国家科技支撑计划(2009BADB9B03)
- 作品数：13 被引量：93H指数：6
- 相关作者：王硕陈颖张燕袁飞吴亚君更多>>
- 相关机构：天津科技大学中国检验检疫科学研究院南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学理学更多>>
- 食品中过敏原胡桃蛋白间接竞争ELISA检测方法研究被引量：10
- 2010年
- 胡桃是坚果类食品中引起过敏反应的首要食品。采用胡桃总蛋白产生的多克隆抗体，建立检测胡桃成分的间接竞争ELISA方法，并通过特异性试验和样品回收试验对该方法进行验证。结果表明：该方法对胡桃蛋白的定量检测限（LOQ，相当于IC80）为94ng／mL；在特异性试验中，只有美洲山核桃出现交叉反应，其它植物样品均未出现交叉反应；将50～1000ng／mL[相当于10-200μg／g]的胡桃蛋白添加到小麦蛋白中，胡桃蛋白的回收率在78％-93％之间。
- 王海艳袁飞吴亚君李刚张富陈颖
- 关键词：ELISA
- 增强化学发光酶免疫法对猪肉中盐酸克伦特罗的检测被引量：23
- 2010年
- 建立了猪肉中克伦特罗（CLB）的直接竞争化学发光酶免疫检测（dc—CLEIA）方法。通过优化离子强度、pH值确立了化学发光酶免疫法的标准曲线，优化后dc—CLEIA的检出限可达0．02μg/L。猪肉中的盐酸克伦特罗用高氯酸提取、SPE净化后绘制基质曲线，基质曲线与标准曲线吻合，说明基质影响基本消除。测定0．10、1．0、5．0μg/kg3个水平的添加回收率，平均回收率为83％～98％，批内与批间的相对标准偏差均小于15％。进一步研究了dc—CLEIA与HPLC两种方法测定猪肉样品的相关性，结果显示两者测定结果相关性良好，r=0．9647，说明所建立的直接化学发光酶免疫方法可用于实际样品的检测，结果准确可靠。
- 王硕李细芬生威张燕杨泽琳方国臻
- 关键词：克伦特罗猪肉
- 食物过敏原检测方法研究进展被引量：18
- 2011年
- 食物过敏作为食源性疾病,日益引起公众的普遍关注。本文对目前有关食物过敏原的免疫学检测方法和核酸检测方法进行了较为全面的综述,分析了常用检测方法的准确性、灵敏性、限制性等问题,展望了未来过敏原检测技术的发展方向。
- 陈颖王玮
- 关键词：食物过敏过敏原检测
- 双抗体夹心ELISA定量检测牛乳中酪蛋白方法的建立被引量：6
- 2010年
- 实验使用酪蛋白标品为抗原,免疫新西兰大白兔制备抗酪蛋白的多克隆抗体,并免疫BALB/C小鼠制备抗酪蛋白单克隆抗体,以单克隆抗体包被,HRP标记多抗,成功地建立了检测牛乳中酪蛋白的双抗体夹心ELISA法,标准曲线在6～1666 ng/mL范围内线性良好,r2=0.9949,最低检出限为7 ng/mL,具有很好的特异性。通过建立双抗体夹心ELISA法测定酪蛋白含量,可为牛乳掺假和食物过敏原的检测及标签管理提供理论及技术基础。
- 王硕杨泽琳马冬月段素欣张燕李细芬江月明房立
- 关键词：夹心ELISA多克隆抗体单克隆抗体酪蛋白
- 检测乳粉中克罗诺杆菌属穆汀斯克罗诺杆菌的双抗夹心ELISA方法的研究被引量：4
- 2012年
- 获得了抗穆汀斯克罗诺杆菌的多克隆抗体,抗体只对穆汀斯克罗诺杆菌菌株有特异性识别,而对非穆汀斯克罗诺杆菌无交叉反应。利用所得到的抗体,建立了一种双抗夹心ELISA检测方法,该方法对纯培养穆汀斯克罗诺杆菌菌液检出限为105cfu/mL;经过17h增菌,全脂乳粉染菌样品中的穆汀斯克罗诺杆菌的检出限为0.1cfu/g。该方法为快速检测乳粉中穆汀斯克罗诺杆菌的污染奠定了基础。
- 石曼生威杜欣军王帅杨丽余桂春郭柏雪王硕
- 关键词：全脂乳粉
- 多重PCR同时检测常见8种食物过敏原被引量：9
- 2011年
- 依据大豆Lectin基因,小麦Gliadin基因,花生Arah3基因,腰果Ana o3基因,鱼和虾16S rRNA,牛和鸡线粒体DNA设计特异性引物序列。在单一PCR方法基础上,建立2种4重PCR方法检测8种食物过敏原的技术。该方法检测周期短,具有较好的特异性和灵敏性,可用于对食品中多种食物过敏原的检测和监控。
- 王玮韩建勋袁飞吴亚君陈颖葛毅强
- 关键词：多重PCR食物过敏原
