国家自然科学基金(31270085)
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
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- 相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 集胞藻PCC6803中S2P蛋白酶Slr1821参与热胁迫响应的研究被引量：2
- 2017年
- 随着全球CO2排放量不断上升,温室效应日益加剧,全球气候变暖对农作物生长甚至生态环境的破坏日渐严重,研究光合自养生物对热胁迫的响应机制有科学意义和应用前景。集胞藻PCC6803是一种研究光合作用和非生物胁迫响应等生物过程的模式蓝细菌,本文通过同源双交换完全敲除集胞藻PCC6803的S2P蛋白Slr1821的编码基因,构建了缺失突变体Δslr1821,发现经过高温44℃热处理后,突变体完全不能生长,而野生型能够快速恢复热损伤,揭示Slr1821蛋白在热胁迫适应中发挥重要的作用。通过研究藻胆蛋白相对含量和叶绿素含量的变化,发现该基因缺失抑制了细胞热处理后的光合色素包括藻胆蛋白和叶绿素的重新合成,为研究光合自养生物适应热胁迫调控机制提供了新的视角和思路。
- 陈谷李仕良刘小芳林诗琪丁清龙
- 关键词：温室效应热胁迫集胞藻PCC6803
- 复合酶漱口液消减牙菌斑的效果分析被引量：3
- 2015年
- 龋齿的发生与牙齿表面附着的牙菌斑和细菌的作用密切相关,文中旨在通过复合酶液降解葡聚糖和淀粉类物质来消除牙菌斑的存在基础,考察去除牙菌斑的效果.实验通过测定20名志愿者使用含不同浓度的复合酶漱口液、不含酶漱口液(无酶对照组)及市售精油类漱口液前后的Tureskey改良的Q-H菌斑指数的改变情况,考察β-葡聚糖酶和α-淀粉酶复合酶漱口液降解牙菌斑的效果.统计学结果显示含酶量大于0.5 mg/L时,牙菌斑降低率显著优于无酶对照组;且含酶量大于5.0 mg/L时,牙菌斑降低率优于某市售精油类漱口液.结果表明含酶漱口液对抑制牙菌斑的作用效果明显.文中研究为龋齿的日常防治提供了理论依据.
- 陈谷雷海金王宏陈聪聪向佳佳张少波
- 关键词：牙菌斑Β-葡聚糖酶Α-淀粉酶
- 集胞藻6803中S2P同源基因sll0528在多种胁迫下的表达谱分析被引量：1
- 2014年
- 为考察集胞藻6803中S2P同源蛋白sll0528的功能,应用实时荧光定量PCR技术研究sll0528基因在各种胁迫条件下不同时间点的表达谱变化。结果表明:sll0528在多种胁迫条件下被显著诱导,根据表达谱特点不同可分为以下三组(1)对高光、双氧水、山梨醇和葡萄糖混养等胁迫的响应属于早期响应,表达量诱导上调的峰值出现在0.5 h内,前三者在0.25 h分别上调约10、80和100倍,后者在0.5 h上调9倍左右;(2)对高温和低温胁迫的响应属于中期响应,前者在1 h上调30倍,后者在2 h显著上调280倍;(3)对酸和盐胁迫的响应属于后期响应,在6 h分别上调90和190倍。由此推断,sll0528可能在响应多种外界环境胁迫中起到重要作用,在不同的胁迫条件下可能参与了不同的信号转导途径从而诱导表达的峰值出现时间和数量有所不同。本研究结果为进一步探讨sll0528基因在胁迫条件下的生理功能及其作用的分子机制奠定了基础。
- 陈谷王玉玲
- 关键词：集胞藻6803胁迫响应实时荧光定量PCR
- 集胞藻PCC6803中S2P蛋白酶假定底物的体外诱导表达及纯化
- 2013年
