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Stathmin特异性siRNA表达质粒抑制stathmin的表达: 2012年; 目的:构建微管解聚蛋白stathmin基因的特异性siRNA质粒表达载体,以便研究stathmin在鼻咽癌中的生物学作用。方法:合成stathmin特异性DNA片段,退火形成的双链DNA片段克隆于质粒表达载体pGenesil-1.3;载体经扩增后,进行酶切和测序鉴定;采用QIAGEN公司脂质体(effectenetransfectionreagent)将鉴定后的重组质粒转入鼻咽癌CNE2细胞;RT-PCR与Westernblot检测stathmin基因表达。结果:酶切和测序分析表明,插入siRNA质粒表达载体中的DNA片段,其碱基序列和插入方向正确。表达分析证实特异性siRNA质粒表达载体能有效抑制鼻咽癌CNE2细胞中stathmin的表达。结论:构建的siRNA质粒表达载体对stathmin的表达有很好的抑制作用。; 向秋王建红熊伟明田晶蒋伟肖胜军何晓松雷迅; 关键词：STATHMIN RNA干扰质粒基因治疗

Stathmin表达抑制的鼻咽癌细胞系建立被引量：1: 2012年; 目的建立stathmin表达抑制的鼻咽癌细胞系,为stathmin在鼻咽癌中的生物学功能研究提供实验基础。方法合成stathmin特异性干扰DNA片段,将合成的干扰DNA片段克隆到siRNA质粒表达载体pGenesil-1.1,载体导入JM109菌株进行扩增,酶切和测序对重组表达载体进行鉴定。应用脂质体将质粒表达载体转入鼻咽癌5-8F细胞,采用G418进行筛选;RT-PCR和Westernblot检测stathmin表达。结果酶切和测序分析证实,插入siRNA质粒表达载体中的stathmin干扰DNA片段的序列和方向正确。表达分析表明,构建的stathmin特异性siRNA质粒表达载体能有效沉默stathmin在鼻咽癌5-8F细胞中的表达。结论 stathmin表达抑制的鼻咽癌细胞系建立成功。; 范才文田晶王建红肖胜军赵宁刘美莲雷迅向秋; 关键词：STATHMIN 鼻咽癌 RNA干扰基因沉默

Stathmin沉默抑制鼻咽癌5-8F细胞的恶性表型被引量：3: 2013年; 目的探讨stathmin沉默对鼻咽癌5-8F细胞株的生物学作用。方法实验设空白对照组(未转染载体的5-8F细胞),阴性对照组(转入pGenesil-1.1-HK质粒表达载体),stathmin沉默组(转入pGenesil-1.1-STM质粒表达载体),siRNA重组表达载体采用脂质体转入鼻咽癌5-8F细胞,然后进行G418筛选,挑取单克隆扩大培养,获得稳定转染的5-8F细胞株。采用MTT实验、流式细胞仪分析细胞的增殖和周期;裸鼠移植瘤实验分析细胞的成瘤性。结果 Stathmin沉默组5-8F细胞增殖受抑制,其抑制率(33.67±2.52)%明显高于阴性对照的(8.13±0.60)%和空白对照组的0,差异有统计学意义(P<0.05);Stathmin沉默组细胞阻滞于G2期,G2期细胞为(15.77±0.55)%,高于阴性对照组的(11.32±0.79)%和空白对照组的(10.90±0.92)%(P<0.05);Stathmin沉默组裸鼠移植瘤质量为(0.32±0.21)g,低于阴性对照组的(1.10±0.40)g和空白对照组的(1.52±0.30)g(P<0.05)。结论 Stathmin沉默能抑制鼻咽癌5-8F细胞的恶性生物学表型。; 范才文向秋田晶肖胜军邱华锋罗琴潘红杰雷迅; 关键词：鼻咽肿瘤肿瘤基因沉默肿瘤移植 STATHMIN

癌蛋白p18在细胞中的生物学作用被引量：1: 2011年; 癌蛋白p18（Stathmin／oncoprotein 18）是一个相对分子质量为19kD的细胞质蛋白，与细胞微管的形成有关，是近来研究较多的微管不稳定蛋白。在细胞周期的不同阶段，癌蛋白p18通过自身的磷酸化和去磷酸化作用调节细胞微管系统的动态平衡。癌蛋白p18通过促进微管的解聚或阻止微管的聚合从而影响有丝分裂纺锤体的形成，影响细胞的增殖与凋亡。; 段佳雷迅; 关键词：微管肿瘤

Stathmin SiRNA表达载体抑制stathmin的表达被引量：1: 2011年; 目的:构建stathmin特异性SiRNA质粒表达载体,探讨其对鼻咽癌5-8F细胞stathmin的沉默作用。方法:合成用于stathmin基因特异性干扰表达的DNA片段,经退火形成双链DNA片段,片段克隆到质粒表达载体pGenesil 1.1上。载体导入JM109菌株进行筛选与扩增,采用酶切和测序对克隆表达载体进行鉴定。应用脂质体将鉴定后的重组表达质粒载体转入鼻咽癌5-8F细胞,RT-PCR与Western Blot分析stathmin基因表达。结果:经酶切和测序鉴定,插入SiRNA质粒表达载体的stathmin特异性碱基序列和方向正确。重组质粒表达载体转染鼻咽癌细胞后,细胞转染效率达78.8±6.8%,stathmin基因在鼻咽癌中的表达明显下降。结论:构建的stathmin基因SiRNA质粒表达载体能抑制stathmin的表达。; 段佳黄岚珍何晓松易世江范才文肖胜军雷迅; 关键词：STATHMIN RNA干扰质粒基因治疗

微管不稳定蛋白stathmin基因沉默影响鼻咽癌5-8F细胞系增殖与凋亡被引量：1: 2012年; 目的:构建微管不稳定蛋白stathmin基因siRNA质粒表达载体,探讨stathmin沉默对鼻咽癌5-8F细胞的增殖和凋亡作用。方法:合成的stathmin基因特异性干扰片段单链退火形成双链后,亚克隆于siRNA质粒表达载体pGenesil-1.1,质粒经鉴定后,采用脂质体将其转入鼻咽癌5-8F细胞;Western blotting检测stathmin表达;MTT实验分析细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡。结果:Stathmin沉默组5-8F细胞的抑制率为(53.01±1.12)%,与试剂对照组[(13.43±0.55)%]和阴性对照组[(15.57±0.94)%]比较,差异显著(P<0.05)。Stath-min沉默组5-8F细胞的凋亡率为(8.75±0.67)%,与试剂对照组[(1.56±0.13)%]和阴性对照组[(1.90±0.47)%]比较,差异显著(P<0.05)。结论:Stathmin沉默抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,诱导鼻咽癌5-8F细胞凋亡。; 雷迅范才文田晶肖胜军王建红刘强和向秋; 关键词：STATHMIN RNA干扰鼻咽肿瘤

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广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(0816004-20)