国家教育部博士点基金(20113515110011)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
- 相关作者：吴少华李永裕刘杭李亮王芳更多>>
- 相关机构：福建农林大学福建农业职业技术学院泸州市农业局更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金福建省科技计划重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 梨休眠DELLA蛋白PpGAI基因的克隆与表达分析被引量：7
- 2016年
- 赤霉素(gibberellins,GA)通过DELLA蛋白的去阻遏作用来调控植物生命循环过程。为研究DELLA蛋白在梨花芽休眠过程表达情况及功能,以不同砂梨品种‘蜜雪梨’和‘黄花梨’为试材,分别采集整个休眠时期花芽,利用转录组测序数据、梨基因组CDS数据库筛选梨DELLA蛋白编码基因Pp GAI。分离并克隆得到两条Pp GAI基因,其开放阅读框(ORF)分别为1 743 bp和1 905 bp,命名为Pp GAI-1和Pp GAI-2,Gen Bank登录号为KU311002和KU311003,编码580和634个氨基酸,预测其均为亲水性蛋白,其蛋白分子量为62.98 k D和69.72 k D。进化树分析表明Pp GAI-1与苹果的亲缘关系最近,而Pp GAI-2与杜梨的亲缘关系最近。荧光定量研究显示在‘蜜雪梨’中两个Pp GAI基因均在休眠期出现一个表达低峰,在休眠解除临界期、休眠解除期和萌动期出现3个表达高峰;在‘黄花梨’中两个Pp GAI基因均在休眠解除临界期明显上调表达,并在萌动期达到最大表达峰值。本研究所获得梨两个编码DELLA蛋白Pp GAI基因对梨花芽休眠解除起到调控作用,且在不同砂梨品种间的休眠调控模式有所不同。
- 刘杭杨贺忠李亮王芳王芳李永裕
- 关键词：休眠赤霉素DELLA蛋白
- 不同低温需求量砂梨休眠相关基因PpMADS13的特征及表达模式被引量：4
- 2016年
- 为探究福建主栽的不同低温需求量砂梨Pyrus pyrifolia品种中休眠相关基因Pp MADS13-1和Pp MADS13-3序列及表达特征,以‘黄花’、‘蜜雪’两品种休眠时期的花芽为材料,克隆Pp MADS13-1和Pp MADS13-3基因,利用荧光定量PCR技术分析基因在休眠时期的表达变化情况。结果显示,Pp MADS13-1序列在砂梨两品种间较保守,而Pp MADS13-3序列在两品种间保守性较差;‘黄花’梨Pp MADS13-1hh和Pp MADS13-3hh在休眠期间随着休眠的解除下调表达,‘蜜雪’梨Pp MADS13-1mx和Pp MADS13-3mx在休眠期间呈现"M"型表达趋势。Pp MADS13-1和Pp MADS13-3均对砂梨的花芽休眠解除起到调控作用,在不同低温需求量品种间Pp MADS13-1和Pp MADS13-3的休眠调控模式有所不同。
- 李亮刘杭张桂池吴少华李永裕
- 关键词：砂梨
- PP2C相关基因在砂梨休眠进程中的表达分析
- 2018年
- 对植物蛋白磷酸酶2C(PP2C)相关基因在砂梨Pyrus pyrifolia品系休眠进程中的表达进行分析。结果表明,砂梨PP2C相关基因与李属PP2C基因高度同源。在梨花芽休眠过程中不同PP2C基因调控的作用不同,PP2C-37-1、PP2C-37-2、PP2C-51-1、PP2C-24四个基因与内休眠调控有关,而PP2C-78对于内休眠的解除则有明显作用。PP2C蛋白磷酸酶相关基因注释到植物激素信号转导途径显示,ABA受体PYR/PYL蛋白与PP2C蛋白以及Sn RK2(蛋白激酶)蛋白形成ABA信号转导的复合物可以作用于转录因子ABF从而调控梨花芽的休眠。
- 王会全李亮余志雄袁亚芳吴少华
- 关键词：砂梨PP2C休眠
- 内源激素对砂梨花芽休眠进程的调控作用被引量：2
- 2022年
