辽宁省科学技术基金(2009408001-3)
- 作品数：12 被引量：14H指数：3
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- 人结肠癌CCL187细胞肿瘤球细胞干细胞特性研究
- 2012年
- 目的:研究体外培养条件下人结肠癌CCL187细胞系肿瘤球细胞的干细胞特性。方法:用无血清培养液和低吸附6孔培养板培养CCL187细胞,显微镜观察肿瘤球形成,荧光染料Hoechst33342染色观察干样细胞,用24孔培养板接种绘制CCL187细胞和肿瘤球细胞的生长曲线,顺铂和依托泊苷处理检测两种细胞抵抗化疗的能力。结果:CCL187细胞在无血清培养条件下可形成肿瘤球,肿瘤球细胞中存在浅染的干样细胞。两种细胞的生长曲线显示肿瘤球细胞的自我繁殖能力大于CCL187细胞。化疗药物处理显示肿瘤球细胞比一般肿瘤细胞具有更强的化疗抵抗性。结论:CCL187细胞的肿瘤球细胞具有肿瘤干细胞特性。
- 时伟红
- 关键词：肿瘤干细胞结肠癌
- 人KB细胞和CCL227细胞与肿瘤球细胞超微结构的比较
- 2012年
- 目的:比较人口腔癌KB细胞和结肠癌CCL227细胞与肿瘤球细胞的超微结构,为肿瘤干细胞研究提供更多的资料。方法:使用有血清培养液培养两种肿瘤细胞,无血清培养液分别诱导两种肿瘤细胞生成肿瘤球。常规方法制备KB细胞、CCL227细胞、KB肿瘤球细胞、CCL227肿瘤球细胞透射电子显微镜切片,透射电子显微镜观察、拍照。结果:在四组样本中,细胞基本表现两种形态。一种细胞表面有突起,核糖体、线粒体数量相对较多。另一种细胞表面无突起,细胞核周围出现微丝,核糖体、线粒体数量减少,核内染色质出现靠边,后一种细胞在肿瘤球细胞中较多见。结论:伴随生理功能的改变,肿瘤干细胞的结构也发生了一些改变,这些改变可能会使蛋白合成下降。
- 时伟红刘冬娟
- 关键词：口腔癌结肠癌超微结构
- 人口腔上皮样癌KB细胞及其SP细胞在NOD/SCID小鼠皮下成瘤性的研究被引量：5
- 2010年
- 目的:研究KB细胞及其SP细胞在NOD/SCID小鼠中的生长。方法:用流式细胞仪分离SP细胞,分别用KB细胞和分离出的SP细胞种植NOD/SCID小鼠皮下,观察移植瘤的生长。结果:注射1×106、1×107个KB细胞的鼠产生移植瘤,注射1×104、1×105个KB细胞的鼠均未产生移植瘤。注射1×105个SP细胞的鼠产生移植瘤,注射1×102、1×103、1×104个SP细胞的鼠均未产生移植瘤。结论:SP细胞产生移植瘤的能力比KB细胞强。移植瘤组织病理特点与人口腔粘膜癌基本一致。
- 时伟红李翀周生来王光朗雪楠郑志红王禄增
- 关键词：SP细胞
- 人结肠癌ccl227细胞肿瘤球生长特性及裸鼠移植瘤形成研究被引量：5
- 2011年
- 目的:研究人结肠癌ccl227细胞肿瘤球的生长特性及裸鼠移植瘤形成。方法:将培养在SSM中的ccl227细胞移入含有生长因子的SFM中接种在低吸附6孔培养板,观察肿瘤球的生长情况。将肿瘤球移回到SSM中,接种在培养皿中,观察肿瘤球的分化。96孔板接种检测ccl227细胞和肿瘤球细胞的克隆形成率。不同数量的ccl227细胞和肿瘤球细胞分别接种裸小鼠,观察移植瘤形成。结果:在SFM及低吸附的培养条件下观察到了肿瘤球的形成,呈悬浮状态,细胞圆而小。被移回到SSM中的肿瘤球,细胞逐渐贴壁、伸展。4.2%ccl227细胞形成克隆,13.5%肿瘤球细胞形成克隆。在裸小鼠移植中,高于106的ccl227细胞产生了移植瘤,而移植肿瘤球细胞仅需103个细胞。结论:在SFM培养条件下,ccl227细胞肿瘤球细胞可富集,血清可促进肿瘤球细胞分化。ccl227肿瘤球细胞比非肿瘤球细胞具有更强的致瘤性。
- 时伟红刘津京王惟周生来郑志红
- 关键词：移植瘤结肠癌
- 人结肠癌ccl227细胞系肿瘤干细胞生长特性研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究体外培养条件下人结肠癌cc l227细胞系肿瘤干细胞的生长特性。方法:用荧光染料Hoechst33342染色培养在SSM和SFM中的cc l227细胞,荧光显微镜观察SP细胞。用6孔板接种的方法绘制cc l227细胞的生长曲线。显微镜观察肿瘤球的生长。结果:在两种培养条件下均观察到cc l227细胞系中存在浅染和拒染的SP细胞。生长曲线显示在两种培养条件下,cc l227细胞的繁殖能力不同。在玻璃培养瓶和低吸附6孔板中均可以培育出肿瘤球,但形态有些不同。结论:SSM和SFM培养条件下,cc l227细胞中均存在SP细胞;在SFM中,cc l227细胞增殖缓慢;SFM可培育出富含肿瘤干细胞的肿瘤球。在低吸附条件下,更易形成悬浮的肿瘤球。
