广东省科技攻关计划(2005B33701004)
- 作品数：8 被引量：27H指数：4
- 相关作者：郑学礼陈晓光胡佳林王春梅王炜更多>>
- 相关机构：南方医科大学中国科学院上海生命科学研究院吉林大学更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统高效表达家蝇天蚕素的研究
- 目的应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统中高效表达家蝇天蚕素,研究伴侣分子对家蝇天蚕素基因在大肠杆菌中表达的影响。方法 RT-PCR克隆家蝇的天蚕素成熟肽(Mature Cecropin,MC)与泛素(Ubiquitin)基因...
- 王炜郑学礼
- 关键词：家蝇CECROPIN
- 文献传递
- 应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统高效表达家蝇天蚕素的研究
- 目的应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统中高效表达家蝇天蚕素,研究伴侣分子对家蝇天蚕素基因在大肠杆菌中表达的影响。方法 RT-PCR克隆家蝇的天蚕素成熟肽(MatureCecropin,MC)与泛素(Ubiquitin)基因,...
- 王炜郑学礼
- 关键词：家蝇CECROPIN
- 文献传递
- 光活化杀虫剂的研究与应用被引量：2
- 2007年
- 光活化杀虫剂作为一种廉价、高效、安全的新型杀虫剂，具有传统化学杀虫剂所无法比拟的优点，其发展将对媒介昆虫的防制及农业发展产生巨大的促进作用。该文综述了光活化杀虫剂的作用机制、种类及应用，并分析了它的发展前景。
- 王春梅郑学礼
- 关键词：光敏剂
- 3种光敏剂毒杀白纹伊蚊幼虫的实验室与野外应用研究
- 2009年
- 目的研究光敏剂琥红(RB)、赤鲜红B、α-三噻吩对实验室饲养及野外白纹伊蚊4龄幼虫的杀灭效应。方法分别在实验室和野外条件下,计数不同药物浓度、不同光源照射和照射强度、不同处理时间的RB、赤鲜红B、α-三噻吩作用后白纹伊蚊4龄幼虫的死亡数,分析其影响杀蚊幼虫的实验参数。用组织化学的方法,研究其毒理机制。结果RB、赤鲜红B、α-三噻吩无暗毒性。用固定光源100W日光灯照射,照射强度为320×102lx,时间为6h;RB药物浓度分别为10、25μg/ml,赤鲜红B药物浓度分别为100、150μg/ml,皆可达到100%杀灭白纹伊蚊4龄幼虫的效果。用中低强度的太阳光照射5h,α-三噻吩药物浓度为1μg/ml,亦可达到100%杀灭白纹伊蚊4龄幼虫的效果。初步将赤鲜红B、α-三噻吩分别应用于野外不清澈和清澈自然水体内控制白纹伊蚊幼虫,赤鲜红B、α-三噻吩在野外不清澈水体内的杀虫率分别为46%和49%,而在清澈自然水体内的杀虫率分别为67%和89%;但当持续强度太阳照射,α-三噻吩在前2种水体内杀虫率皆可达到98%。组织化学试验结果显示:用RB、赤鲜红B、α-三噻吩处理的白纹伊蚊4龄幼虫,经光毒作用后,蚊中肠绒毛消失,细胞肿胀,细胞核消失。脂肪体在表皮下广泛分布,马氏管外形不规则及管腔狭窄等病理变化。结论RB、赤鲜红B、α-三噻吩3种光敏剂皆是高效、实用的光敏化杀虫剂。
- 郑学礼王春梅张超戴目巍栾浩王凤平吴淡娟陈文霞
- 关键词：白纹伊蚊毒理
- 应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统高效表达家蝇天蚕素被引量：4
- 2009年
