国家高技术研究发展计划(2007AA10Z428)
- 作品数：13 被引量：81H指数：5
- 相关作者：孙秀兰张银志师俊玲孙卉朱瑜更多>>
- 相关机构：江南大学西北农林科技大学汉中市产品质量监督检验所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：理学农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 玉米赤霉烯酮人工抗原的合成以及抗体的制备被引量：4
- 2011年
- 制备了玉米赤霉烯酮人工抗原,并且制备抗血清,为进一步建立酶联免疫分析方法奠定基础。应用活泼酯法和混合酸酐法分别合成人工免疫原和人工检测原,进行动物免疫获得抗血清。结果表明,经紫外吸收、红外光谱、荧光光谱和酶联免疫方法验证人工抗原合成成功,玉米赤霉烯酮-牛血清白蛋白、玉米赤霉烯酮-卵清蛋白偶联比分别为12:1和8:1,抗血清效价可达到102 400。合成的玉米赤霉烯酮免疫原具有良好免疫活性,检测原具有灵敏的检测性,为进一步建立玉米赤霉烯酮免疫学分析方法提供依据。
- 杨振东宁炜徐丹孙秀兰张银志朱瑜
- 关键词：玉米赤霉烯酮人工抗原免疫抗体
- 微囊藻毒素-LR阻抗型电化学免疫传感器的研究被引量：9
- 2009年
- 基于1，6-己二硫醇自组装技术和纳米金吸附作用相结合的方法固定微囊藻毒素抗体，采用循环伏安法及交流阻抗法研究了该修饰电极的电化学性质，并优化了微囊藻毒素-LR（MC—LR）的测定条件。结果表明，在优化条件下，阻抗变化值与MC—LR标准品质量浓度分别在0．25～2．0μg/L和2．0—95μg/L范围内呈良好的线性关系，其线性相关系数分别为0．9944和0．9972，检出限达0．085μg／L（S／N=3）；电极的重现性及稳定性较好，连续测定12次，相对标准偏差为7．8％；4℃下储存60d后阻抗响应信号无明显变化；应用于饮用水中MC—LR的测定，样品的回收率为93％～118％；检测时间为15min。该传感器无需标记、灵敏度高、稳定性好，可用于快速检测饮用水源水中的MC—LR。
- 石慧孙秀兰王洪新张银志李在均
- 关键词：免疫传感器微囊藻毒素-LR纳米金交流阻抗谱
- 扩展青霉在苹果汁中的生长与产毒特性被引量：4
- 2009年
- 扩展青霉在加工过程中的二次生长与产毒是苹果汁中棒曲霉素的主要来源之一,了解扩展青霉在此过程中的生长与产毒特性,可为对其进行控制提供依据。试验以苹果汁为培养基,研究了扩展青霉在静置培养和摇床培养条件(200 r/min)下的生长与产毒特性。结果表明,在静置和摇床培养过程中,扩展青霉的菌体生长和毒素产量均呈先升后降趋势,菌体生长量的峰值均晚于棒曲霉素1 d;摇床培养中菌体生长和棒曲霉素的变化快于静置培养2 d;摇床培养中的菌体生长量远大于静置培养,但毒素产量与之相近。
- 师俊玲朱静
- 关键词：苹果汁扩展青霉棒曲霉素产毒
- 新型1-烷基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐离子液体/过氧化氢酶电极电化学性能研究与应用被引量：5
- 2009年
- 合成了5种新型1-烷基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐类离子液体,并以离子液体为介质制备空白电极及过氧化氢酶电极。采用循环伏安法研究电极电化学行为,结果表明离子液体有优良的电化学性质。离子液体空白电极的基体峰电流都在数nA范围内,电化学窗口大于4V;不同离子液体酶电极的电化学行为存在明显差异。在5种离子液体中,仅有1-戊基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐能很好地保持酶活,呈现灵敏的电化学响应。此外,该酶电极还具有良好的稳定性,4℃保存30天后,电化学性质没有明显变化。在0.1mol/L的H3PO4缓冲溶液(pH7.0)中,该酶电极还原峰电流随溶液中H2O2浓度的增加而增大。当H2O2浓度在3.17×10-6～12.4×10-6mol/L之间,酶电极的还原峰电流符合线性关系,其检出限为1.1×10-6mol/L。方法已用于环境水中痕量H2O2的测定。
- 彭齐萍李在均王心灵孙秀兰
- 关键词：离子液体酶电极
- 枯草芽孢杆菌CCTCC M207209抗扩展青霉特性研究——活性物质的提取、稳定性与应用被引量：13
- 2010年
