国家自然科学基金(31270096)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李明春邢来君于爱群石桐磊张飙更多>>
- 相关机构：南开大学天津中医药大学天津科技大学更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 巴斯德毕赤酵母UBX结构域相关蛋白的功能研究
- 作为真核模式生物,巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)具有产油量高的特点,同时也是外源蛋白表达的优良载体。因此,对其胞内脂质及蛋白质合成的研究显得尤为重要。内质网是脂质和蛋白质合成的重要场所,在酿酒酵母中,具...
- 张萌刘哲李明春
- 关键词：脂肪酸脂滴ERAD
- 文献传递
- 巴斯德毕赤酵母脂肪酸脱氢酶基因对压力应答的影响
- 不饱和脂肪酸是维持细胞膜流动性和细胞重要生理功能的关键分子,而脂肪酸脱氢酶的缺失,会引起胞内不饱和脂肪酸构成的改变。巴斯德毕赤酵母具有四种脂肪酸脱氢酶基因(FAD9A,FAD9B,FAD12,FAD15),能够合成三种不...
- 张萌毛吉魏喻其林刘哲邢来君李明春
- 关键词：巴斯德毕赤酵母脂肪酸脱氢酶
- 巴斯德毕赤酵母脂质稳态在细胞壁完整性、细胞膜稳定性维持和非折叠蛋白应答过程中的作用
- 维持细胞中正常的脂质组成对于许多细胞过程是至关重要的。前期研究已经证实Spt23是胞内重要的转录因子,调控脂肪酸脱氢酶基因的表达,当SPT23缺失后,会导致胞内脂肪酸不饱和度降低。在本研究中,我们发现SPT23的缺失导致...
- 张萌刘哲梁晨喻其林邢来君李明春
- 关键词：UPRPICHIAPASTORIS
- 文献传递
- 低温和外源不饱和脂肪酸对高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因表达的影响被引量：4
- 2012年
- 【目的】在转录水平上研究低温和外源不饱和脂肪酸对于高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因的表达调控机制。【方法】通过实时定量PCR技术和启动子报告基因融合载体的方法,研究低温和外源不饱和脂肪酸对于高山被孢霉3种脂肪酸脱氢酶基因表达随时间进程的影响。【结果】实时定量PCR的结果表明:低温对于3种脂肪酸脱氢酶基因的转录具有激活作用,外源不饱和脂肪酸对基因转录起抑制作用,而且这两种作用都是快速响应的,随时间延长逐渐减弱并消失。脂肪酸组成测定结果证明了基因转录水平变化与对应产物变化之间没有相关性。低温能够在短时间内诱导pFAD6启动子活性增加,并随时间延长而持续增强;外源不饱和脂肪酸对pFAD6启动子活性起抑制作用,其不饱和度和浓度越高,抑制作用越强,而且抑制作用是快速且持续的。【结论】低温和外源不饱和脂肪酸除了在转录水平上调控高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因表达发生变化之外,可能主要在转录后水平上介导了胞内脂肪酸组成的变化。而且,脂肪酸脱氢酶基因的表达可能受到胞内脂肪酸组成变化的反馈调节作用。本文首次在转录水平上对高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因的表达调控机制进行了探索,为深入了解脂肪酸脱氢酶基因表达及多不饱和脂肪酸合成对外界信号的应答机制提供了有用信息,也对应用微生物发酵和转基因技术生产不饱和脂肪酸具有指导意义。
- 于爱群石桐磊张飙邢来君李明春
- 关键词：不饱和脂肪酸脂肪酸脱氢酶实时定量PCR启动子
- 巴斯德毕赤酵母脂肪酸脱氢酶基因对压力应答的影响
- 不饱和脂肪酸是维持细胞膜流动性和细胞重要生理功能的关键分子,而脂肪酸脱氢酶的缺失,会引起胞内不饱和脂肪酸构成的改变。巴斯德毕赤酵母具有四种脂肪酸脱氢酶基因(FAD9A,FAD9B,FAD12,FAD15),能够合成三种不...
- 张萌毛吉魏喻其林刘哲邢来君李明春
- 关键词：巴斯德毕赤酵母脂肪酸脱氢酶
- 文献传递
- 高山被孢霉Δ~6-脂肪酸延长酶基因在巴斯德毕赤酵母中的表达
- 2013年
- 长链多不饱和脂肪酸花生四烯酸(ARA,C20:4n-6)是合成生物活性物质类二十碳烷酸的初级底物神经组织的重要组成成分.Δ6-脂肪酸延长酶是花生四烯酸Δ6-合成途径的关键酶之一.根据已经报道的Δ6-脂酸延长酶基因序列设计引物,分别从产花生四烯酸的丝状真菌高山被孢霉ATCC16266菌株基因组和cDNA扩增得到该序列.经序列分析后,将来源于cDNA的序列连接到毕赤酵母表达载体pPIC3.5K上,得到重组质PIC3.5K-ELO.用电击转化法将重组载体pPIC3.5K-ELO转化到巴斯德毕赤酵母GS115中,在缺省培养基筛选得到毕赤酵母转化菌株pPIC3.5K-ELO.在适宜的培养条件下,添加外源底物γ-亚麻酸(GLA)和诱导物醇诱导基因表达.气相色谱分析表明该基因在毕赤酵母中得到了表达,底物GLA转化为二高γ-亚麻酸GLA),转化效率为28.91%.对Δ6-脂肪酸延长酶进行跨膜分析,表明该蛋白为具有7个跨膜域的膜结合蛋白.
- 兰昊欧秀元黎明于爱群石桐磊邢来君李明春
- 关键词：高山被孢霉多不饱和脂肪酸巴斯德毕赤酵母
- 巴斯德毕赤酵母Orm1蛋白在细胞生长和内质网功能维持方面的功能
- 2017年
- 【目的】鉴定巴斯德毕赤酵母ORM1基因;研究ORM1基因缺失对毕赤酵母生长、内质网压力应答、细胞钙稳态调节和活性氧水平等方面的影响。【方法】利用生物信息学软件对毕赤酵母Orm1蛋白进行序列比对和分析;利用PCR介导的同源重组法构建orm1Δ缺失菌株,将回补质粒p IB1-ORM1转入orm1Δ菌株构建回补菌株;研究ORM1基因缺失对毕赤酵母生长的影响;以Fluo-3 AM染色法测定胞质钙含量;以DCFH-DA染色法分析胞内活性氧水平;以实时荧光定量PCR技术研究ORM1基因缺失对毕赤酵母非折叠蛋白应答、钙稳态和抗氧化系统基因表达的影响;使用试剂盒分析毕赤酵母抗氧化系统过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)的含量。【结果】在毕赤酵母基因组数据库中比对出酿酒酵母Orm1和Orm2的同源蛋白,并将该蛋白编码基因命名为ORM1;毕赤酵母ORM1基因缺失导致细胞生长受到明显抑制,对衣霉素引起的内质网压力敏感性增强,非折叠蛋白应答激活,细胞钙稳态紊乱,活性氧积累,抗氧化系统激活。【结论】由于非折叠蛋白应答、钙稳态调节、活性氧积累等均与内质网功能息息相关,因此,巴斯德毕赤酵母ORM1基因编码的Orm1蛋白在细胞生长及内质网正常功能的维持过程中发挥重要作用。
- 梁晨张萌喻其林邢来君李明春
- 关键词：巴斯德毕赤酵母ORM钙稳态活性氧
