湖南省教育厅科研基金(13A078)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 相关作者：唐云涛李菁彭清忠杜次谢毓更多>>
- 相关机构：吉首大学更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 基于PsbA-trnH,RbcL和trnL-F序列的野生葡萄系统发育被引量：1
- 2014年
- 采用PCR技术从湘西地区的3种野生葡萄中分离PsbA-trnH、RbcL和trnL-F基因片段,克隆至pMD18-T载体中测序,结合GenBank/EMBL/DDBJ中公布的其他葡萄科植物相应cpDNA基因信息,使用Mega4构建系统发育进化树,分析其系统发育关系.结果显示,PsbA-trnH,RbcL和trnL-F这3种cpDNA基因序列均能用于葡萄科属间的分子鉴定,但结果与传统形态学分类存在一些差异,RbcL能用于葡萄属内种间的分子鉴定.
- 唐云涛粟桂蓉谢毓易浪波
- 关键词：野生葡萄PSBA-TRNHRBCLTRNL-F系统发育
- 蛇足石杉赖氨酸脱羧酶基因的克隆、原核表达及其功能分析被引量：9
- 2014年
- 赖氨酸脱羧酶(Lysine decarboxylase,LDC)是抗老年痴呆药——石杉碱甲生物合成的第一个酶。为了研究蛇足石杉中LDC的特性和功能,以其总RNA为模板,通过RT-PCR扩增得到2个赖氨酸脱羧酶基因LDC1和LDC2,克隆至pMD?19-T中测序发现,两基因同源性为95.3%,分别编码212和202个氨基酸。将两基因引入pET-32a(+)构建重组表达质粒pET-32a(+)/LDC1和pET-32a(+)/LDC2,分别转入BL21(ED3)中进行诱导表达,在30℃条件下获得可溶性表达产物Trx-LDC1和Trx-LDC2;采用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,建立酶促反应体系分析其脱羧酶活性,薄层层析(TLC)检测表明重组融合蛋白Trx-LDC1和Trx-LDC2均能催化赖氨酸脱羧生成尸胺。利用生物信息学软件分析发现LDC1和LDC2理化性质存在差异,但预测的二级结构和三维结构基本一致。
- 杜次李菁唐云涛彭清忠
- 关键词：蛇足石杉基因克隆原核表达酶活性
