福建省卫生厅青年科研基金(2001-1-11)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：夏清建朱绍兴更多>>
- 相关机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 自体肌卫星细胞尿道内移植实验
- 2007年
- 目的:观察骨骼肌卫星细胞注射到尿道内存活的情况,探讨肌卫星细胞自体移植治疗压力性尿失禁的潜在可行性。方法:实验于2004-09/2005-09在福建医科大学附属协和医院内分泌学研究所和动物实验室完成。实验动物:清洁级3周龄雌性SD大鼠10只。实验分组:将大鼠分为实验组和对照组,每组5只。实验干预:①分别取其双下肢腓肠肌,采用1g/L胶原酶-2.4U/mLDispase和2.5g/L胰蛋白酶两步法消化分离、纯化细胞并培养。采用0.01%的活体荧光染料荧光金对骨骼肌卫星细胞进行标记。②将荧光金标记的骨骼肌卫星细胞自体注射于实验组大鼠近端尿道3点和9点处的黏膜下及肌层,对照组大鼠于相同位置注射等体积的DMEM/F12无血清培养液。实验评估:①荧光显微镜下观察荧光金的标记效果,计算标记后细胞的死亡率。②三四天后麻醉下处死大鼠,取出后尿道组织进行冰冻切片,荧光显微镜下观察是否有标记的细胞,并进行Desmin免疫组织化学染色观察。结果:10只大鼠均进入结果分析。①培养细胞的鉴定,荧光标记的效果:成功分离、培养出原代细胞,免疫细胞化学染色示90%左右的细胞特异性结蛋白染色阳性,证实所培养出的细胞为骨骼肌卫星细胞;0.01%的荧光金对细胞的标记效果好,细胞的存活率与未标记组无明显差异,适合用于骨骼肌卫星细胞自体移植标记。②后尿道组织冰冻切片观察:实验组切片于荧光显微镜下可见到有荧光标记的细胞,免疫组织化学染色有Desmin阳性的细胞;而对照组切片未见到荧光标记的细胞,免疫组织化学染色为阴性。结论:骨骼肌卫星细胞注射到尿道内后仍有存活,有可能成为压力性尿失禁注射疗法的一种新型注射材料。
- 夏清建朱绍兴
- 关键词：注射
