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华南虎狮弓蛔虫三种线粒体基因的遗传进化分析被引量：6: 2015年; 为研究华南虎狮弓蛔虫(Toxascaris leonina)线粒体基因的分子特性,对来源于4只华南虎的狮弓蛔虫的pcox1、pnad1和pnad4三种线粒体基因进行了扩增、克隆和测序,采用DNAStar和MEGA5.05软件对所获序列,以及Gen Bank中公布的狮弓蛔虫等相关序列进行了同源性比对和遗传进化分析。结果显示,4只华南虎的狮弓蛔虫扩增的pcox1、pnad1、pnad4基因序列长度分别为393、366、399 bp,3段基因序列种内变异明显低于种间变异。系统进化树中,狮弓蛔虫可分为猫科和犬科动物两大分支,其中4只华南虎的狮弓蛔虫与已报道的孟加拉虎、东北虎、华南虎、非洲狮、猞猁的狮弓蛔虫聚为一支;另外狼和犬的狮弓蛔虫聚为一支;以pnad1、pnad4建立的系统发育树中,虎源狮弓蛔虫又单独聚为一支,表明狮弓蛔虫在不同虎类之间并没有严格的宿主特异性。该研究为狮弓蛔虫的分子鉴定和分子遗传学研究提供了科学依据。; 宋美冉李康信石先利胡伟谭立娉罗琴林丽琴路鹏云陈武李国清; 关键词：狮弓蛔虫华南虎线粒体基因遗传进化

犬猫钩虫和贾第虫多重PCR检测方法的建立: 基于传统检测技术无法对犬猫钩虫和贾第虫进行准确检测，本试验建立了锡兰钩虫、犬钩虫和蓝氏贾第虫(A型)的多重PCR检测方法.根据GenBank上锡兰钩虫和犬钩虫的核糖体ITS序列及蓝氏贾第虫(A型)的TPI基因序列，按照多...; 胡伟武省余新刚谭立娉宋美冉王祯江飚李国清; 关键词：蓝氏贾第虫

A型蓝氏贾第虫贾第素α-13的原核表达及纯化分析: 为探讨蓝氏贾第虫贾第素α-13的致病作用,采用PCR扩增该基因片段,将扩增产物克隆入pMD18-T载体,经BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切后连入原核表达载体PET-28a(+),将阳性重组表达质粒转化BL21(DE3)感受...; 余新刚胡伟谭立娉宋美冉武省潘伟达石先利徐畅李康信李国清; 关键词：蓝氏贾第虫原核表达纯化

人兽共患锡兰钩虫的研究进展: 2014年; 锡兰钩虫是线形动物门、尾感器纲、圆线目、钩口科、钩口属的一种寄生虫,在亚洲地区广泛流行,可感染犬、猫等多种哺乳动物和人.该虫曾被认为是可忽略的寄生虫;后来的研究表明,锡兰钩虫可引起人体严重的症状,包括“钩虫痒”、腹部不适和贫血等.近年来亚洲地区的分子流行病学调查表明,人体的锡兰钩虫感染与犬、猫的锡兰钩虫感染呈正相关.犬、猫作为锡兰钩虫的自然宿主,可以对人类生活环境造成污染,因此在该病的防控措施中需要对接触犬、猫的人群进行重点保护.; 胡伟郑国超李国清; 关键词：人兽共患

A型贾第虫贾第素α-18基因的原核表达与蛋白纯化: 为了对蓝氏贾第虫贾第素α-18(alpha-18 giardin,AG-18)基因进行原核表达及融合蛋白的纯化,以便进一步对其亚细胞定位和致病机制进行研究.根据GenBank上AG-18基因序列,设计特异性引物,以A型贾...; 武省胡伟谭立娉余新刚宋美冉潘伟达徐畅石先利李康信李国清; 关键词：蓝氏贾第虫原核表达纯化

犬源贾第虫HRM快速基因分型方法的建立: 为评估犬源贾第虫对人类的威胁,选取β-贾第素(β-giardin)基因作为遗传标志,建立了犬源贾第虫常见的A型、C型和D型HRM基因分型方法。结果显示,设计的qPCR-HRM引物BG5和BG7,能明显区分三种基因型,在对...; 谭立娉郑国超胡伟余新刚武省宋美冉林丽琴路鹏云王祯江飚李国清; 关键词：蓝氏贾第虫基因分型 HRM

猫源锡兰钩虫线粒体cox1部分基因的扩增与分析: 引言锡兰钩虫(Ancylostoma ceylanicum)是一种人兽共患的寄生虫,可引起宿主的'钩虫痒'、消化不良、腹部不适和贫血等症状。据估计,亚洲地区约有1900~7300万名患者。犬、猫作为锡兰钩虫的自然宿主,对...; 胡伟谭立娉余新刚武省宋美冉王祯江飚李国清

猫钩虫PCR检测方法的建立及初步应用: 2014年; 为建立一种特异、敏感的检测猫钩虫的方法,根据钩虫内转录间隔区(ITS)部分序列的保守引物AF和AR,建立PCR检测方法,对反应条件进行优化,并进行特异性和敏感性试验;采用该方法对112份流浪猫粪便进行临床检测。结果显示,建立的PCR方法能特异性扩增猫钩虫相应的基因片段,其长度为404bp,与猫弓首蛔虫、犬复孔绦虫、狐毛尾线虫的虫卵的基因组DNA以及蓝氏贾第虫包囊、猫等孢球虫卵囊基因组DNA无交叉反应;最低能检测到1.07fg的钩虫基因组DNA。通过临床样品检测,该方法比碘液染色镜检的检出率提高了9%,其敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均为100%。结果表明,该PCR方法具有敏感、特异的特点,适用于钩虫的临床检测和钩虫病的分子流行病学调查。; 胡伟刘远佳郑国超谭立娉罗琴李国清; 关键词：钩虫 PCR

猫源蓝氏贾第虫HRM快速基因分型方法的建立被引量：1: 2015年; 为建立一种蓝氏贾第虫的快速基因分型方法,选取β-贾第素(β-giardin)基因作为遗传标志,采用HRM技术对华南地区常见的猫源蓝氏贾第虫A型、F型进行基因分型。根据GenBank中登录的序列KJ027416.1(A型)和JX 275388(F型)设计了qPCR-HRM引物BGF和BGR,通过对反应温度和反应体系进行优化,建立了HRM基因分型方法,并对其稳定性、敏感性和准确性进行了检测。结果显示,HRM分型方法可对蓝氏贾第虫A型、F型以及混合感染情况进行检测;批内和批间重复性均良好;当样品质量浓度低至4.27×10-4 ng/μL时,HRM检测方法依然可以分辨出基因型;其准确性与测序结果完全一致。结果表明,建立的HRM基因分型方法具有快速、稳定、敏感和准确的特点,适用于猫源蓝氏贾第虫的临床检测和贾第虫病的分子流行病学调查。; 谭立娉郑国超李雅文胡伟罗琴林丽琴路鹏云余新刚武省宋美冉王祯江飚李国清; 关键词：蓝氏贾第虫 HRM 基因分型

犬源贾第虫PCR-RFLP基因分型方法的建立: 为建立犬源贾第虫人畜共患基因型(A,B型)和特异性基因型(C,D)的PCR-RFLP基因分型方法,采用引物B3、B4对β-贾第素基因进行PCR扩增,选用AfaⅠ和MspⅠ内切酶对PCR产物进行酶切分析,建立PCR-RFL...; 谭立娉郑国超胡伟余新刚武省宋美冉林丽琴路鹏云王祯江飚李国清; 关键词：蓝氏贾第虫基因分型 PCR-RFLP

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