国家教育部博士点基金(20091417120003)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：张红梅牛侨李新张华俊常利军更多>>
- 相关机构：山西医科大学卫生学教研室太钢疾病预防控制中心更多>>
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- 砷染毒对神经细胞凋亡及Calpain 1,calpain 2和cdk5/p25基因和蛋白表达的影响
- 目的研究As2O3对神经细胞凋亡、calpain 1和calpain 2以及cdk5/p25基因和蛋白表达的影响,为探讨As2O3神经毒性机制提供一定的科学依据。方法原代培养的大鼠神经元,分为未处理对照组、DMSO溶剂对...
- 李新常利军张华俊张红梅牛侨
- 关键词：三氧化二砷细胞凋亡
- 文献传递
- 砷染毒对神经细胞凋亡及calpain 1，calpain 2和cdk5／p25基因和蛋白表达的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨砷对神经细胞凋亡、calpain1和calpain2以及cdk5／p25基因和蛋白表达的影响，为As2O3神经毒性机制研究提供科学依据。方法原代培养的大鼠神经元，分为未处理对照组、DMSO溶剂对照组，1、5、10Ixmol／LAsA组，分别用0、1、5、10μmol／LAs2O3，溶液染毒，未处理对照组只加人培养液。染毒8h后，用流式细胞术检测神经细胞凋亡率，实时荧光定量PCR法检测calpain1、ca｜pain2、cdk5、p35基因的表达，用蛋白免疫印迹法（Westernbot）检测calpainl、calpain2、cdk5和p35以及p25的蛋白表达水平。结果与未处理对照组和溶剂对照组比较，5和10μmol／LAs2O3染毒组细胞凋亡率明显增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。1、5和10μmol／LAs2O3染毒组calpain1基因表达量分别为（6．36±3．26），（7．11±5．13）和（7．47±2．59），cdk5基因表达量分别为（1．27±0．19）、（1．54±0．04）和（1．79±0．21），明显高于未处理对照组[（0．72±0．15）、（1．77±0．87）]和溶剂对照组（0．96±1．23）、（1．18±0．09）]，差异有统计学意义（P〈O．05）；1和5μmol／LAs2O3染毒组p35的基因表达量[（2．17±0．59）、（2．51±0．51）]、明显高于未处理对照组（1．26±0．37），差异有统计学意义（P〈0．05）；1、5和10Ixmol／LAs20，染毒组calpain1蛋白表达量分别为（0．37±0．10）、（0．42±0．13）和（0．51±0．18），明显高于未处理对照组（0．11±0．08）和溶剂对照组（0．13±0．07），差异均有统计学意义（P〈0．05）。5和10μmol／LAs2O3染毒组cdk5蛋白表达量分别为（0．34±0．12）和（O．37±0．21），p25蛋白表达量分别为（0．31±0．23）和（0．55±0．16），明显高于未处理对照组和溶剂对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；5和10μmol／LAs2O3，染毒组p35的蛋白表达量分别为（0.31±0．23）和（0．26±0．16），明显�
- 李新常利军张华俊张红梅牛侨
- 关键词：砷
- 细胞色素P450 2E1在尼古丁致神经细胞氧化损伤中的作用
- 2014年
- 目的本文拟采用体外实验,探讨脑细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP 2E1)在尼古丁致神经细胞氧化损伤中的可能作用。方法实验选用IMR-32人神经母细胞瘤细胞系,设置对照组,尼古丁小剂量组(0.1 n M)、中剂量组(1 n M)和大剂量组(10 n M),并选用中剂量尼古丁加入不同剂量CYP2E1特异性抑制剂二丙烯基硫醚(diallyl sulfide,DAS)(0.025、0.05、0.075 n M)。尼古丁或尼古丁与二丙烯基硫醚处理细胞48 h。取处理后细胞,分别检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、CYP2E1mRNA和蛋白水平的变化,并对CYP2E1蛋白表达水平与LDH活力、SOD活力、ROS含量进行相关性分析。结果与对照组相比,经低、中、高剂量尼古丁处理后,IMR-32细胞增殖受抑制,抑制率分别为39%、47%、52%(均P<0.05);细胞受到损伤,培养基LDH活力分别升高14%、50%、70%(均P<0.05);SOD活力下降至对照组的76%、58%、44%(均P<0.05);细胞CYP2E1蛋白表达水平显著升高至2.19、2.65及2.76倍(均P<0.05),未见CYP2E1 mRNA水平改变;ROS生成量升高48%、65%、136%(均P<0.05)。与尼古丁(1 nm)组相比,加入低、中、高剂量抑制剂后,SOD活力升高24%、47%、52%(均P<0.05);ROS含量下降至77.8%、57.8%、44.3%(均P<0.05)。相关性分析显示,CYP2E1含量与LDH活力呈正相关,与SOD活力呈负相关,相关系数分别为0.740和-0.584,与ROS含量呈正相关,相关系数为0.695(均P<0.01)。结论尼古丁处理可抑制IMR-32细胞增殖,诱导脑CYP2E1表达,明显诱导ROS生成,致神经细胞损伤。
- 党帅张红梅
- 关键词：尼古丁细胞色素P450自由基神经细胞
- cdk5、p35和p53基因在砷诱导的神经细胞凋亡中的改变被引量：2
- 2012年
- 目的 研究cdk5、p35和p53基因表达量在As2O3诱导的神经细胞凋亡中的改变,为探讨As2O3神经毒性的机制提供基础资料.方法 将原代培养的大鼠神经元分为未处理对照组,DMSO溶剂对照组,1、5、10 μmol/L As2O3染毒组,分别用1、5、10 μmol/L As2O3溶液染毒,未处理对照组只加入培养液.染毒8h后,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测神经细胞活力,用流式细胞仪检测神经细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测cdk5、p35、p53基因的表达.结果 1、5、10 μmol/L As2O3染毒组神经细胞活力抑制率分别为16.77％、19.72％、27.81％.与未处理对照组和溶剂对照组相比,5和10μmol/L As2O3染毒组细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）.各染毒组cdk5、p35、p53基因的表达量随着染毒剂量的增加而升高,各组间p35基因表达量的差异无统计学意义（P＞0.05）；cdk5和p53基因表达量的组间差异有统计学意义（P＜0.05）,5和10 μmol/L As2O3染毒组cdk5基因表达量明显高于未处理对照组和溶剂对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）；1、5和10 μmol/L As2O3染毒组p53表达量明显高于未处理对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）；其中10 μmol/L As2O3染毒组p53基因表达量明显高于DMSO溶剂对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 cdk5、p35和p53可能参与了As2O3诱导的神经细胞凋亡过程.
- 李新张红梅牛侨原福胜
- 关键词：砷
