美国中华医学基金(93-594)
- 作品数：12 被引量：78H指数：4
- 相关作者：黄如训黄海威苏庆杰李玲陈观今更多>>
- 相关机构：中山医科大学昆明医学院海南医学院附属医院更多>>
- 发文基金：美国中华医学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 恶性疟原虫FCC1/HN株CSP抗原基因表达产物在小鼠体内的免疫应答研究被引量：4
- 1999年
- 目的： 利用ｐｃＤＮＡ３ 质粒作为载体， 在人宫颈癌细胞（ＨｅＬａ 细胞） 中高效表达恶性疟原虫环子孢子蛋白 （ＣＳＰ）， 观察表达产物诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠免疫的应答水平。方法： 目的基因ＰｆＣＳＰ在ＨｅＬａ 细胞中表达， 将纯化的表达产物免疫接种小鼠， 通过ＥＬＩＳＡ、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 分析、Ｔ 淋巴细胞增殖实验、ＮＫ 细胞活性检测和Ｔ淋巴细胞亚群测定， 观察其诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠产生体液免疫和细胞免疫的应答水平。结果： ＥＬＩＳＡ 检测抗体滴度达１∶６ ４００；Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 结果在３８．３ ｋＤａ 相应位置出现较清晰的显色条带；表达产物能特异刺激小鼠脾淋巴细胞增殖、ＣＤ４＋ 与ＣＤ８＋ 细胞有所增加， 并能提高小鼠ＮＫ细胞活性。结论： 真核表达系统ｐｃＤＮＡ３－Ｐｆ／ＨｅＬａ表达产物能特异刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫的应答，
- 方政余新炳刘彦文罗树红
- 关键词：恶性疟原虫环子孢子蛋白HELA细胞
- 高血压-脑缺血-再灌注大鼠模型的建立及再灌注时间窗的探索被引量：2
- 2004年
- 目的:建立高血压-脑缺血-再灌注大鼠模型,观测脑缺血再灌注损伤。方法:制备肾血管性高血压大鼠(RHR),用线栓法复制大脑中动脉梗塞(MCAO),A组:MCAO3h后再灌注21h;B组:MCAO6h后再灌注18h;C组:MCAO24h。然后测定脑梗死体积及其占全大脑体积百分比、两半球体积差值。结果:MCAO6h后再灌注18h的RHR与持续MCAO24h的RHR比较,前者的梗死灶体积及其占全大脑体积百分比、两半球体积差值均有显著性增大(P<0.01),而MCAO3h后再灌注21h的RHR10例中仅有3例出现少许梗死灶。结论:MCAO6h后再灌注则已超出有效治疗时间窗,将造成明显的再灌注损伤。
- 苏庆杰黄海威李玲黄如训
- 关键词：高血压脑缺血再灌注损伤动物模型模型建立
- 胰岛素对高血压大鼠脑缺血再灌注期脑梗死体积的影响被引量：1
- 2004年
- 目的:观察胰岛素对脑缺血再灌注损伤的治疗作用。方法:制备肾血管性高血压大鼠(RHR),用线栓法复制大脑中动脉阻塞(MCAO),造成缺血6h再灌注18h,术后立即及6h后即时使用胰岛素,测定脑梗死体积的变化。结果:与对照组比较,实验组脑梗死体积及其占全大脑体积百分比、两半球体积差值均显著减小(P<0.05)。结论:胰岛素能减轻脑缺血再灌注损伤,早期用药效果更好。
- 苏庆杰黄海威李玲黄如训
- 关键词：胰岛素高血压脑缺血再灌注损伤脑梗死体积
- 胰岛素对大鼠脑缺血再灌注期细胞凋亡的干预被引量：1
- 2004年
- 目的:研究胰岛素对减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:制备肾血管性高血压大鼠(RHR),用线栓法复制大脑中动脉阻塞(MCAO),造成缺血2h后分别再罐注1,3,5d,并于再罐注后开始使用胰岛素,采用TUNEL法原位标记DNA片段,检测凋亡细胞的变化。结果:实验组TUNEL阳性细胞明显减少(P<0.05)。结论:胰岛素减轻脑缺血再灌注损伤的机制与减少再灌注后细胞凋亡或死亡有关。
- 苏庆杰黄海威肖小华黄如训
- 关键词：胰岛素脑缺血再灌注损伤细胞凋亡
- 胰岛素治疗局灶脑缺血再灌注损伤的实验研究被引量：3
- 2000年
- 目的 :观察胰岛素对脑缺血再灌注损伤的治疗作用并探讨其作用机制。方法 :制备易卒中型肾血管性高血压大鼠 ( RHRSP) ,用线栓法复制大脑中动脉阻塞 ( MCAO)模型。实验一 :造成缺血 6h再灌注 1 8h,治疗组于不同时程使用胰岛素 ,测定脑梗死体积及脑水肿的变化。实验二 :造成缺血 2 h再灌 1、3、5天 ,治疗组于再灌注后立即使用胰岛素 ,采用 TUNEL法原位标记 DNA片段 ,检测 TUNEL阳性细胞的变化。结果 :治疗组的梗死灶体积及其占全大脑体积百分比、两半球体积差值显著减小 ,TUNEL阳性细胞亦明显减少 ( P<0 .0 5)。结论 :胰岛素能减轻脑缺血再灌注损伤 ,早期用药效果更好 ,减少再灌注后细胞损伤很可能是其作用机制之一。
