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国家自然科学基金(30200313)

作品数：4 被引量：14H指数：3
相关作者：朱瑾周锦川吴军韩德民贺伟峰更多>>
相关机构：第三军医大学首都医科大学第三军医大学西南医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 2篇突变体
  • 2篇细胞
  • 2篇小鼠
  • 2篇鼻炎
  • 2篇变应性
  • 2篇变应性鼻炎
  • 2篇EOTAXI...
  • 1篇蛋白
  • 1篇毒性
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达载体
  • 1篇嗜酸
  • 1篇嗜酸粒细胞
  • 1篇逆转
  • 1篇逆转录
  • 1篇逆转录聚合酶...
  • 1篇趋化
  • 1篇趋化因子
  • 1篇重组腺病毒
  • 1篇转录

机构

  • 2篇第三军医大学
  • 2篇首都医科大学
  • 2篇重庆医科大学
  • 2篇第三军医大学...

作者

  • 4篇朱瑾
  • 3篇周锦川
  • 2篇贺伟峰
  • 2篇韩德民
  • 2篇吴军
  • 1篇张小容
  • 1篇陈烯伟
  • 1篇易绍萱
  • 1篇郑红

传媒

  • 2篇中华耳鼻咽喉...
  • 1篇第三军医大学...
  • 1篇医学研究生学...

年份

  • 3篇2006
  • 1篇2005
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
嗜酸粒细胞亲合素N端突变体重组腺病毒在小鼠变应性鼻炎中的作用被引量：9
2006年
目的获取人嗜酸粒细胞亲合素(Eotaxin)N端突变体(Met/Eotaxin)重组腺病毒,探讨其在小鼠变应性鼻炎中的作用。方法从人外周血单个核细胞总RNA中克隆人400bp的Eotaxin基因;通过N端点突变获取Met/Eotaxin基因,构建pAdtrack-CMV-Met/Eotaxin腺病毒穿梭质粒;将该质粒在大肠杆菌BJ5183中与腺病毒基因组质粒进行同源重组;将Met/Eotaxin重组腺病毒载体在AD293细胞中包装、扩增获取Met/Eotaxin重组腺病毒(Ad-Met/Eotaxin);采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白印迹杂交(Western blot)对Met/Eotaxin重组腺病毒的正确性进行鉴定。采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发诱导小鼠变应性鼻炎,40只小鼠随机分为变应性鼻炎组和Ad-Met/Eotaxin组。Ad-Met/Eotaxin组在每次激发前30min予以每只小鼠2ml滴度为5×109pfu/ml的Ad-Met/Eotaxin腹腔注射。比较二组动物变应性鼻炎症状和鼻黏膜形态学改变,并在荧光显微镜下观察腺病毒转染效率标志物———绿色荧光蛋白在鼻黏膜等组织中的表达。结果PCR和Western blot结果显示Ad-Met/Eotaxin构建正确;Ad-Met/Eotaxin腹腔注射后可高效转染小鼠鼻黏膜;Ad-Met/Eotaxin可显著减轻小鼠变应性鼻炎症状以及鼻黏膜形态学改变。结论Ad-Met/Eotaxin具有阻断小鼠变应性鼻炎的作用。
朱瑾韩德民周锦川贺伟峰张小容郑红吴军
关键词：趋化因子突变体
Eotaxin突变体的构建及表达
2006年
目的获得人嗜酸粒细胞趋化因子EotaxinN末端突变体并构建其原核表达载体。方法用点突变的方法,在PT-Eotaxin的基础上用Met替代(单个)EotaxinN-端肽氨基酸残基,获得突变体Met-Eotaxin,使用定向克隆技术将Met-Eotaxin克隆到原核表达载体PET30a+上,获得其表达载体。结果获得了8个新的EotaxinN-端突变体Met-Eotaxin及其原核表达载体。结论EotaxinN-端突变体Met-Eotaxin及其原核表达载体的构建,为突变体表达和生物学活性检测,筛选CCR3拮抗剂奠定了基础。
周锦川朱瑾
关键词：EOTAXIN突变体原核表达载体
Eotaxin原核表达载体的构建及初步表达被引量：3
2006年
目的:获得人嗜酸性粒细胞趋化因子Eotaxin基因,构建其原核表达载体,并初步表达成熟的Eotaxin,为进一步构建其N-端突变体,检测其生物学活性作准备。方法:提取外周血单个核细胞细胞总RNA,经RT-PCR扩增编码人Eotaxin全长cDNA序列,并将其克隆至T载体进行序列测定,然后构建于原核表达载体PET30 a+中,并转入大肠杆菌表达。结果:RT-PCR扩增得到了400 bp左右的DNA片段,序列分析发现其中包含了GenBank中报道的编码Eotaxin cDNA序列,并获得了正确表达。结论:Eotaxin cDNA的克隆及其原核表达载体的构建及表达,为进一步构建其N-端突变体,纯化和检测其生物学活性奠定了基础。
周锦川朱瑾
关键词：EOTAXIN逆转录聚合酶链反应
细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4胞外区蛋白阻断小鼠变应性鼻炎的研究被引量：6
2005年
目的探讨变应性鼻炎免疫治疗的新方法。方法构建细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxic T lymphocyteassoc iated antigen4,CTLA4)胞外区蛋白的酵母表达系统,以获取具有生物学活性的CTLA4胞外区蛋白;采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发诱导小鼠变应性鼻炎。CTLA4胞外区蛋白组在每次激发前予以CTLA4胞外区蛋白200μg/只腹腔注射,观察小鼠变应性鼻炎相关症状和鼻黏膜形态学改变。结果通过CTLA4胞外区蛋白的酵母表达系统可获得相对分子质量为28000、经蛋白免疫印迹(Westernblot)鉴定的CTLA4胞外区蛋白。该纯化蛋白能显著抑制混合淋巴细胞反应中T细胞的增殖,抑制率为95.4%。变应性鼻炎组小鼠在OVA激发后出现流涕、喷嚏等症状;鼻黏膜出现组织水肿、充血、炎性细胞渗出等形态学改变。CTLA4胞外区蛋白组小鼠鼻部症状不明显,鼻黏膜无明显形态学改变。结论CTLA4胞外区蛋白可阻断小鼠变应性鼻炎的发生,其作用机理可能与其抑制T细胞活化有关。
朱瑾韩德民吴军贺伟峰陈烯伟易绍萱
关键词：卵白蛋白细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4变应性鼻炎小鼠阻断混合淋巴细胞反应
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