广东省中医药管理局基金(2007129)
- 作品数：8 被引量：19H指数：3
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- β-淀粉样肽25-35诱导PC12细胞周期紊乱及其可能机制的研究
- 2012年
- 目的探讨β-淀粉样肽25-35(Aβ25-35)对PC12细胞周期及其相关基因表达的影响。方法 25μmol/LAβ25-35处理PC12细胞,用流式细胞术观察细胞周期变化,电泳观察凋亡条带,RT-PCR和Westernblot检测p21、CyclinD1、E2F1、pRb表达。结果 Aβ25-35处理后8h,PC12细胞S期明显增加(P<0.01),但16、24h逐渐降低(P<0.01);16h后细胞凋亡明显增加(P<0.01)。Aβ25-35处理4h后,p21mRNA和蛋白表达降低;CyclinD1、E2F1mRNA和CyclinD1、pRb蛋白表达增高(P<0.05)。结论 Aβ25-35诱导同步化的PC12细胞周期紊乱及凋亡,可能与下调p21表达和上调CyclinD1、pRb和E2F1表达有关。
- 谢朝阳祝其锋吴斌华陈小芳丁航
- 关键词：Β-淀粉样肽PC12细胞细胞周期凋亡
- 原花青素对HL-60细胞分化及凋亡的影响
- 2014年
- 目的探讨原花青素(PAC)对HL-60细胞增殖、诱导分化及凋亡的影响。方法 HL-60细胞经不同浓度的PAC作用相应时间后,用CCK-8法检测细胞生长状况,分析PAC对HL-60细胞增殖抑制;Wright染色,光学显微镜观察细胞形态变化;通过流式细胞仪检测分析细胞周期变化和测定髓系较成熟阶段细胞分化抗原CD14、CD11b的表达。结果用不同终浓度PAC在体外与HL-60细胞共培养,细胞抑制率随浓度增加而明显增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中浓度为20 mg/L的PAC作用HL-60细胞24 h,增殖抑制率为(72.3±1.8)%,高浓度PAC与HL-60体外培养72 h,部分细胞死亡;20 mg/L的PAC诱导HL-60细胞24 h,少数细胞出现核凹陷变形,作用48 h部分细胞分化为较成熟阶段细胞,40 mg/L的PAC作用HL-60细胞48 h,细胞出现凋亡改变;20 mg/L的PAC诱导HL-60细胞24 h,细胞周期G0/G1期百分比明显增高,S期细胞数明显减少,而40 mg/L的PAC作用HL-60细胞24 h,细胞周期G2/M期细胞百分比明显增高,并出现凋亡峰。20 mg/L的PAC诱导HL-60细胞24 h,流式细胞检测髓系细胞分化抗原CD14表达明显增高,CD11b表达稍增高。结论 PAC能抑制HL-60细胞增殖,低浓度PAC诱导其分化为较成熟阶段细胞,高浓度PAC则可能诱导HL-60细胞发生凋亡。
- 谢朝阳吴斌华陈小芳陈秋生祝娟祝其锋
- 关键词：HL-60细胞细胞周期诱导分化
- 原花青素诱导HL-60细胞分化及其机制的研究被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在探讨原花青素(proanthocyanidin,PAC)诱导人急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60细胞分化的可能机制。用PAC 20 mg/L处理HL-60细胞24 h,CCK-8法检测细胞生长状况,分析PAC对HL-60细胞的增殖影响;应用光学显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术分析细胞周期变化和测定细胞分化抗原CD14、CD11b表达;Western blot检测P21、Cyclin D1和CDK4表达变化。结果表明,PAC 20 mg/L作用HL-60细胞24 h,细胞抑制率明显增高(73.2±1.5)%(P<0.01),髓系细胞分化抗原CD14表达明显增高(P<0.01),CD11b表达稍增高,细胞周期中G0/G1期细胞百分率明显增高(P<0.05),S期细胞明显减少(P<0.01);PAC 20 mg/L与HL-60细胞共培养4 h,部分细胞向成熟阶段细胞分化;PAC 20 mg/L处理HL-60细胞12、24和48 h,P21蛋白表达增加,Cyclin D1和CDK4蛋白表达降低。结论:PAC能抑制HL-60细胞增殖并诱导其分化,细胞周期阻滞于G0/G1,其机制可能与P21蛋白表达上调和Cyclin D1及CDK4蛋白表达下调有关。
- 谢朝阳吴斌华杨志刚陈小芳陈秋生
- 关键词：原花青素白血病HL-60细胞诱导分化
- 原花青素影响Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制被引量：2
- 2009年
- 目的探讨原花青素（Proanthocyanidins，PAC）对β-淀粉样肽（25—35）[β amyloid peptide-（25—35），Aβ25-35]诱导体外血清饥饿培养的PCI2细胞周期异常与凋亡保护作用的可能机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用血清饥饿培养使细胞同步于岛期，30mg／L的PAC预处理血清饥饿培养的PC12细胞，加入终浓度为25μmol／L Aβ25-35处理0～20h，通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测细胞周期蛋白依赖性激酶4（Cyclin—dependent kinase-4，CDK4）、磷酸化的视网膜纤维母细胞瘤蛋白（phosphorylated Retinoblastoma protein，pRb）、腺病毒E2启动子结合因子1（Adenovirus E2 factor-1，E2 F1）、B细胞淋巴瘤／白血病关联X蛋白（B-cell lymphoma／leukemia-2 Associated X protein，bax）基因表达的变化。结果与Aβ25—35诱导组比较，CDK4、E2F1、bax mRNA表达和CDK4、pR6、Bax蛋白表达降低。结论PAC可能通过下调CDK4、pRb、E2F1的表达，从而降低bax的活化，对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期异常与凋亡起保护作用的。
