重庆市教育委员会科学技术研究项目(040313)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刘川吴小候尹志康罗春丽何云锋更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Survivin-siRNA治疗膀胱移行细胞癌的动物实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的:构建survivin特异性短发夹RNA(shRNA)的表达载体,并以其修饰人膀胱移行细胞癌细胞株T24,评价其在体内的抑制肿瘤生长增殖的作用。探讨其在膀胱移行细胞癌(TCCB)T24细胞中的作用。方法:设计、合成survivin特异性的短链寡核苷酸,克隆到PTZU6+1质粒载体中,构建survivin特异shRNA表达载体,转染T24细胞;通过PTZU6+1质粒载体介导,成功建立了表达survivin的膀胱移行细胞癌细胞株T24/survivin-siRNA,拟在体内研究survivin-siRNA对膀胱移行细胞癌生长、增殖的影响。建立裸鼠皮下种植瘤模型,观察肿瘤形成时间和观察肿瘤形成时间,以及计算抑瘤率;HE染色行组织学检查;SABC法测定survivin,评估survivin在PTZU6+1介导的survivin-siRNA治疗膀胱移行细胞癌后的表达。结果:未转染组、空载体组共发生肌肉侵润6例,可见肌纤维的溶解、断裂等;皮下注射含survivin-siRNA的转染组细胞所形成的种植瘤的时间显著地延长,与其它两组比较有显著性差异(P<0.01);含survivin-siRNA的转染组所形成的种植性膀胱癌的体积明显受到抑制,与未转染组、空载体组有明显差异(P<0.01);survivin-siRNA转染组的抑瘤率为68.93%,与未转染组、空载体组相比较有显著差异;survivin-siRNA转染组survivin的阳性表达率降低。结论:应用PTZU6+1质粒载体构建survivin的shRNA表达载体,成功建立了表达survivin的膀胱移行细胞癌细胞株T24/Survivin-siRNA,有效抑制了survivin蛋白的表达,在体内实验中表明可以抑制T24细胞移植瘤的生长,诱导T24细胞的坏死、凋亡。
- 杜虎吴小候罗春丽何云锋刘川尹志康曾柯
- 关键词：SHORTHAIRPIN
- shRNA沉默survivin基因对人膀胱移行细胞癌T24细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2009年
- 目的构建survivin特异性短发夹RNA(shRNA)的表达载体,探讨其对人膀胱移行细胞癌T24细胞的生物学行为的影响。方法将构建survivin特异shRNA表达载体转染T24细胞,RT-PCR、Western blot检测survivin mRNA及其蛋白的表达水平;通过细胞生长曲线、随机运动实验、Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞生长、运动及体外侵袭能力。结果经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和测序鉴定,成功筛选含目的DNA片段的重组载体pshRNA-survivin2,并成功转染T24细胞;转染pshRNA-survivin2后可显著抑制细胞中survivin mRNA及其蛋白的表达,抑制率分别为61.73%和73.27%;pshRNA-sur-vivin2组的细胞侵袭力与运动能力均有明显的下降,第3、5天时肿瘤细胞生长抑制率分别为59.13%、83.86%。结论应用pTZU6+1质粒载体构建survivin的shRNA表达载体,能有效抑制其survivin mRNA及其蛋白的表达,并可抑制T24细胞的增殖、运动及体外侵袭能力。
- 杜虎吴小候罗春丽刘川曾柯何云锋尹志康
- 关键词：SURVIVINSHRNA肿瘤侵袭
