中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(B2F100306)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：马军武代鹏周广青林密杨双更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 提高抗体库容量和亲和力方法的新进展被引量：1
- 2012年
- 抗体库为抗体工程带来了革命性的突破,其核心是将抗体的基因型与表型耦联,从抗体库中找到针对特异抗原的抗体基因。但是抗体工程发展所面临的两大难点是如何构建大库容量的抗体库和提高抗体的亲和力。抗体库方法和技术的出现使得改造工程抗体更方便、更有效。利用不同抗体库方法构建大库容量的突变抗体库,然后通过抗体库技术在体外模拟抗体亲和力成熟过程获得高亲和力的抗体。本文简要综述了抗体库方法和技术的最新进展。
- 代鹏周广青马军武
- 关键词：库容量
- 单链抗体的表达
- 2011年
- 单链抗体(scFv)是具有抗体活性的最小功能结构单位,是基因工程抗体研究领域中的热点,具有比单克隆抗体在生物病原体、微生物污染和寄生虫病等预防、检测和治疗的独特优点和应用前景。鉴于其重要性,单链抗体在不同的表达系统中得到表达与研究。简要综述了scFv的表达。
- 代鹏周广青马军武
- 关键词：单链抗体外源基因
- 核糖体展示口蹄疫单链抗体库的构建被引量：2
- 2011年
- 目的:构建库容量大、多样性好的核糖体展示口蹄疫单链抗体(scFv)库。方法:分离口蹄疫病毒免疫的兔脾细胞,提取总RNA,用RT-PCR扩增兔抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因,同时扩增作为间隔区的兔抗体Ck基因;采用重叠延伸PCR(简称SOE-PCR)技术连接VH-VL基因,同时引入T7启动子和核糖体结合位点序列,体外构建核糖体展示scFv库模板,连接pMD18-T载体转化E.coli DH5α大肠杆菌,挑取阳性克隆测序以鉴定scFv组装。结果:成功构建了库容量达8.21×1013的兔源口蹄疫核糖体展示scFv库。结论:构建的大容量兔源性口蹄疫核糖体展示抗体库可以成为进一步筛选特异性口蹄疫单链抗体的实验平台,为开发诊断性口蹄疫单链抗体奠定了很好的实验基础。
- 杨双马军武周广青林密冯霞刘涛代鹏
- 关键词：核糖体展示技术重叠延伸PCR单链抗体库口蹄疫病毒