- 黄海威苏庆杰黄如训李玲肖小华
- 关键词：胰岛素高血压脑缺血再灌注损伤
- 恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫鼠体内抗原定位研究
- 2001年
- 目的 用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫小鼠 ,观察其在宿主体内各组织的抗原分布情况。方法 提取目的基因PfCSP在HeLa细胞中的表达产物 ,免疫注射BALB/c小鼠。取免疫后 4周及 7周小鼠心脏、肝脏、脑、脾及肌肉 ,通过免疫酶组织化学法及间接免疫荧光法检测组织内的抗原。结果 免疫 7周后的BALB/c小鼠肝脏组织枯否氏细胞内及肝细胞膜上可见棕黄色特异性抗原 -抗体反应 ,而免疫鼠心、脑、肌肉未出现明显的阳性反应。结论 恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达蛋白能被肝实质细胞特异性识别 。
- 方政刘彦文鄂群史玉坤余新炳
- 关键词：恶性疟原虫环子孢子蛋白基因表达产物抗原定位
- 昆明市妊娠妇女弓形虫感染的调查分析被引量：6
- 2003年
- 贾雪梅李飞陈观今
- 关键词：妊娠妇女弓形虫感染血清
- 大鼠局灶性脑缺血模型及其与C反应蛋白变化的关系被引量：46
- 1999年
- 目的 改进大鼠大脑中动脉梗塞法 ,建立更接近于临床缺血性脑卒中及其再灌注的可靠模型 ,并观察其与血清 C反应蛋白变化的关系。 方法 沿大鼠右颈内动脉插入长 2 .1～ 2 .3cm直径 0 .2 0 5 mm的单股尼龙丝 ,直达大脑中动脉起始部开口 ,阻断其血流 ,观察大鼠神经病学改变及脑组织形态学变化 ,并测定血清 C反应蛋白含量。 结果 术后大鼠表现特殊体态及典型追尾征 ,6h大脑中动脉供血区出现缺血性外观 ( TTC染色 )及相应组织学变化 ( HE染色 ) ,模型成功率近95 % ( 71/75 ) ;并伴血清 C反应蛋白上升 ( 15 .9% ,n=2 0 ,P<0 .0 5 )。 结论 本方法既可构成缺血性病灶 ,又能形成再灌注模型 ,具有可逆性重复操作的特点 ;其神经病学与形态学的特殊表现及血清 C反应蛋白的升高 ,可作为鉴定模型可靠性的依据。
- 林春郑淑秋钟觉民颜光美
- 关键词：脑缺血C反应蛋白
- 弓形虫GRA1基因的体外扩增、克隆及鉴定被引量：10
- 2002年
- 目的 体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA1基因 ,并构建真核表达质粒。方法 从接种了弓形虫RH株的小鼠腹水中收集、纯化速殖子 ,提取基因组DNA ;据已知的GRA1基因列 ,设计合成一对引物 ,并引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点。应用PCR技术 ,从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA1基因片段。扩增目的基因片段经纯化、双酶切后 ,插入真核表达质粒pEGFP -N3中 ,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,于卡那霉素阳性LB平板上筛选阳性克隆。重组子经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切、PCR鉴定。结果 从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出 785bp的GRA1基因片段 ,构建重组质粒pEGFPN3-GRA1,酶切和PCR鉴定产物大小均与预期值相符。 结论 成功地从弓形虫RH株基因组DNA中获取了GRA1基因 ,并构建了pEGFPN3-GRA1重组质粒。
- 贾雪梅陈观今郭虹郑焕钦
- 关键词：弓形虫聚合酶链反应基因克隆
- 成骨性肿瘤中p27基因mRNA与蛋白的表达及其意义被引量：6
- 2000年
- 目的 :探讨 p27mRNA与蛋白在成骨性肿瘤中的表达状况 ,了解其与肿瘤组织学类型、分化程度及生物学行为的关系。方法 :采用免疫组化和非放射性核酸原位杂交技术检测成骨性肿瘤中 p27蛋白和mRNA的表达状况。结果 :骨瘤、骨母细胞瘤中 p27蛋白高表达 ,主要定位于胞核 (85.7 %、75 % ) ,骨肉瘤中低表达 ,胞核表达极低(4.7 % ) ,两者间差异显著 (P<0.01)。p27蛋白在骨肉瘤中的表达与肿瘤的浸润、复发和转移有关。原位杂交显示良、恶性成骨性肿瘤的 p27mRNA表达阳性率及表达强度无显著性差异 (P>0.05)。且与骨肉瘤的组织学类型、分级及生物学行为无关。结论 :p27蛋白表达在成骨性肿瘤中的改变具有特异性 ,可作为骨肉瘤的诊断和评估预后的指标。骨肉瘤中p27蛋白表达低下可能是由于转录后特异性的蛋白酶介导的降解所致。
- 文彬丘钜世李扬
- 关键词：成骨性肿瘤MRNAP27基因P27蛋白基因表达
