上海市科学技术委员会资助项目(10JC1408902)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 相关作者：盛净陆平袁丽粉王玉强蔡文玮更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院上海交通大学上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 交联聚乙烯亚胺衍生物的构建及其转染COS-7细胞的研究被引量：3
- 2012年
- 目的:优化构建交联聚乙烯亚胺(Polyethylenemine,PEI)衍生物PEI-Bu,研究其对非洲绿猴肾成纤维细胞系(COS-7)的转染活性和细胞毒性。方法:以PEI 800Da为骨架,1,4-丁二醇二氯甲酸酯为连接剂制备聚合物PEI-Bu,琼脂糖凝胶电泳考察其复合质粒DNA的能力,MTT法检测PEI-Bu对COS-7的毒性,以荧光素酶质粒作为报告基因,测定PEI-Bu/DNA复合物在COS-7细胞的转染活性。结果:凝胶电泳表明PEI-Bu/DNA在质量比大于1时即具有复合DNA的能力,PEI-Bu的细胞毒性随浓度增大而增大,在同一浓度下PEI-Bu的细胞毒性小于PEI 25kDa,(P<0.05),PEI-Bu/DNA在质量比为5时达到最高转染活性,高于PEI 25kDa(P<0.01),并与Lipofectamine2000相当(P>0.05)。结论:PEI-Bu在COS-7细胞中是一种低细胞毒性、高转染活性的非病毒基因载体(与商业化的PEI 25kDa比较),其在基因治疗领域中具有潜在的应用前景。
- 王玉强臧怡蔡文玮陈谊金拓苏靖盛净
- 关键词：聚乙烯亚胺非病毒基因载体转染效率
- 高血压合并动脉粥样硬化大鼠模型的建立被引量：8
- 2011年
- 目的:建立一种简便、稳定、重复性好的高血压动脉粥样硬化病变大鼠模型。方法:健康雄性16周龄自发性高血压大鼠(SHR)24只,经标准饲料适应性喂养2周后随机均分为模型组和对照组。模型组:VitD370万IU灌胃3d,继续高脂饲料喂养6周;对照组:等量生理盐水灌胃3d,继续标准饲料喂养6周。实验前后测定尾动脉收缩压、血脂和血钙水平,同时光镜和电镜下观察血管组织形态学改变。结果:两组血压变化无统计学差异。模型组大鼠血脂、血钙水平显著升高,光镜和电镜下血管壁均可见泡沫样细胞和钙盐沉积等动脉硬化病变。对照组未见变化。结论:以大剂量VitD3灌胃,结合高脂饲料喂养SHR是一种简单快速的高血压合并动脉粥样硬化大鼠模型的建立方法。
- 袁丽粉杜勤陆平盛净蔡文玮
- 关键词：高血压动脉粥样硬化自发性高血压大鼠动物模型
- 肝细胞靶向性Gal-Bu对大鼠肝细胞的转染效率检测
- 2013年
- 目的检测肝细胞靶向性半乳糖基化聚乙烯亚胺衍生物Gal-Bu对大鼠肝细胞(BRL-3A)的转染效率。方法对PEI-Bu化学修饰以半乳糖基团制备Gal-Bu,琼脂糖凝胶电泳检测其复合质粒DNA的能力;MTT法检测Gal-Bu对BRL-3A的细胞毒性;以荧光素酶质粒作为报告基因,测定Gal-Bu在BRL-3A细胞的转染效率;半乳糖竞争抑制实验观察Gal-Bu对肝细胞的靶向性。结果琼脂糖凝胶电泳表明在质量比>15时,Gal-Bu具有复合DNA的能力。在5～100μg/mL浓度范围内,Gal-Bu和PEI 25 000的细胞毒性随浓度升高而增大;在同一浓度下,Gal-Bu的细胞毒性小于PEI 25 000(P<0.01)。Gal-Bu/DNA在质量比为50时达到最高转染活性,其数值为PEI 25 000的5.6倍(P<0.01),且接近Lipofectamine 2000。半乳糖竞争抑制实验表明,100 mmol/L的半乳糖可显著降低Gal-Bu的转染效率(P<0.01),但是并不影响PEI-Bu的转染效率(P>0.05)。结论 Gal-Bu是一种低细胞毒性、高转染活性的非病毒肝细胞靶向基因载体,在肝脏疾病的基因治疗领域中具有潜在的应用前景。
- 王玉强盛净陈书艳苏靖
- 关键词：非病毒基因载体半乳糖转染效率
- 以聚乙烯亚胺为骨架的非病毒基因载体的构建及其转染大鼠肝细胞的研究被引量：1
- 2012年
- 目的 构建交联聚乙烯亚胺（Polyethylenemine,PEI）衍生物PEI-Bu,研究其对大鼠肝细胞系BRL-3A的细胞毒性和转染效率.方法 以PEI 800Da为骨架,1,4-丁二醇二氯甲酸酯为连接剂制备聚合物PEI-Bu,用凝胶渗透色谱法（GPC）测定分子量,动态光散射法（DLS）测定PEI-Bu/pDNA复合物的粒径和Zeta电位,琼脂糖凝胶电泳考察其复合质粒DNA的能力.MTT法榆测PEI-Bu对BRL-3A的细胞毒性,以荧光素酶质粒作为报告基因,测定PEI-Bu/pDNA复合物在BRL-3A细胞中的转染效率.结果 GPC 测定分子量为Mw4289Da,多分散指数1.31,复合物的粒径为138-16lnm,Zeta电位为2.4-4.3mV,凝胶电泳表明在质量比大于1时 PEI-Bu 具有复合DNA的能力,在同一浓度下PEI-Bu的细胞的毒性小于PEI 25kDa （p〈0.01）,PEI-Bu/pDNA在质量比为5时达到最高转染效率,高于PEl25kDa （p〈0.01）.并与Lipofectamine2000 相当 （P〉0.05）.结论 PEI-Bu对BRL-3A 细胞是一种低细胞毒性、高转染效率的非病毒基因载体,在肝细胞基因治疗领域中具有潜在的应用前景.
