中央高校基本科研业务费专项资金(111005)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- NF-κB核定位基序促进SDF-1α质粒转染的入核效率被引量：2
- 2013年
- 目的:观察核因子κB(NF-κB)的核定位基序与目的基因质粒重组后,对目的基因转染入核效率的影响。方法:构建含NF-κB核定位基序的人基质细胞衍生因子1α质粒(phSDF-1α-NF-κB),用Cy3核酸荧光染料标记后用聚乙烯亚胺(PEI)转染人脐静脉血管内皮细胞,以不含NF-κB核定位基序的人基质细胞衍生因子1α质粒(phSDF-1α)作对照,比较二者的入核效率和表达效率,以评价NF-κB核定位基序对SDF-1α基因入核和转染的影响。结果:phSDF-1α-NF-κB转染组和phSDF-1α转染组胞核和细胞内Cy3荧光强度比分别为(72±15)%和(12±6)%,二者差异有统计学意义(P<0.01);ELISA结果显示前者SDF-1α蛋白表达量是后者4倍。结论:NF-κB核定位基序能显著促进SDF-1α质粒转染的入核效率,从而提高基因表达水平。
- 陈金玲邓倾郭瑞强周青曹省胡波宋宏宁
- 关键词：SDF基因转染
- 超声靶向微泡破坏联合核因子κB结合基序促进SDF-1α质粒转染血管内皮细胞
- 2013年
- 目的 应用超声靶向微泡破坏技术（UTMD）和核因子κB（NF-κB）结合基序分别促进人基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）质粒进入细胞质和细胞核,提高对血管内皮细胞的转染效率.方法 构建含NF-κB结合基序的人SDF-1α质粒（phSDF-1α-NF-κB）和不含NF-κB结合基序的人SDF-1α质粒（phSDF-1α）,用核酸染料Cy3标记后在优化的UTMD条件下分别转染人脐静脉血管内皮细胞.流式细胞仪检测质粒入胞效率；荧光显微镜观察质粒入核情况；RT-PCR、Western印迹和ELISA分别从基因水平和蛋白水平检测SDF-1α质粒的表达.比较两种质粒的入胞率、入核率以及表达率以评价UTMD和NF-κB结合基序对转染的作用.结果 UTMD能显著提高质粒的入胞效率（81％±7％）,同时保持较高细胞存活率（86％±6％）.含NF-κB结合基序组的质粒入核效率和蛋白表达效率均较不含NF-κB结合基序组显著提高[65％±12％比10％±3％,（63±10）比（15±5）μg/g蛋白,均P＜0.01].结论 UTMD联合NF-1κB结合基序转染系统通过提高质粒的人胞和入核效率能显著提高SDF-1α质粒对血管内皮细胞的转染效率.
- 邓倾陈金玲郭瑞强周青胡波陈鹏曹治寰
- 关键词：超声微泡SDF-1Α基因转染