- 目的应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统中高效表达家蝇天蚕素,研究伴侣分子对家蝇天蚕素基因在大肠杆菌中表达的影响。方法RT-PCR克隆家蝇的天蚕素成熟肽(mature cecropin,MC)与泛素(ubiquitin,UBI)基因,利用生物信息学方法分析硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)-MC和MC分子结构及Trx-MC分子和Trx-UBI-MC两种融合蛋白mRNA5'端的二级结构的异同。分别构建pET32a-MC和pET32a-UBI-MC两种重组质粒,转化入大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中。检测Trx-MC融合蛋白的表达和pET32a-MC和pET32a-UBI-MC在相同诱导时间及诱导剂浓度的条件下,融合蛋白表达量的差异。结果生物信息学分析结果显示MC分子被Trx分子包裹在其内部,MC分子的细胞毒性被去除,使其可以在大肠杆菌中正常表达。分子生物学实验结果进一步验证了生物信息学分析结果的正确性。同时,也显示UBI分子的加入,未影响融合蛋白质Trx-UBI-MC与Trx-MC的mRNA5'端二级结构。并且Trx-UBI-MC融合蛋白在全菌蛋白中的含量明显高于Trx-MC。结论Trx作为伴侣分子包裹了MC的天然结构,使其对宿主菌无毒性。UBI作为伴侣分子,在相同转录水平、翻译水平条件下,明显提高了蛋白的表达量。
- 王炜郑学礼陈晓光
- 关键词：家蝇天蚕素生物信息学
- 中国7市家蝇rDNA-ITS2基因分析被引量：3
- 2008年
- 目的：分析我国7市家蝇的rDNA-ITS2基因.方法：采集北京、吉林、长春、成都、南京、湖北荆州和养殖7市8个家蝇样本,形态鉴定.依据Drosophila melanogaster的nrRNA序列,设计扩增不同地区家蝇rDNA-ITS2基因的引物,PCR扩增不同地区家蝇基因组,获特定基因片段,SSCP分析.将PCR扩增不同地区家蝇rDNA-ITS2片段克隆于pMD-18T载体,序列测定,采用ClustalW软件在线分析不同地区家蝇rDNA-ITS2序列,用MegAlign（4.0）软件的UPMGA方法构建系统发育树.结果：我国7市8个家蝇样品的rDNA-ITS2基因均获约360bp阳性扩增区带.SSCP分析8个家蝇样品的rDNA-ITS2的SSCP电泳DNA迁移率均有一定差异.ClustalW比对分析不同地区的8个家蝇rDNA-ITS2基因序列间存在一定差异.同源性为75%,而其中部分地区家蝇样品rDNA-ITS2序列同源性高,家蝇（长春、吉林、养殖）,三者之间的同源性为98.0%~99.1%;家蝇（成都、南京、广州、荆州）之间的同源性为99.1%~99.7%.系统聚类分析显示,发育树共分成2支,1支是家蝇（北京与养殖）关系密切,先聚为一类,然后与家蝇（长春）再聚类;另1支是家蝇（成都与荆州）关系密切,最先聚类,然后与家蝇（南京）聚类,再与家蝇（广州）聚类,最后与家蝇（吉林）聚类.结论：应用PCR-SSCP和rDNA-ITS2基因序列分析揭示我国不同地区家蝇基因组序列存在一定差异.
- 胡佳林郑学礼陈晓光
- 关键词：家蝇SSCPRDNA-ITS2
- 四种光敏剂毒杀白纹伊蚊幼虫的实验室与野外应用研究
- 目的研究光敏剂K-01、K-02、K-03、K-04对实验室饲养的白纹伊蚊四龄幼虫杀灭效应,并将筛选的光敏剂K-02、K-03应用于野外生长白纹伊蚊幼虫的控制。观察光敏剂K-01、K-02、K-03引起蚊幼虫组织器官病理...
