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国家科技部专项基金(2013ZXl0004221)
作品数:
2
被引量:4
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相关作者:
刘志杰
白雪梅
郑翰
徐建国
纪少博
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相关机构:
传染病预防控制国家重点实验室
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发文基金:
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刘志杰
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鉴定7种新型猪链球菌荚膜多糖基因型多重PCR方法的建立(英文)
被引量:4
2014年
目的建立针对发现的7种新型别荚膜多糖基因簇(cps)的多重PCR(multiplex PCR)鉴定方法。方法选择wzy作为靶基因,先以单重PCR筛选每对引物的扩增效率与特异性,再将筛选出的各对引物组建多重PCR,验证其特异性及敏感性后,用其检测91株血清学不可分型的猪链球菌分离株。结果所建立的多重PCR体系的敏感性为每个反应最低可检测到100pg DNA。在检测的91株菌中,71株可用本研究建立的多重PCR法鉴定,属于新的cps型别。结论成功建立了特异的可鉴定7种新发现cps型别的多重PCR方法,并且成功应用此法鉴定了大部分血清学不可分型的猪链球菌分离菌株。
刘志杰
白雪梅
纪少博
徐建国
郑翰
关键词:
猪链球菌
血清型
多重PCR
快速检测猪链球菌的环介导等温扩增方法
2016年
目的建立猪链球菌(S.suis)的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法通过BLASTn序列比对确定较为保守的S.suis种特异基因,用软件Primer ExplorerV4设计针对靶基因的LAMP试验引物;分别用煮沸法和试剂盒提取法提取基因组做敏感性试验,并用62株非S.suis菌株评价了实验的特异性;再用100株分离自不同地区不同时间的S.suis菌株评价该方法的可靠性。结果确定了S.suis种特异性基因dnaN为靶基因,并针对该基因建立了检测S.suis的LAMP方法。敏感性实验中,每个反应的检测下限是31.25fg纯DNA,相当于14个拷贝;煮沸法的检测下限是每个反应27CFU。在对62株非S.suis菌株与有争议的S.suis菌株的特异性评价实验中,未发现有假阳性。结论成功建立了针对dnaN基因检测S.suis的LAMP方法。
邱宏
刘志杰
郑瀚
关键词:
猪链球菌
LAMP
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