陕西省自然科学基金(2007C222)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：薛妍马骥刘文超岳彩霞毕锋更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Rac1b siRNA对胃癌AGS细胞中血管生成相关分子表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制Rac1b表达后对胃癌AGS细胞血管生成相关分子表达的影响。方法:体外合成针对Rac1b基因的siRNA序列(Rac1bsiRNA),脂质体法转染AGS细胞,RT-PCR和Western blotting观察Rac1b siRNA对AGS细胞Rac1b mRNA和蛋白水平表达的影响,ELISA和Western blotting检测缺氧条件下转染Rac1b siRNA后AGS细胞培养上清中VEGF表达水平以及细胞中血管生成相关分子P53、VHL和HIF-1α表达水平的变化。结果:测序证实体外合成的Rac1b siRNA序列正确。Rac1b siRNA转染AGS细胞后,可在mRNA和蛋白水平特异性抑制Rac1b的表达,对其同源分子Rac1的mRNA和蛋白表达水平无影响。Rac1bsiRNA可显著抑制AGS细胞培养上清中VEGF的分泌,这种抑制作用在缺氧情况下更为明显。同时,Rac1bsiRNA在缺氧情况下可抑制AGS细胞内HIF-1α蛋白的表达、上调p53和VHL蛋白的表达。结论:Rac1b siRNA可抑制胃癌AGS细胞中Rac1b在mRNA和蛋白水平的表达,可能通过调节血管生成相关分子HIF-1α、P53及VHL的表达抑制缺氧情况下AGS细胞VEGF的分泌。
- 薛妍杨静悦斯晓明陈衍尤向辉刘都户刘文超
- 关键词：SIRNA胃肿瘤
- RhoA小干扰RNA抑制乳腺癌细胞株MCF-7及其裸鼠皮下移植瘤的实验研究被引量：4
- 2010年
- 目的观察RhoA小干扰RNA(siRhoA)对乳腺癌细胞株MCF-7增殖、迁移、周期和凋亡的影响以及对裸鼠移植瘤生长的影响。方法 siRhoA Lipofectamine2000介导下转染乳腺癌细胞MCF-7,转染48h后,采用Western blot技术检测RhoA蛋白的表达,MTT实验检测siRhoA转染细胞的增殖变化,损伤刮擦实验检测siRhoA转染细胞的迁移能力,流式细胞仪检测siRhoA转染细胞的周期和凋亡,裸鼠移植瘤实验检测siRhoA对肿瘤生长的影响。结果成功转染siRhoA的肿瘤细胞,Western blot显示RhoA蛋白表达在MCF-7细胞中明显下降;siRhoA对MCF-7细胞的增殖、迁移均有显著的抑制作用并能促进肿瘤细胞凋亡及细胞周期中S期细胞减少,G1/G0期细胞增加;裸鼠移植瘤内重复注射siRhoA后肿瘤生长明显减缓。结论 siRhoA能够明显抑制RhoA基因在乳腺癌细胞MCF-7中的表达,部分逆转MCF-7的恶性生物学行为并抑制裸鼠移植瘤的生长。
- 马骥薛妍王鹏刘文超
- 关键词：RHOAMCF-7细胞株裸小鼠
- 蛋白酶体抑制剂MG132对RhoA诱导的肿瘤血管生成的抑制作用的研究被引量：7
- 2011年
- 目的探讨RhoA对血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和微血管生成的影响以及蛋白酶体抑制剂MG132对RhoA调控作用的影响。方法将组成性激活的RhoA的真核表达质粒,在脂质体介导下转染胃癌细胞系MKN-45,经G418筛选出阳性单克隆并用Western blot检测是否稳定转染成功;应用ELISA检测不同细胞培养上清中VEGF的含量;建立组成性激活RhoA的荷瘤鼠模型,并用MG132治疗并观察治疗效果;用免疫组化染色方法检测RhoA及MG132对肿瘤细胞表达HIF-1α、VEGF及CD31的影响。结果组成性激活RhoA的稳定转染细胞株构建成功;组成性激活的RhoA促进VEGF的分泌,而MG132抑制VEGF的分泌;组成性激活的RhoA促进肿瘤的生长,差异有统计学意义(P<0.05),MG132抑制肿瘤的生长,差异有统计学意义(P<0.01);组成性激活的RhoA促进HIF-1α、VEGF及CD31的表达,MG132抑制HIF-1α、VEGF及CD31的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MG132通过抑制RhoA对HIF-1α、VEGF及CD31的上调来影响肿瘤血管的生成。
- 岳彩霞马骥周海俊唐秋琳李立兰毕锋薛妍
- 关键词：RHOA微血管密度缺氧诱导因子-1ΑMG132