- 郑学礼王春梅张超戴目巍栾浩王风平吴淡娟陈文霞
- 关键词：白纹伊蚊毒理
- 文献传递
- 应用简单序列重复区间扩增多态性分子标记鉴定我国12个城市与地区常见嗜尸蝇类的研究被引量：5
- 2008年
- 目的探讨应用ISSR分子标记鉴定我国不同地区常见嗜尸蝇类,分析其亲源关系及基因差异。方法采集广州、深圳、阳江、南京、长春、宜昌、北京、武汉等12个城市与地区常见嗜尸蝇类:家蝇(Musca domestica),丝光绿蝇(Lucilia sericata),大头金蝇(Chrysomyia megacephala),黑尾麻蝇(Helicophagella melanura),棕尾别麻蝇(Boetthcherisca peregrina)。设计22个ISSR引物,对采集的蝇类基因组DNA进行PCR扩增,从中筛选出8个引物用于我国不同地区法医蝇类的鉴定,进行ISSR分析,用PAUP聚类分析软件绘制聚类图。结果8种ISSR引物鉴定我国部分城市与地区5种蝇类,总共扩增样品次数为121,可放大679个清晰和稳定的带,其中516个是多态性。结果表明我国不同城市与地区的家蝇、大头金蝇、丝光绿蝇、棕尾麻蝇、黑尾麻蝇分别呈现不同带谱,不同地区的家蝇呈现种内与地域多态性的遗传带谱,而5种腐尸性蝇种间呈现完全不同的带谱,发现种特异性的片段。聚类分析结果显示:10个不同地区的家蝇聚类为一棵分枝树,细分为4个不同层次的类群,不同地区的大头金蝇、丝光绿蝇的绝大多数种类聚类在一起,亦存在种内基因型与地理株的基因组DNA差异。结论应用ISSR技术,首次对我国12个城市和地区的常见嗜尸蝇类做出鉴定,揭示我国10个城市与地区的家蝇种类存在种内基因型和遗传的差异;不同地区的大头金蝇、丝光绿蝇亦存在种内基因型与地理株基因组DNA的差异。
- 胡佳林郑学礼王倩陈晓光黄勇平
- 关键词：分子标记
- 家蝇幼虫淋巴液的抑菌作用及其SDS-PAGE分析被引量：8
- 2007年
- 目的观察针刺诱导家蝇幼虫血淋巴抗菌物质抑菌作用与抗菌分子。方法室内饲养的家蝇三龄幼虫,经针刺体壁处理后48h,提取其血淋巴,观察单独使用血淋巴和血淋巴与氨苄青霉素混合对9种应试细菌的抑菌效果,血淋巴与抗真菌药氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果,应用SDS-PAGE分析血淋巴抗菌分子表达。结果针刺家蝇幼虫后48h的血淋巴,作用于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、黄色小球菌,结果显示:针刺家蝇幼虫后48h的血淋巴对试验9个标准株细菌,均产生明显抑菌环,经单因素方差分析,显示各抑菌试验组的抑菌效果,皆有显著差异(P<0.001)。其中对黄色小球菌抑菌活力最强。1μ1氨苄青酶素与7μ1针刺诱导家蝇幼虫淋巴液混合对白色葡萄球菌抑菌效果呈现最好的加强抑菌作用。针刺诱导家蝇幼虫血淋巴与抗真菌药物氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果呈现明显协同增强作用。SDS-PAGE分析结果显示:针刺幼虫后发育的成蝇和针刺幼虫血淋巴的电泳条带与未针刺者相比,针刺幼虫后发育的成蝇,在24000￣97000范围内表达尤为增强,在12000附近有一条特异性条带。针刺家蝇3龄幼虫血淋巴SDS-PAGE分析显示,在24000、35000、40000￣96000范围内表达明显增强,其中35000、12000条带较为特异。结论本研究进一步验证了家蝇血淋巴的抑菌活性,发现针刺诱导家蝇幼虫血淋巴对黄色小球菌抑菌活力最强,氨苄青霉素与家蝇幼虫淋巴液混合对白色葡萄球菌抑菌效果呈现最好的加强抑菌作用,针刺诱导家蝇幼虫血淋巴与抗真菌药物氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果呈现明显增强作用,上述发现在国内外报道较少,本研究结果,为进一步开发这类抗菌物质,提供了实验资料。
- 郑学礼廖奕佶胡佳林温文星张文炳徐燕
- 关键词：家蝇幼虫血淋巴抑菌作用抗菌物质
- 抗菌肽在胃肠道的天然免疫防御效应被引量：3
- 2007年
- 人的肠道经常与巨大数量的微生物接触,抗菌defensin家族,Cathelicidins,Resistin-like molecule[beta],杀菌/渗透性诱导蛋白,抗菌的凝集素,作为天然免疫的效应分子,某些抗菌肽分子又可作为被动免疫系统的细胞化学趋化因子,它们在保护宿主抗微生物入侵方面起着重要作用。本文就上述抗菌肽分子在胃肠道中的天然免疫防御效应及调节进行综述。
- 郑学礼王炜
- 关键词：抗菌肽胃肠道天然免疫
