,氟伐他汀可减少高糖诱导的VEGF表达,其机制可能与氟伐他汀抑制ERK信号通路有关。
- 赵鲁米刘佳孙彬赵秀芬钱军邢昌赢王笑云
- 关键词：氟伐他汀高糖足细胞血管内皮生长因子
- 氟伐他汀联合氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的人足细胞血管内皮生长因子表达的影响及机制研究被引量：4
- 2012年
- 目的 探讨氟伐他汀联合氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（ AngⅡ）诱导的人足细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响及机制.方法 体外培养人足细胞株,采用不同浓度的AngⅡ（10-9～10-5mol/L）刺激人足细胞,另予氟伐他汀（10-7、10-6、10-5 mol/L）和（或）氯沙坦（10-7、10-6、10-5 mol/L）、ERK特异性阻断剂PD98059（ 5× 10-5 mol/L）干预.Western印迹法检测VEGF、磷酸化（p）ERK1/2蛋白的表达.RT-PCR法检测VEGF mRNA的表达.结果 AngⅡ刺激后,人足细胞VEGF mRNA和蛋白的表达显著增加（P＜0.05）,p-ERK1/2增加（P＜0.05）.氟伐他汀、氯沙坦及PD98059均可下调AngⅡ诱导的VEGF mRNA和蛋白表达及ERK1/2磷酸化（P＜0.05）,而氟伐他汀和氯沙坦联合干预较单独作用抑制效果更为显著（P＜0.01）.结论 氟伐他汀和氯沙坦均可抑制AngⅡ诱导足细胞VEGF的过表达,且两者联合具有协同作用.抑制ERK信号通路可能是实现其联合作用的机制之一.
- 刘佳王笑云徐亚光刘艳春卞帅博赵鲁米赵秀芬钱军邢昌赢
- 关键词：洛沙坦氟伐他汀血管内皮生长因子类
- 氟伐他汀通过抑制活性氧改善氨基核苷嘌呤霉素作用下足细胞β1整合素的表达
- 2012年
- 目的探讨氟伐他汀对氨基核苷嘌呤霉素（PAN）作用下足细胞B1整合素表达的影响及其机制。方法将体外培养的永生化人足细胞分为PAN、不同浓度氟伐他汀、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢（H2O2）处理组。用Western印迹和2’，7’-二氯荧光素-3’，6’-二乙酸酯（DCFHDA）法分别检测各组足细胞B1整合素和活性氧（ROS）的表达；噻唑蓝（MTT）法检测足细胞活力。结果PAN和H2O2可显著下调足细胞B1整合素表达，上调ROS表达（均P〈0．05）。低浓度氟伐他汀、SOD可逆转PAN对足细胞的上述作用，显著上调B1整合素、抑制ROS的表达（均P〈0．05）。MTT结果显示PAN、高浓度氟伐他汀、H2O2显著降低足细胞活力（均P〈0．05）；低浓度氟伐他汀、SOD可改善PAN对足细胞活力的影响（均P〈0．05）。结论氟伐他汀可减轻PAN对足细胞的毒性，阻止足细胞B1整合素的下降，其机制可能与抑制PAN介导的ROS升高有关。
- 刘佳邢昌赢柴玉萍徐亚光赵秀芬钱军孙彬王笑云
- 关键词：足细胞CD29嘌呤霉素氟伐他汀活性氧
- 氟伐他汀对高糖腹透液诱导人腹膜间皮细胞纤维连接蛋白表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨氟伐他汀(fluvastatin,Flu)对高糖腹透液(high-glucose peritoneal dialysate,HGPDS)诱导人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达的影响。方法:体外培养HPMCs,同步化24 h后,分为正常对照组、HGPDS组、HGPDS+Flu组、单纯氟伐他汀组、DMSO对照组,各组分别刺激不同时间后,噻唑蓝(MTT)检测各组细胞的活力,RT-PCR检测FN的mRNA表达,ELISA法检测上清液FN蛋白表达的变化。结果:与正常对照组比较,HGPDS明显抑制细胞活力,HGPDS联合Flu共同培养24、36 h,细胞活力有所恢复,其中,1×10-6mol/L Flu作用24 h,细胞活力改善差异有统计学意义(P<0.05);与正常对照组比较,HGPDS明显增加人腹膜间皮细胞FN mRNA及蛋白表达(P<0.05),并呈时间依赖性,其中FN mRNA于6 h达高峰,FN蛋白于24 h达高峰。Flu可抑制HGPDS诱导的FN的高表达(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论:HGPDS诱导体外培养人腹膜间皮细胞FN表达增加,此作用可被Flu抑制。
- 刘艳春刘佳徐亚光赵秀芬钱军孙彬邢昌赢
- 关键词：氟伐他汀人腹膜间皮细胞纤维连接蛋白
