广东省自然科学基金(5004737)
- 作品数：15 被引量：37H指数：3
- 相关作者：徐兵马文丽郑文岭姜立彭翼飞更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院南方医科大学中国人民解放军更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 成人急性淋巴细胞白血病患者骨髓ERG基因表达水平及其与预后的相关性被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者ETS相关基因(ERG)的表达水平及其临床意义。方法:实时荧光定量PCR法检测91例初治成人ALL患者ERG的表达水平,并分析其与临床预后的关系。结果:91例ALL骨髓标本中ERG表达水平显著高于对照组,P<0.001。ALL患者ERG表达水平与就诊时外周血白细胞计数(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)和血清乳酸脱氢酶(LDH)水平均无明显相关性,P均>0.05。B-ALL患者ERG表达水平与T-ALL组比较差异无统计学意义,P=0.547。BCR/ABL基因阳性ALL患者ERG表达水平与BCR/ABL阴性者比较差异无统计学意义,P=0.889。伴有髓系抗原表达组ALL患者与未伴有髓系抗原表达组之间ERG表达水平也差异无统计学意义,P=0.150。尽管ERG高表达ALL患者的CR率(72.7%)与低表达组(75.4%)比较差异无统计学意义,P=0.804,但ERG高表达ALL患者的复发率(62.5%)显著高于ERG低表达组(34.6%),P=0.047。ERG高表达ALL患者的总生存率显著低于ERG低表达组,P=0.016。结论:ERG高表达可能是ALL一个重要的预后不良因素,检测ALL患者ERG表达水平有助于判定预后,指导治疗。
- 郭绪涛徐兵黄芬陈国枢萧平难史鹏程周淑芸
- 关键词：骨髓预后
- 外源性antizyme 1基因转染对SH-SY5Y细胞的生物学影响
- 2007年
- 目的研究antizyme1(AZ1)基因对成人神经廇SH-SY5Y细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法将构建好的AZ1基因重组真核表达载体pAZ1m稳定转染SH-SY5Y细胞。通过MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术分析AZ1转染对细胞周期及凋亡的影响。RT-PCR与Western blotting检测AZ1基因转染对cyclin D1和caspase-3表达的影响,caspase-3试剂盒检测酶活性变化。结果稳定转染SH-SY5Y细胞后,检测结果显示AZ1基因转染能够减慢SH-SY5Y细胞增殖速度,并使细胞停滞于G0/G1期。在cyclin D1基因表达抑制的同时,caspase-3基因表达上调。酶活性测定显示Caspase-3活性上升。结论AZ1基因能够抑制SH-SY5Y细胞增殖,通过降低cyclin D1的表达阻滞细胞周期于G0/G1期,并上调caspase-3表达促进SH-SY5Y细胞凋亡。
- 姜立马文丽李晋彭翼飞徐兵郑文岭
- 关键词：抗酶
- B细胞恶性肿瘤患者血浆游离DNA中IgH基因重排检测及临床意义被引量：1
- 2008年
- 目的探讨检测B细胞肿瘤患者血浆DNA标本IgH基因重排对辅助诊断及判断预后的临床意义。方法采集83例B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）、B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）及多发性骨髓瘤（MM）患者共110份血浆标本，提取血浆游离DNA，PCR检测IgH基因重排。结果63例初发B细胞肿瘤患者IgH基因重排检测阳性率为77．8％，而缓解病例的阳性率为27．6％，初发患者检测阳性率显著高于缓解病例（P〈0．01）。结缔组织病、感染性疾病及健康人均呈阴性结果。IgH基因重排检测阳性率与B-NHL和MM的分期、血清β2-微球蛋白（β2-Me）和乳酸脱氢酶（LDH）水平无关（P〉0．05）。追踪检测16例患者显示12例初发检测阳性者治疗缓解后转为阴性，其中3例缓解后6-9个月检测血浆IgH基因重排再次转为阳性，随后此3例患者均出现临床复发，检测转阳较临床复发提前1-4个月。1例在初诊和完全缓解期间检测均为阳性ALL患者，经异基因干细胞移植后转为阴性；3例检测始终阳性的患者疗效不佳，始终未获缓解。结论初治B细胞肿瘤患者血浆游离DNA中检测IgH基因重排阳性率高、特异性强、取材简便，有望用于B细胞肿瘤辅助诊断，追踪检测还有助于判断预后。
- 李洁徐兵宋小燕陈国枢周淑芸
- 关键词：B细胞血浆重链基因重排
- NF-κB和急性淋巴细胞白血病被引量：1
- 2007年
- 宋小燕徐兵
- 关键词：急性淋巴细胞白血病NFΚBKAPPA基因启动子转录表达
- 多重实时荧光定量PCR同时检测急性白血病患者WT1和MDR1基因表达水平方法的建立被引量：1
- 2011年
- 目的 构建可同时检测AL患者WT1和MDR1基因表达水平的多重实时荧光定量PCR方法.方法 提取K562细胞的总RNA,并逆转录扩增WT1和MDR1的cDNA,通过Bam H Ⅰ及BglⅡ酶切后连接成WT1和MDR1重组片段,对WT1和MDR1重组片段进行PCR扩增,PCR产物纯化后与pMD18载体进行连接,转化宿主菌DH-5α,构建载有WT1和MDR1基因的标准品重组质粒,用限制性核酸内切酶法和PCR法鉴定质粒.用FAM荧光标记MDR1探针、VIC荧光标记WT1探针,建立能在1个试管中同时检测WT1和MDR1基因表达水平的多重实时荧光定量PCR反应体系.应用该体系检测47例AL患者及32例对照者WT1和MDR1基因表达水平,比较两组之间WT1和MDR1基因表达水平的差异,并随访7例AL患者不同病程中WT1和MDR1基因表达水平的变化与临床预后的关系.结果 经EcoR1酶切及PCR法证实WT1和MDR1基因重组质粒已成功构建.所建立多重实时荧光定量PCR方法的灵敏度为102拷贝/μl;所建立标准曲线的R2分别为0.999和0.998.AL患者WT1和MDR1基因的表达水平中位数分别为37 000（163～6 370 000）拷贝/μg RNA和76 200（179～18 000 000）拷贝/μg RNA,显著高于对照组的258（0～643）拷贝/μg RNA和333（0～779）拷贝/μg RNA,差异有统计学意义（Z=6.755、6.736,P＜0.01）.对应用相同的诱导和巩固化疗方案治疗的7例AL患者进行随访,3例持续缓解患者中,WT1和MDR1的表达水平在初治时分别为2 170和86 900、1 130和5 860、1 170和586拷贝/μg RNA,治疗后WT1和MDR1的表达水平明显下降,分别为370和560、138和980、150和690拷贝/μg RNA,此3例患者获长期完全缓解.在3例完全缓解后复发患者中,WT1和MDR1表达水平在初治时分别为1 600和11800、24 800和968、48 200和1 100 000拷贝/μg RNA,在化疗获得完全缓解后均降低,但在随后治疗过程中,WT1、MDR1表达量又逐渐升高,分别为20 314和25 660、184 364和31 530、15 680和878 000拷贝/μg RNA,此3例患者最终均出现临床复发.