- 王玉强盛净袁丽粉吕楠段诗悦苏靖金拓陆平
- 关键词：聚乙烯亚胺非病毒基因载体细胞毒性转染效率
- 血管紧张素原与动脉粥样硬化相关性的研究进展被引量：1
- 2011年
- 动脉粥样硬化（atherosclerosis.AS）多见于中、老年人,是一种慢性进行性疾病,由其引发的冠心病、脑卒中等心脑血管疾病的发病率和死亡率均超过其他疾病[1].研究表明,肾素-血管紧张索系统（renin angiotensin system,RAS）在AS发生发展过程中起着重要的作用[2],而血管紧张素原（angiotensinogen,AGT）作为RAS系统中的初始底物,直接控制着RAS系统活性的强弱.因此,AGT可能在AS的发生发展中起着关键的调控作用.本文就AGT与AS间的相关性作一综述.
- 袁丽粉杜勤陆平
- 关键词：血管紧张素原动脉粥样硬化ANGIOTENSIN慢性进行性疾病RAS系统心脑血管疾病
- 高血压合并动脉粥样硬化与血管紧张素原相关性的研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨高血压合并动脉粥样硬化与血管紧张素原的相关性。方法:30只雄性16周龄SHR大鼠随机均分为SHR组和SHR合并AS组,另设15只同龄雄性WKY大鼠作为正常血压对照组即WKY组。SHR合并AS组饲以高脂饲料并辅以大剂量VitD3灌胃建立高血压动脉粥样硬化大鼠模型,SHR组和15只同龄雄性WKY大鼠均饲以标准饲料。各组大鼠分别于0、6、12周时光镜、电镜下评估血管病变,全自动生化分析仪检测血脂水平,并采用ELISA法检测血清AGT、AngII浓度。结果:SHR血清AGT、AngII浓度显著高于WKY大鼠(P<0.05)。存在AS病变的SHR合并AS组,血清AGT、AngII浓度明显高于无AS病变的SHR组,且随着AS病变严重性的增加,血清AGT、AngII浓度亦增加(P<0.05)。结论:抑制AGT的表达可能为高血压患者中AS的防治提供一种新的方法。
- 袁丽粉盛净陆平王玉强杜勤
- 关键词：自发性高血压大鼠高血压动脉粥样硬化血管紧张素原
- CTRP3对TGF-β_1诱导的血管外膜成纤维细胞增殖及α-SMA表达的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管外膜成纤维细胞(AFs)增殖以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的调节作用。方法采用细胞贴壁法培养SD大鼠胸主动脉AFs;CCK-8检测不同浓度CTRP3(0.1、1、10和50μg/mL)对AFs增殖的影响;免疫荧光、Real-Time PCR和Western blotting检测CTRP3对AFsα-SMA表达的影响。结果 CTRP3可呈剂量依赖性抑制TGF-β1诱导的AFs增殖,随着浓度升高,其抑制能力增强,浓度为10μg/mL时,其对AFs增殖的抑制作用最强(P<0.01);免疫荧光、Real-Time PCR和Western blotting结果显示,CTRP3可明显抑制TGF-β1诱导的α-SMA mRNA和蛋白表达(P<0.01)。结论 CTRP3可在体外抑制TGF-β1诱导AFs的增殖和α-SMA表达,提示其潜在的改善病理性血管重构作用。
- 林绍慧盛净马绍骏陆平蔡文玮胡萍
- 关键词：血管外膜成纤维细胞C1Α-平滑肌肌动蛋白增殖