- 己烯雌酚阳离子牛血清白蛋白免疫原的合成及鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的合成阳离子牛血清白蛋白(cBSA),制备多克隆抗体,为动物性食品安全快速检测提供技术支持。方法合成免疫原(DES-HS-BSA和DES-HS-cBSA),采用SDS-PAGE电泳和质谱法对其鉴定,Bradford试剂盒对其定量,经动物免疫制备多克隆抗体,ELISA测定抗体效价和抗体灵敏度。结果成功合成己烯雌酚免疫原,4次免疫后,DES-HS-cBSA组小鼠血清中针对DES-HS的抗体效价(1∶12 000)明显高于DES-HS-BSA组小鼠(1∶4000)。结论 cBSA能增加与小分子结合时的偶联比,作为免疫原的载体蛋白能明显提高抗体效价。
- 刘晶宁保安柳明冯屹王彩红陈翠翠吕志强高志贤
- 关键词：己烯雌酚
- 克百威分子印迹聚合物的合成及其性能评价被引量：9
- 2010年
- 以克百威为模板分子,甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)为交联剂,采用沉淀聚合的方法制备了克百威分子印迹聚合物。通过红外光谱分析得到模板和功能单体的最佳配比为n(carbofuran)∶n(MAA)=1∶6。印迹聚合物的红外光谱测定结果表明,聚合物中存在与模板分子相互作用的特征基团;从印迹聚合物的扫描电镜图观察到分子印迹聚合物(MIP)与空白聚合物(NIP)的表面形态不同,可推论MIP存在与模板分子相互识别的结合位点。通过静态平衡结合法研究了模板分子聚合物的吸附能力、结合动力学和选择特性。结果表明,与非印迹聚合物相比,印迹聚合物对克百威具有较强的吸附特性和很好的专一选择性,3h后基本达到最大吸附量。采用固相萃取柱预处理样品,用高效液相色谱法测定自来水中10、50、100mg/L克百威的加标回收率为94%～117%,相对标准偏差(n=3)为2.5%～4.7%。
- 张玉陈恒军钱国良胡白石刘凤权
- 关键词：克百威分子印迹聚合物固相萃取
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇人工抗原和多克隆抗体的制备被引量：4
- 2010年
- 对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的两种半抗原合成方法进行对比研究,合成半抗原,并采用活化酯法将半抗原与牛血清白蛋白偶联制备得到免疫原,通过特定程序免疫日本大耳白兔获得了多克隆抗体。抗血清效价为1∶32000,protei-nA-sepharose4B亲和层析纯化的DON抗体与DON、3-AC-DON(3-乙酰氧基脱氧雪腐镰刀菌烯醇)、15-AC-DON(15-乙酰氧基脱氧雪腐镰刀菌烯醇)、T-2毒素、OTA(赭曲霉A)、ZEN(玉米赤霉烯酮)的交叉反应率分别为:100%、500%、2.50%、0.10%、0.01%、0.01%,表明了所制备DON抗体的高特异性。
- 张燕马冬月段素欣姜小梅王硕
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇人工抗原多克隆抗体效价特异性
- 抗噻菌灵单克隆抗体的制备及异源IC-ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2012年
- 为建立噻菌灵酶免疫检测方法,制备3种噻菌灵的半抗原(H1、H2和H3)。利用活泼酯法制备免疫抗原H1-BSA、H3-BSA和包被抗原H1-OVA、H2-OVA、H3-OVA。采用杂交瘤细胞融合方法获得4株稳定分泌抗噻菌灵单克隆抗体的细胞株,分别命名为1-4G9、1-6D3、3-1F9和3-5D4。采用间接竞争酶联免疫法(IC-ELISA),将上述4株抗体分别与3种包被抗原进行组合,从中选择出一个最优组合:H3-OVA/1-6D3。据此建立的异源IC-ELISA检测方法对噻菌灵的IC50为10.9μg.L-1,检测限(IC10)为2.2μg.L-1,与3种噻菌灵类似物的交叉反应率均小于0.1%;在自来水、苹果、梨的添加回收试验中,IC-ELISA法测定的回收率依次为95.9%～118.1%、90.0%～117.6%、74.9%～95.6%;HPLC法测定的回收率依次为92.7%～97.6%、98.9%～100.9%、91.6%～105.4%,IC-ELISA法与HPLC法测定结果基本一致。上述结果表明:抗噻菌灵单克隆抗体酶免疫检测具有很强的特异性和准确性。
- 王玉燕华修德钱国良李刚刘凤权
- 关键词：噻菌灵单克隆抗体HPLC