- 徐兵宋小燕杨柳许文娟黄芬郭绪涛周淑芸
- 关键词：白血病P糖蛋白聚合酶链反应
- 难治性复发性急性淋巴细胞白血病治疗进展被引量：3
- 2007年
- 宋小燕徐兵
- 关键词：白血病淋巴细胞急性造血干细胞移植异基因
- 人OAZ-ORF2基因真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的克隆人鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白OAZ-ORF2基因,重组至真核表达载体,并在Hela细胞中表达。方法以pET32a-OAZ质粒为模板,PCR法扩增OAZ-ORF2序列,测序鉴定后重组入真核表达载体pEGFP-N1,转染Hela细胞,表达重组蛋白。结果PCR产物经琼脂糖电泳证实与目的基因长度一致,测序结果与GenBank公布的OAZ基因的ORF2序列一致。重组载体在Hela细胞中表达OAZ-ORF2蛋白,Western blotting分析在相对分子质量44.5×103左右出现新的蛋白条带。结论成功构建人OAZ-ORF2基因真核表达载体,并获得表达。
- 姜立马文丽柯杰兵彭翼飞李晋徐兵郑文岭
- 关键词：真核表达HELA细胞
- FLAG方案治疗成人难治复发急性白血病43例被引量：9
- 2009年
- 目的探讨FLAG方案治疗成人难治复发急性白血病(AL)的疗效及安全性。方法对43例成人难治复发性AL患者采用FLAG方案化疗,观察疗效及其不良反应。结果完全缓解(CR)率为58.9%,部分缓解(PR)率为15.4%,总体有效(OR)率为74.3%,CR病例中78.3%为一个疗程缓解。难治组和复发组CR率和OR率均差异无显著性(P>0.05)。急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病和急性混合细胞白血病三组间CR率和OR率差异也无显著性(P>0.05)。FLAG方案的不良反应主要为骨髓抑制及继发感染等,但绝大多数患者经治疗和间歇期后均能恢复。统计分析显示年龄、高白细胞数、骨髓原始细胞比例、血清乳酸脱氢酶(LDH)、β2微球蛋白(β2-MG)、多次复发是影响治疗效果的因素。结论FLAG方案对成人难治复发AL的治疗缓解率相对较高,不良反应可以接受,是成人难治复发性AL首选治疗方案之一。
- 刘锋陈国枢徐兵孟凡义冯茹刘晓力刘启发孙竞江千里
- 关键词：难治复发白血病药物疗法FLAG方案
- Antizyme1基因转染对K562细胞增殖与凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:研究鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白对人红白血病K562细胞增殖、三氧化二砷(As2O3)诱导凋亡时的影响。方法:定点突变技术构建缺失frameshift位点的pEGFP-N1-AZ1-mutation重组表达载体。脂质体法转染K562细胞,通过G418筛选获得稳定表达antizyme1的K562pAZ1m细胞系。采用不同浓度的As2O3处理细胞,通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期及凋亡变化。并通过RT-PCR方法检测antizyme1转染对cyclinD1和survivin基因表达的影响。结果:获得稳定表达antizyme1的K562pAZ1m细胞株后,其增殖能力明显减慢。cyclinD1基因表达降低,细胞主要停滞于G0/G1期。在As2O3的诱导作用下,细胞凋亡增多,survivin基因表达降低。结论:AZ1基因能够抑制K562细胞增殖,通过对cyclinD1的负调控使细胞周期停滞于G0/G1期。并可能通过下调survivin表达来加强As2O3对其的诱导凋亡作用。
- 姜立马文丽李晋彭翼飞徐兵郑文岭
- 关键词：抗酶细胞增殖细胞周期凋亡
- 基于人工免疫检测的商业智能系统被引量：3
- 2010年
- 设计商业智能系统,分别构建ETL模块、数据仓库和OLAP系统。对于Cube中经常出现的异常数据问题,提出使用人工免疫系统进行检测,将Cube查询的KPI历史数据进行二进制编码作为自我集合,并用阴性选择算法产生检测器。设计基于人工免疫检测的新商业智能系统,测试表明,改进的系统可以有效地检测异常数据的存在,从而保障了最终用户端使用数据的准确性和整个商业智能系统的可靠性。
- 徐锐马文丽郑文岭
- 关键词：联机分析处理数据仓库人工免疫阴性选择
