吉林省科技厅重大项目(20076023)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：王岩张慕蕊李玉林赵东旭李新娜更多>>
- 相关机构：吉林大学吉林大学中日联谊医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅重大项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 逆转录病毒介导的靶向人Slingshot-1L基因稳定转染人骨髓间充质干细胞系的建立
- 2010年
- 目的建立过表达该基因的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)稳定转染细胞系。方法采用密度梯度离心法联合贴壁培养法分离、纯化hMSCs。应用脂质体法将Slingshot-1L重组逆转录病毒载体pLNCX-Slingshot-1L转染PA317包装细胞,G418筛选,滴度测定。收集病毒上清感染第2代hMSCs,G418筛选,挑选阳性克隆,扩增培养。结果采用密度梯度离心法联合贴壁培养法成功分离、纯化了hMSCs,应用pLNCX-Slingshot-1L重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞,获得滴度为5×108CFU/L的病毒上清。收集病毒上清感染hMSCs,获得了过表达Slingshot-1L基因的hMSCs。结论应用Slingshot-1L重组逆转录病毒载体,成功建立了过表达该基因的hMSCs稳定转染细胞系。
- 张慕蕊王岩马英智赵东旭杨旭芳李玉林
- 关键词：逆转录病毒稳定转染干细胞
- 逆转录病毒介导的靶向人Slingshot-1L基因的稳定转染细胞系的建立被引量：1
- 2010年
- 目的应用Slingshot(SSH)-1L重组逆转录病毒载体,建立过表达该基因的稳定转染细胞系。方法用脂质体法将含SSH-1L的重组逆转录病毒载体pLNCX-SSH-1L转染PA317包装细胞,G418筛选,滴度测定。收集病毒上清感染MG63细胞,G418筛选。结果应用pLNCX-Slingshot-1L重组逆转录病毒载体,获得滴度为5×108 CFU/L的病毒上清,感染MG63细胞,获得了过表达SSH-1L基因的MG63细胞。结论应用SSH-1L重组逆转录病毒载体,成功建立了过表达该基因的稳定细胞系。
- 张慕蕊王岩赵东旭李新娜李群李玉林
- 关键词：逆转录病毒稳定转染
- 体外诱导人骨髓间充质干细胞定向分化为心肌细胞实验方法的建立被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨体外培养并诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分化为心肌细胞(CMs)的实验方法。方法:采用密度梯度离心法联合贴壁培养法分离、纯化hMSCs,采用5-氮杂胞苷(5-Aza)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对hMSCs进行联合诱导,诱导3～4周,观察细胞形态学的变化,免疫组织化学方法鉴定肌细胞及心肌细胞特异蛋白的表达。结果:hMSCs体外经5-Aza和bFGF联合诱导1～2周后,细胞体积较诱导前增大,呈长梭形。诱导2～3周后细胞伸出伪足呈多爪形;诱导3～4周后细胞伪足间相互连接形成肌管样结构。联合诱导3～4周后免疫组织化学鉴定结蛋白(Desmin)、肌钙蛋白(cTnⅠ)和横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)表达均呈阳性。结论:hMSCs在体外经5-Aza和bFGF联合诱导可以分化为CMs。
- 张慕蕊王岩李玉林
- 关键词：间质干细胞5-氮胞苷