- 【目的】考察枯草芽孢杆菌CCTCC M207209抗扩展青霉活性蛋白在不同条件下的稳定性,评价其对苹果扩展青霉污染的抑制作用,为该菌的实际应用提供理论依据。【方法】在确定出最佳硫酸铵饱和度的基础上,用50%的硫酸铵饱和度沉淀发酵液中的活性蛋白,将所得粗蛋白用pH7.0的磷酸盐缓冲液溶解,用截留分子质量为8.0～10.0 ku的透析袋透析后,分别在121℃下处理30 min、经不同pH及0.05 mol/L不同金属离子处理8 h和紫外线照射不同时间后,用杯碟法测定其对扩展青霉的抑菌活性;在接种有15μL扩展青霉孢子悬液的苹果上分别接种30μL蛋白提取物、混合液体发酵物、无菌体发酵液和121℃灭菌30 min的带菌体发酵液,28℃培养7 d后,观察各孔处的发病率,并测量接种处病斑直径。【结果】提取发酵液中抗扩展青霉活性蛋白的最适硫酸铵饱和度为50%;粗蛋白提取物的抑菌活性在121℃处理30 min后无减小;pH为7时蛋白稳定性最高,处理8 h后抑菌活性无降低;紫外线照射前3 h,蛋白活性迅速降低,此后变化较小;不同pH和紫外线照射8 h后,蛋白的活性保持率均大于50%;0.05mol/L的Na+和Mg2+对抑菌活性有促进作用,Ca2+、Zn2+和Fe3+则使其完全失活。含菌体(1×108/mL)发酵物能够完全抑制低含量扩展青霉(1.5×105/mL)对苹果的侵染,活性蛋白可将其在苹果上的侵染率降低至55.6%,并可有效抑制其在苹果中的生长。【结论】枯草芽孢杆菌CCTCC M207209所产抗扩展青霉活性蛋白在广泛的pH、紫外线、温度条件下,具有良好的稳定性,能够有效抑制扩展青霉对苹果的侵染,在防治大田及采后苹果贮藏过程中扩展青霉的污染方面,有很好的应用前景。
- 孙卉师俊玲
- 关键词：枯草芽孢杆菌扩展青霉抗菌蛋白苹果贮藏
- 灰霉菌多克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2008年
- 建立了一种新的检测灰霉菌的方法。利用灰霉菌培养基中分离得到的菌丝体上清液抗原和孢外多糖抗原,通过免疫Balb/c小鼠后,经离心、沉淀和纯化后得到了灰霉菌抗体。实验结果表明,上清液抗原的的免疫效果要好于孢外多糖抗原的免疫效果。纯化后的抗体的效价大于13 000,最低检测限1 ng/mL。该研究为今后的ELISA法快速检测灰霉菌提供了一些参考依据。
- 张银志孙秀兰
- 关键词：灰霉菌多克隆抗体
- 食品中百草枯3种检测方法的比较被引量：9
- 2010年
- 通过对粮食作物中的百草枯残留检测方法进行比较研究,得到各种方法的优劣。结果:HPLC的最低检测限为12 mg/L,加标回收率为42%～52%,相对标准偏差(RSD)为4.43%;ELISA的最低检测限为0.005 mg/L,加标回收率为70%～80%,相对标准偏差(RSD)为8.15%;GICA的最低检测限为50 mg/L,通过一个标准的颜色反应系列,可以非常简便、快速的对样品进行现场检测,是快速检测发展的一个方向。
- 孙秀兰张银志杨婷婷邵景东
- 关键词：百草枯
- 脱氧雪腐镰刀烯醇（呕吐毒素）酶标抗原的合成及免疫抗体的制备被引量：1
- 2011年
- 利用琥珀酸酐法合成了脱氧雪腐镰刀烯醇-琥珀酸酐衍生物(3-HS-DON),并用DCC法将该衍生物与牛血清白蛋白(BSA)偶联得到的结合物(DON-HS-BSA)作为免疫抗原免疫新西兰大白兔,获得效价为1∶10000的特异性抗脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)的抗体。同时,用EDC法将3-HS-DON与辣根过氧化物酶(HRP)偶联得到酶标抗原(DON-HS-HRP)。通过圆二色光谱(CD)看到偶联后蛋白二级结构发生了改变,酶活稍有下降;用分光光度法测得酶标抗原酶活损失<5%,偶联物中DON与HRP的结合比为5.29。说明:该酶偶联物及制备的抗体可作为酶联免疫吸附法(ELISA)或免疫传感器法测试脱氧雪腐镰刀烯醇时所需的酶标抗原及抗体。
- 金萍孙秀兰张银志
- 关键词：抗体
- 花生、河虾过敏原蛋白的纯化及其抗体的制备和鉴定被引量：2
- 2010年
- 本文对花生、河虾中的主要过敏原蛋白进行分离纯化并制备抗体,同时探索胶体金作为免疫佐剂的可能性。结果表明,经电泳检验纯化后的过敏蛋白纯度超过90%,胶体金能够显著提高大白兔体内抗花生、河虾过敏蛋白的水平,花生与胶体金组的平均效价比弗氏佐剂组提高了一倍,其Ic50为34.28 ng/mL;河虾与胶体金组的平均效价比弗氏佐剂组提高了四分之一,其Ic50为43.95 ng/mL。该研究成功获得花生、河虾中主要过敏原组分及其抗体,且胶体金有可能开发为新一代免疫佐剂。
- 孙秀兰宁炜邵景东钱和朱卫娟袁耀萍
- 关键词：胶体金抗体
- 基于分子模拟的脱氧雪腐镰刀菌烯醇半抗原分子设计及免疫效果研究被引量：1
- 2010年
- 运用分子模拟软件Hyperchem 7.5,对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其6种不同连接臂修饰后的DON衍生物的分子构型进行量化计算,通过对其结构参数以及分子轨道的计算比较,获得高特异性、高生物活性的DON半抗原结构,避免了半抗原设计方面的盲目性。同时合成了其中的3种半抗原,通过碳二亚胺(EDC)法与BSA进行偶联免疫Bal b/c小鼠,制备多抗血清,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)和间接竞争ELISA法进行抗体效果的比较。结果表明,分子模拟计算结果与免疫实验的结果相一致,分子模拟对半抗原结构设计具有指导性意义。
- 孙秀兰金萍张银志
- 关键词：分子模拟
