广东省自然科学基金(5004750)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
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- 不同反应性抗体分子产生机制的研究
- 2006年
- 宁云山李妍李明
- 关键词：抗体分子反应性抗原分子免疫球蛋白
- 幽门螺杆菌Lpp20抗原的原核表达及其临床应用
- 2007年
- 目的 获得原核重组表达的人幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）脂蛋白（lipoprotein20,Lpp20）,并将其用于Hp感染的血清学检测.方法 应用PCR技术从Hp标准株NCTC11639染色体DNA中扩增出Lpp20的编码基因片段,先进行T-A克隆和测序,并与Genbank公布的其它Hp菌株基因序列比较,再将目的 基因克隆至表达载体pGEX-4T-1上,在E.coli TOP10中进行表达并进行GST-亲和层析纯化,用Western blot方法检测纯化产物Lpp20与Hp感染患者血清的反应,以Lpp20为包被抗原建立ELISA法对143份血样进行检测,并以试剂盒为参照.结果 扩增的Lpp20基因全长528 bp（GenBank登录号为DQ106902）,与GebBank上公布的其它Hp菌株的序列相比较,核苷酸序列的同源性为96%～97%,推定氨基酸序列的同源性为98%～100%,表达的Lpp20融合蛋白分子量约为48 kDa,纯化产物可被Hp感染患者血清识别,以重组的Lpp20抗原建立的ELISA法检测Hp感染与试剂盒没有显著性差异.结论 重组Lpp20蛋白具有较好的抗原性,可用Hp感染的临床血清学检测及流行病学研究.
- 宁云山李妍罗军董文其李明
- 关键词：幽门螺杆菌LPP20克隆抗原性
- 幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白抗体水平与胃癌的相关性被引量：2
- 2007年
- 目的探讨幽门螺杆菌(HP)中性粒细胞激活蛋白(NAP)抗体水平与胃癌的相关性。方法应用ELISA方法,对正常人和HP感染患者外周血中的NAP抗体水平进行检测,并用PCR方法检测HP临床菌株中nap基因存在状况。结果所有检测的HP临床菌株中都存在napA基因;正常人血清中NAP抗体阳性率为42.6%;胃癌患者血清HP-NAP抗体阳性率为97.5%,明显高于胃溃疡患者92.9%和慢性胃炎患者85.7%的抗体阳性率;胃癌患者NAP抗体水平明显高于胃炎患者,但与胃溃疡患者无明显差异;NAP抗体水平与患者年龄无明显相关性。结论NAP抗体水平与胃癌有一定相关性,提示NAP蛋白可能有致胃癌的作用。本研究为HP相关性胃癌的致病机制、诊断和疫苗研究提供基础。
- 龙敏李妍罗军曾方银宁云山李明
- 关键词：幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白抗体检测胃肿瘤
- 从噬菌体随机肽库中筛选SARS病毒N蛋白表位模拟肽的研究被引量：3
- 2006年
- 目的获得具有生物学活性的SARSN蛋白的模拟肽。方法以抗SARS病毒N蛋白的单克隆抗体作为固相筛选分子,免疫筛选噬菌体随机十二肽库,并采用夹心ELISA、竞争抑制试验鉴定阳性克隆。结果经噬菌体富集后,从随机筛选的各46个克隆中得到N蛋白的2个不同表位,即由ELISA鉴定出单克隆抗体C00835个阳性克隆,确定氨基酸序列GXLXTPXXXXGT为SARSN蛋白的一个表位;单克隆抗体C03941个阳性克隆,确定氨基酸序列TTLPXXXXAXXX为SARS病毒N蛋白的另一个表位。结论用噬菌体随机12肽库成功筛选得到SARSN蛋白的2个不同模拟表位,为用SARS表位去探索其病毒的结构及疫苗的研制创造了条件。
- 杨海燕李妍宁云山董文其李明
- 关键词：SARS冠状病毒表位噬菌体肽库