- 金属蛋白酶S2P同源蛋白在行光合作用的蓝藻中广泛存在。S2P蛋白酶通过在膜切割转录调控因子(anti-σ因子),释放σ因子来参与胁迫响应是跨膜信号转导的保守机制。集胞藻PCC6803中S2P蛋白酶参与胁迫响应的跨膜信号转导,但其作用机理及底物均未明确。经过深入考察分析,实验锁定了4对σ因子和anti-σ因子的组合:SigE-ChlH(Slr1055)、SigI(Sll0687)-Sll0688、SigG(Slr1545)-Slr1546及SigH(Slr0856)-Sll0857。以pET-30b(+)为载体,通过重组表达纯化,成功获得一系列S2P假定底物的重组蛋白:全长anti-σ因子及截去羧基端部分序列的截短片段,包括Slr1055、Slr1055△(1～232)、Sll0688、Sll0688△(1～152)、Slr1546、Slr1546△(1～174)、Sll0857、Sll0857△(1～101)和大肠杆菌的S2P底物RseA(1～148)。为下一步在体外重构S2P蛋白酶与底物的酶切体系、阐释蓝藻体内S2P介导的级联信号转导机制奠定了基础。
- 秦春燕陈谷
- 关键词：底物
- 集胞藻PCC6803中S2P蛋白酶Sll0528参与铵盐胁迫响应的重要性被引量：1
- 2018年
- Sll0528是集胞藻PCC6803中四个二位蛋白酶(site-2-protease, S2P)之一。本研究主要比较了三株集胞藻(编码基因sll0528过表达的藻株OE0528,编码基因sll0528敲除的缺失藻株?sll0528,以及野生型藻株)在不同氯化铵浓度下的生长表型。结果显示,缺失藻株?sll0528对120 mM的氯化铵比野生型更敏感,光合系统损伤严重。在180 mM氯化铵下野生型株的生长受到抑制,而过表达藻株OE0528的生长优于野生型,更耐受高浓度铵盐,其光合系统色素藻蓝蛋白和叶绿素等的损伤程度低于野生型。可见,Sll0528在集胞藻PCC6803适应铵盐胁迫中发挥重要的作用,可能参与了铵盐胁迫的快速响应,并直接或间接介导高铵盐浓度下集胞藻对光合系统的保护或修复机制。本研究首次揭示了S2P蛋白酶微藻具有一定的铵盐胁迫响应作用,相关结果对于深入探究微藻对铵盐的响应机制及提高微藻对铵盐的耐受性和利用率具有重要的意义。
- 刘小芳陈谷林诗琪许白雪
- 关键词：集胞藻PCC6803
- 基于代谢组学分析Slr0643蛋白在调控集胞藻PCC6803葡萄糖混养适应中的重要性
- 2021年
- 本研究文采用集胞藻PCC6803野生型藻株和Slr0643敲除突变体(Δslr0643)藻株,通过生理实验和基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术的植物代谢组学分析,对Slr0643蛋白调控集胞藻PCC6803葡萄糖混养适应的机制进行探讨。在2.5 mM葡萄糖混养条件下,野生型藻株的生长速率较光自养条件明显加快,而Δslr0643藻株的生长速率较光自养条件显著下降,在添加葡萄糖其混养培养4 d后的OD730值仅为野生型藻株的47.25%,且其利用葡萄糖的速率也始终低于野生型藻株。通过对野生型藻株和Δslr0643藻株在2.5m M葡萄糖混养过程中细胞内代谢物进行鉴定,发现了显著差异代谢物各11种,其中,有9种差异代谢物在野生型藻株混养过程中含量明显上升。通过对各时间点下突变体相对于野生型的差异代谢物所参与的代谢通路进行富集分析发现,差异代谢物主要富集在三羧酸循环、丙酮酸代谢、谷氨酸代谢等8个代谢途径,表明Slr0643通过参与调控这些代谢途径使集胞藻PCC6803适应葡萄糖混养。本研究发现了slr0643的缺失使细胞内多种代谢途径受损,从而使细胞无法正常利用葡萄糖,揭示了Slr0643蛋白在集胞藻葡萄糖混养适应中扮演着重要的作用。
- 许白雪陈谷刘秤利周健
- 关键词：集胞藻PCC6803