- 时伟红李翀刘津京王惟郑志红
- 关键词：SP细胞结肠癌
- 人口腔上皮样癌KB细胞系SP细胞及肿瘤球生长的研究被引量：2
- 2010年
- 目的:研究不同条件下口腔上皮样癌KB细胞及肿瘤球的生长特点。方法:用荧光染料Hoechst33342染色培养在有血清和无血清培养基中的KB细胞,用荧光显微镜观察SP细胞的形态。MTT法绘制KB细胞生长曲线。显微镜观察肿瘤球的生长。结果:用荧光显微镜在有血清和无血清培养基中均观察到KB细胞系中存在浅染和拒染的SP细胞,部分细胞出现偏染现象。酶标仪检测结果显示在有血清和无血清培养液培养的KB细胞,繁殖能力不同。在无血清培养液中可以培育出肿瘤球。结论:有血清和无血清培养液培养的KB细胞生长存在差异,肿瘤细胞可能存在不对称分裂,无血清培养液可培育出繁殖能力强的肿瘤球。
- 时伟红李翀王唯郑志红王禄增
- 关键词：SP细胞口腔癌
- 人胃癌细胞系HGC-27肿瘤球细胞干样特性研究
- 2012年
- 目的:探讨体外培养条件下人胃癌细胞系HGC-27肿瘤球细胞的干样特性。方法:SFM培养人胃癌细胞系HGC-27的肿瘤球,细胞计数绘制HGC-27细胞和肿瘤球细胞的生长曲线,96孔培养板接种计算细胞的克隆形成能力。结果:成功培养出HGC-27细胞的肿瘤球。生长曲线和克隆形成实验显示,肿瘤球细胞的增殖和克隆形成能力高于HGC-27细胞。结论:HGC-27细胞可以培养成肿瘤球细胞,肿瘤球细胞比HGC-27细胞更具有干样特性。
- 时伟红刘京津王惟张梅英郑志红
- 关键词：胃癌
- β-连环蛋白在KB细胞及其肿瘤球细胞中的表达
- 2011年
- 目的:研究信号通路β-连环蛋白在人口腔上皮样癌KB细胞及其肿瘤球细胞中的表达。方法:培养KB细胞及其肿瘤球,分别提取KB细胞和肿瘤球细胞的总RNA,设计引物,使用RT-PCR方法检测β-连环蛋白在KB细胞和肿瘤球细胞中的转录,使用Western blot方法检测β-连环蛋白在两种细胞中的翻译。结果:RT-PCR方法检测显示两种细胞的β-连环蛋白的结果均为阳性,KB细胞中β-连环蛋白mRNA含量多于肿瘤球细胞。Western bolt方法检测显示结果均为阳性,KB细胞中β-连环蛋白含量少于肿瘤球细胞。结论:在KB细胞及其肿瘤球细胞中β-连环蛋白转录并积累。
- 时伟红李翀刘津京王唯郑志红
- 关键词：Β-连环蛋白口腔癌
- 人结肠癌ccl227细胞及其肿瘤球细胞信号通路β-catenin表达的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究信号通路β-连环蛋白(β-catenin)在人结肠癌ccl227细胞及其肿瘤球细胞中的表达。方法:培养ccl227细胞及其肿瘤球,分别提取ccl227细胞和肿瘤球细胞的总RNA,设计引物,使用RT-PCR方法检测β-catenin在ccl227细胞和肿瘤球细胞中的转录,使用蛋白质印迹法检测β-catenin在2种细胞中的翻译。结果:RT-PCR方法检测显示,ccl227细胞和肿瘤球细胞的β-catenin的表达结果均为阳性,电泳条带亮度相近。蛋白质印迹法检测显示,ccl227细胞β-catenin为阴性,肿瘤球细胞β-catenin为阳性。结论:ccl227细胞中β-catenin的转录水平与肿瘤球细胞相近,但2种细胞中β-catenin检测结果相差很大,说明存在转录后调节。
- 时伟红刘京津王惟郑志红
- 关键词：结肠肿瘤Β-连环蛋白信号传导
- TNNT3突变转基因小鼠筛选及肌钙蛋白表达的研究
- 2012年
- 目的:研究TNNT3(R69H)突变转基因小鼠快反应骨骼肌肌钙蛋白表达和组织结构的变化。方法:将杂合TNNT3(R69H)突变转基因小鼠与野生型C57BL/6J小鼠杂交,选同窝阳性杂合后代鼠进行交配,再用野生型C57BL/6J小鼠对后代进行检测,得到TNNT3(R69H)突变转基因纯合个体。取野生型C57BL/6J小鼠、杂合转基因小鼠、纯合转基因小鼠的快反应骨骼肌进行RT-PCR和WESTERN实验并制备透射电镜切片。结果:RT-PCR和WESTERN电泳条带从亮到暗依次为纯合转基因小鼠、杂合转基因小鼠、野生型C57BL/6J小鼠。电镜结果显示转基因小鼠快反应骨骼肌明暗带不清、出现肌纤维间水肿和线粒体空泡等现象。结论:TNNT3(R69H)突变纯合转基因小鼠快反应骨骼肌中TNNT3的mRNA和蛋白质量高于杂合转基因小鼠、杂合转基因小鼠高于野生型C57BL/6J小鼠,并且转基因的表达使快反应骨骼肌结构异常。
- 时伟红李兆阳杨葳李翀刘京津郑志红
- 关键词：转基因小鼠肌钙蛋白
