河南省科技攻关计划(0624410098)
- 作品数:7 被引量:54H指数:4
- 相关作者:吴志明闫若潜拜廷阳杨增岐张志凌更多>>
- 相关机构:河南省动物疫病预防控制中心周口市动物疫病预防控制中心西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪链球菌病研究进展被引量:22
- 2007年
- 猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人兽共患病病原体,能够引起猪的疫病,人类感染该菌可导致脑膜炎、败血症,甚至死亡。该菌对养猪业造成严重经济影响,对公共卫生事业构成巨大威胁。由于猪链球菌血清型较多,抗原结构复杂,在临床上又可呈现不同的症状,如败血症、脑膜脑炎、心内膜炎、肺炎、化脓性淋巴结炎、关节炎等,还常常与其他疾病发生合并感染。近几年来,该病的发病率和死亡率有逐年上升趋势。链球菌的致病性已引起临床工作者和科研人员的广泛关注和重视,国内外许多学者对猪链球菌做了大量的研究工作,已发现的猪链球菌2型的致病因子包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、细胞外因子、蛋白质片段和IgG结合蛋白、溶血素等。
- 拜廷阳闫若潜吴志明普志平盛敏杨增岐
- 关键词:猪链球菌致病因子人兽共患病
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白间接ELISA诊断方法的建立和应用被引量:2
- 2009年
- 以纯化的原核表达的猪圆环病毒2型(PCV-2)重组结构蛋白(rCap蛋白)为包被抗原,建立PCV-2间接ELISA诊断方法;对抗原最适包被浓度、待检血清稀释浓度、重组抗原包被条件、封闭液的筛选、阴阳性临界值等条件进行了优化;对优化后的ELISA检测方法进行特异性试验、临床应用试验;组装试剂盒并进行试剂盒保存期试验。优化反应条件后确定的抗原最适包被浓度为2.815μg/mL,抗原最佳包被条件为37℃2 h;血清最适稀释度为1∶40,酶标抗体最适稀释度为1∶500,最佳封闭液为1%BSA;阴阳性临界值判定标准为D450 nm≥0.33,判为阳性,D450 nm<0.33,判为阴性。特异性试验结果表明,只有PCV-2阳性血清反应后的D450 nm>0.33,包括抗PCV-1阳性血清在内的其他5种抗血清反应后的D450 nm<0.33,说明所建立的ELISA方法具有良好的特异性。经对临床疑似PCV-2感染的100份血清样品进行检测,阳性检出率为69%。组装试剂盒在4℃条件下至少可保存12个月以上,说明所建立的诊断方法可以在生产中大量推广应用。本研究成功建立了能特异性检测抗PCV-2血清抗体的ELISA检测方法。
- 闫若潜吴志明刘光辉谢彩华王东方王英华贾松涛
- 关键词:猪圆环病毒2型CAP蛋白间接ELISA试剂盒
- 猪致病性链球菌的分离鉴定被引量:6
- 2007年
- 采集33例临床症状疑似猪链球菌感染猪的全血及内脏器官进行涂(触)片染色镜检,取有球菌感染的样品16份进行血琼脂平板分离纯化试验;根据血琼脂平板上菌落形态、溶血情况及对单个菌落涂片染色镜检结果,共筛选出12份可疑样品,进一步采用液体培养基对12份样品进行增菌及纯化培养;选取纯化培养菌进行链球菌生化试验,结果共鉴定出11株纯化的猪链球菌;11株猪链球菌均对小鼠表现出高致病力。
- 拜廷阳吴志明刘光辉杨增岐普志平闫若潜
- 关键词:猪链球菌致病力
- 猪链球菌9型荧光定量PCR检测方法的建立及应用
- 根据GenBank已登录的猪链球菌9型(SS9)cps9H基因保守部分序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,以定量的10倍系列稀释含cps9H部分基因的T载体重组质粒(pGEX-T-cps9H)为标准品,进行荧光定量P...
- 张健拜廷阳闫若潜赵明军盛敏吴志明
- 关键词:猪链球菌9型实时定量PCR
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白间接ELISA诊断方法的建立和应用
- 以纯化的原核表达的猪圆环病毒2型(PCV2)重组结构蛋白(rCap蛋白)为包被抗原,建立PCV2间接ELISA诊断方法;对最适包被抗原浓度、待检血清稀释浓度、重组抗原包被条件、封闭液的筛选、阴阳性临界值等条件进行了优化;...
- 张志凌闫若潜吴志明谢彩华王东方王英华贾松涛
- 关键词:猪圆环病毒2型CAP蛋白间接ELISA试剂盒
- 文献传递
- 猪链球菌9型荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量:14
- 2008年
- 【目的】建立猪链球菌9型(SS9)的快速诊断和定量分析方法。【方法】根据GenBank已登录的SS9cps9H基因保守部分序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,建立了SS9的TaqMan荧光定量PCR检测方法(Taq-Man FQ-PCR),并进行了敏感性、特异性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省11例疑似猪链球菌临床样品进行了应用检测,并与常规PCR方法进行了对比。【结果】成功建立了SS9的FQ-PCR检测方法和定量标准曲线,FQ-PCR方法的检测灵敏度可达1.0拷贝/μL,特异性高且重复性良好;利用该方法对11份临床疑似猪链球菌感染组织病料进行的应用检测表明,其中有3份样品为阳性,与常规PCR方法检测的阳性符合率为100%。【结论】成功建立的SS9 FQ-PCR诊断方法,可用于临床SS9型病菌感染的快速诊断及样品中细菌含量的定量分析。
- 拜廷阳杨增岐吴志明普志平赵明军闫若潜
- 关键词:猪链球菌9型荧光定量PCR
- 猪链球菌种与9型猪链球菌二重PCR检测方法的建立及应用
- 为了建立猪链球菌(Streptococcu ssuis,SS)种与9型猪链球菌(SS9)的快速诊断方法,本研究根据GenBank已登录的SS种特异性基因gdh和SS9型特异性基因CPS9H设计引物,以标准SS9株基因组D...
- 刘梅芬吴志明闫若潜盛敏赵明军拜廷阳
- 关键词:二重PCR
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白间接ELISA诊断方法的建立和应用
- 以纯化的原核表达的猪圆环病毒2型(PCV2)重组结构蛋白(rCap蛋白)为包被抗原,建立PCV2间接ELISA诊断方法;对最适包被抗原浓度、待检血清稀释浓度、重组抗原包被条件、封闭液的筛选、阴阳性临界值等条件进行了优化;...
- 张志凌闫若潜吴志明谢彩华王东方王英华贾松涛
- 关键词:猪圆环病毒2型CAP蛋白间接ELISA试剂盒
- 文献传递
- 猪链球菌1、7、9型多重PCR诊断方法的建立及初步应用
- 为了建立猪链球菌(Streptococcus suis.SS)1、7、9型(SS1.SS7、SS9)的快速鉴别诊断和分型方法,本研究根据GenBank已登录的SS1型型特异性的CPS1I基因、7型CPS7H基因、9型CP...
- 张健闫若潜吴志明盛敏王英华拜廷阳
- 关键词:猪链球菌多重PCR
- 文献传递
- 猪链球菌种与9型猪链球菌二重PCR检测方法的建立及应用
- 为了建立猪链球菌(Streptococcus suis,SS)种与9型猪链球菌(SS9)的快速诊断方法,本研究根据GenBank已登录的SS种特异性基因gdh和SS9型特异性基因CPS9H设计引物,以标准SS9株基因组D...
- 刘梅芬吴志明闫若潜盛敏赵明军拜廷阳
- 关键词:二重PCR
- 文献传递