- 【目的】分析砂梨花芽休眠进程中内源激素的含量及平衡关系对梨花芽休眠进程的调控作用,为研究南方短低温梨花芽休眠解除的调控机理奠定基础。【方法】以黄花梨和蜜雪梨2个砂梨品种花芽为试材,利用HPLC技术分析赤霉素(GA_(3))、脱落酸(ABA)、3-吲哚乙酸(IAA)、玉米素(ZT)等4种内源激素含量以及GA_(3)/ABA、IAA/ABA、ZT/ABA、(IAA+GA_(3))/ABA比值在2个砂梨品种花芽休眠进程中的变化。【结果】在砂梨花芽休眠进程中,GA_(3)和ABA的影响主要在内休眠解除启动期,并且GA_(3)促进了花芽内休眠解除启动,而ABA抑制了花芽休眠解除启动;IAA在休眠进程中的变化规律不明显,对于休眠解除的影响不显著;ZT在黄花梨中促进了内休眠的解除,而在蜜雪梨中则作用于内休眠解除的启动。GA_(3)/ABA和(IAA+GA_(3))/ABA在砂梨花芽休眠进程中变化趋势基本相同,均表现出在内休眠阶段比值较小,并且变化趋势不明显,而内休眠解除启动时明显升高,并且在内休眠解除时稍低于内休眠解除启动期;IAA/ABA其对休眠进程的影响较小;ZT/ABA的比值在黄花梨花芽休眠解除启动期稍低于内休眠解除期,而在蜜雪梨中花芽休眠解除启动期会稍高于内休眠解除期。【结论】砂梨花芽休眠进程中GA_(3)和ABA两种内源激素起主要作用,ZT不能直接影响休眠进程,而且内源激素调控花芽的休眠进程更主要取决于各内源激素的平衡。不同品种之间内源激素变化不完全一致,但总的趋势相似,本研究为内源激素调控休眠的研究奠定了基础。
- 王会全李亮李永裕吴少华
- 关键词：砂梨内源激素休眠
- 沙梨PpGAI3基因的分离与原核表达分析被引量：4
- 2017年
- 【目的】分离沙梨DELLA蛋白编码基因PpGAI3,探究其蛋白在花芽休眠中的表达情况。【方法】从不同需冷量沙梨品种‘蜜雪梨’和‘黄花梨’中分离PpGAI3基因,重组到p EASY-Blunt E1表达载体中,转化BL21(DE3)宿主菌后经IPTG诱导表达,并对表达菌株进行SDS-PAGE和Western blotting检测。【结果】获得2种沙梨的PpGAI3基因,分别命名为PpGAI3mx和PpGAI3hh,Gen Bank登录号为KU954535和KX078215,其开放阅读框(ORF)为1 641 bp,编码546个氨基酸,预测其为亲水性不稳定蛋白。进化树分析表明PpGAI3mx和PpGAI3hh与白梨的亲缘关系最近;成功构建了p EASY-Blunt E1-PpGAI3原核表达载体,得到蛋白分子质量约60 ku的诱导表达产物。【结论】所得沙梨DELLA蛋白编码基因PpGAI3为植物DELLA蛋白家族中的成员,在梨花芽休眠过程中具有特异表达,且表达产物大部分以不溶性包涵体形式存在。
- 刘杭王芳李亮王文婷杨贺忠马鑫瑞吴少华李永裕
- 关键词：沙梨休眠DELLA蛋白原核表达
- 黄花梨bZIP的cDNA克隆与表达分析被引量：2
- 2014年
- 为探讨黄花梨(Pyrus pyrifolia‘Huanghua’)PpbZIP基因的功能,根据同源基因bZIP从黄花梨花芽中克隆到PpbZIP基因(GenBank登录号:KC951877)。PpbZIP基因的全长cDNA为1843 bp,其中开放阅读框长度1227 bp,编码408个氨基酸,与同为蔷薇科的苹果bZIP蛋白序列的同源性高达92%。PpbZIP基因的QRT-PCR分析表明,PpbZIP基因在黄花梨花芽从休眠到休眠解除后的表达量呈先升高后降低的趋势。这表明PpbZIP参与了黄花梨花芽休眠过程的调控。
- 宋燕春李永裕黄添毅陈铁娇吴少华
- 关键词：黄花梨BZIP克隆
- 早熟砂梨ISSR-PCR反应体系的建立与优化
- 2013年
- 以我国南方主栽的早熟砂梨品种‘翠冠’Pyrus pyrifolia‘Cuiguan’为材料,对ISSR技术体系中的模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、退火温度、PCR循环数等7个主要因素进行优化和筛选,建立了适合早熟砂梨的ISSR-PCR反应体系。最终反应体系为20μL体系中10×PCR buffer(不含Mg2+)2μL,模板DNA浓度60 ng,TaqDNA聚合酶0.75 U,引物浓度1μmol/L,dNTP浓度90μmol/L,Mg2+浓度2.25 mmol/L。扩增程序为:预变性94℃5 min,变性94℃45 s,退火45 s,72℃延伸1 min,共42个循环,然后72℃再延伸10 min,4℃保存,用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测多态性。
- 宋燕春李永裕陈建烟黄添毅龚理吴少华
- 关键词：早熟砂梨ISSR