- 谢朝阳祝其锋吴斌华陈小芳
- 关键词：原花青素PC12细胞基因表达
- 姜黄素影响Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制被引量：9
- 2009年
- 目的探讨姜黄素(curcum in,Cur)对β-淀粉样肽(25-35)[β-amyloidpeptide-(25-35),Aβ25-35]诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期异常与凋亡保护作用的可能机制。方法5μmol.L-1Cur预处理同步于G0期的PC12细胞,加入终浓度为25μmol.L-1Aβ25-35处理0～20h,用RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21、CDK4、E2F1、bax的表达。结果与Aβ25-35诱导组比较,Cur保护组p21mRNA和p21蛋白的表达增加;CDK4、E2F1、baxmRNA和CDK4、Bax蛋白的表达降低。结论Cur可能通过上调p21的表达,下调CDK4、E2F1、bax的表达,对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期异常与凋亡起保护作用。
- 谢朝阳祝其锋吴斌华
- 关键词：姜黄素CDK4E2F1
- Aβ_(25-35)对PC12细胞周期及P21、CDK4、E2F1、BAX基因表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的观察β-淀粉样肽25-35（Aβ25-35）对体外血清饥饿培养PC12细胞周期及P21、CDK4、E2F1和BAX基因表达的影响。方法用终浓度为25μmol／L Aβ25-35诱导PC12细胞，流式细胞仪分析细胞周期的改变与凋亡的关系；RT—PCR和Western blot检测P21、CDK4、眨朋和BAX基因mRNA和蛋白表达。结果PC12细胞血清饥饿培养24h约90％停滞于G0／G1期；25μmol／L Aβ25-35诱导PC12细胞8、16和24h与对照组比较，S期细胞百分率增加（P〈0．01），16h后细胞凋亡率增加（P〈0．01），可见亚二倍体凋亡峰（Ap峰）；25μmol／LAβ25-35诱导PC12细胞0—20h，P21mRNA和1921蛋白的表达下降；CDK4、E2F1、BAXmRNA和CDK4、BAX蛋白表达增高。结论Aβ25-35可诱导同步化于G0／G1的PC12细胞重新进入细胞周期并随之出现凋亡，其机制可能与下调P21mRNA和P21蛋白的表达，增加CDK4、盟肼、BAXmRNA和CDK4、BAX蛋白的表达有关。
- 谢朝阳祝其锋吴斌华
- 关键词：PC12细胞基因表达
- β-淀粉样肽(25-35)对PC12细胞Cyclin D1、CDK4、pRb、E2F1基因表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察β-淀粉样肽(25-35)〔β-amyloidpeptide(25-35),Aβ25-35〕对体外血清饥饿培养PC12细胞的CyclinD1、CDK4、pRb、E2F1基因表达的影响。方法用终浓度为25μmol/LAβ25-35处理PC12细胞,流式细胞仪检测分析细胞周期的改变,通过RT-PCR检测CyclinD1、CDK4、E2F1基因mRNA表达变化,Western印迹检测CyclinD1、CDK4、pRb蛋白表达的变化。结果流式细胞仪分析表明血清饥饿培养24h可使约90%PC12细胞停滞于G0/G1期,25μmol/LAβ25-35诱导组8、16、24h与对照组比较,S期百分率明显增加(P<0.01),16h后细胞凋亡率明显增加(P<0.01),可见明显的亚二倍体峰(Ap峰);Aβ25-35浓度诱导血清饥饿培养的PC12细胞0～20h,CyclinD1、CDK4、pRb、E2F1mRNA和蛋白表达增高。结论Aβ25-35诱导同步化于G0/G1的PC12细胞重新进入细胞周期,并阻滞于S期,同时出现凋亡,可能与增加CyclinD1、CDK4、pRb、E2F1mRNA和蛋白的表达有关。
- 谢朝阳祝其锋丁航
- 关键词：PC12细胞CDK4PRB基因表达
- 原花青素对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期紊乱的保护作用被引量：3
- 2009年
- 目的观察原花青素(PAC)对β-淀粉样肽(25-35)(Aβ25-35)诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期紊乱与凋亡的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用血清饥饿培养使PC12细胞同步于G0期,PAC预处理后加入Aβ25-35,通过流式细胞仪分析细胞周期与凋亡,RT-PCR和Western印迹从mRNA及蛋白水平检测p21、Cyclin D1、pRb和E2F1基因表达的变化。结果与Aβ25-35诱导组比较,PAC保护组S期细胞百分率明显减少,凋亡率明显降低(P<0.05);p21 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05),Cyclin D1、E2F1 mRNA和Cyclin D1、pRb蛋白表达降低(P<0.05)。结论PAC对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期紊乱与凋亡起保护作用,其机制可能与上调p21表达,下调Cyclin D1、pRb、E2F1表达有关。
- 谢朝阳梅寒芳祝其锋吴斌华陈小芳
- 关键词：原花青素AΒ25-35PCI2细胞细胞周期
