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国家重大基础研究前期研究专项(2003CCC00700)

作品数：1 被引量：6H指数：1
相关作者：贺智敏周敏陈主初杨芳刘孝荣更多>>
相关机构：中南大学更多>>
发文基金：国家重大基础研究前期研究专项国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇原核表达
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇金属硫蛋白
  • 1篇抗血清
  • 1篇纯化

机构

  • 1篇中南大学

作者

  • 1篇刘孝荣
  • 1篇杨芳
  • 1篇陈主初
  • 1篇周敏
  • 1篇贺智敏

传媒

  • 1篇细胞与分子免...

年份

  • 1篇2006
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人金属硫蛋白MT-2a的原核表达、纯化及其抗血清的制备被引量：6
2006年
目的:在大肠杆菌中表达人金属硫蛋白(MT)-2a与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白,并制备兔抗MT-2a抗血清。方法:人MT表达菌株BL21/GST-MT-2a经IPTG诱导、超声裂解及GlutathioneSepharose4B亲和层析纯化后,以可溶性融合蛋白GST-MT-2a免疫新西兰大白兔,制备抗血清。用双向凝胶免疫扩散和ELISA检测抗血清的效价,用Westernblot检测抗血清的特异性。结果:经诱导表达及亲和层析纯化,每L菌液可获得可溶性融合蛋白GST-MT-2a38mg。以此融合蛋白免疫新西兰大白兔制备的抗血清,双向免疫扩散效价>1∶256,ELISA效价>1×10-7。Westernblot检测证明抗血清的特异性良好。结论:人MT-2a在大肠杆菌中得到高效表达,以纯化的GST-MT-2a可溶性融合蛋白免疫家兔得到高效价、高特异性的抗血清,为进一步研究MT-2a蛋白的生物学功能提供了重要的制剂。
周敏杨芳贺智敏刘孝荣陈主初孙麟孙宇
关键词：金属硫蛋白原核表达融合蛋白抗血清
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