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国家自然科学基金(30771780)

作品数:7 被引量:36H指数:3
相关作者:蒋义国沈月兰周兰兰杨巧媛郑宇欣更多>>
相关机构:广州医学院青海大学华南理工大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
相关领域:医药卫生自动化与计算机技术更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 1篇自动化与计算...

主题

  • 4篇细胞
  • 3篇上皮
  • 3篇上皮细胞
  • 2篇致癌
  • 2篇小发夹RNA
  • 2篇基因
  • 2篇二羟环氧苯并...
  • 2篇发夹
  • 1篇语义聚类
  • 1篇支气管
  • 1篇支气管上皮
  • 1篇支气管上皮细...
  • 1篇人支气管上皮
  • 1篇人支气管上皮...
  • 1篇推荐系统
  • 1篇气管
  • 1篇气管上皮
  • 1篇气管上皮细胞
  • 1篇转化细胞
  • 1篇微阵列

机构

  • 5篇广州医学院
  • 1篇华中科技大学
  • 1篇江西省人民医...
  • 1篇华南理工大学
  • 1篇青海大学
  • 1篇珠海市疾病预...

作者

  • 5篇蒋义国
  • 3篇沈月兰
  • 2篇周兰兰
  • 2篇杨巧媛
  • 1篇居颖
  • 1篇陈学敏
  • 1篇刘焕英
  • 1篇付娟
  • 1篇区庆勇
  • 1篇曹虹
  • 1篇谭爱军
  • 1篇赵垚
  • 1篇陈健
  • 1篇李东
  • 1篇刘林华
  • 1篇傅娟
  • 1篇李远奇
  • 1篇郑宇欣

传媒

  • 2篇环境与健康杂...
  • 2篇中华预防医学...
  • 1篇计算机应用
  • 1篇中华劳动卫生...
  • 1篇Biomed...

年份

  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 4篇2009
  • 1篇2008
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
小发夹RNA抑制人上皮生长因子受体-2基因表达细胞株的构建
2009年
目的在经反式二羟环氧苯并芘(BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞基础上建立一种载体介导的小发夹RNA(shRNA)抑制人上皮生长因子受体-2(HER2/neu)表达的稳定细胞株。方法构建靶向干扰HER2/neu shRNA逆转录病毒载体pSIREN—RetroQ—neu,经酶切及测序鉴定后,将重组表达载体经脂质体介导入反式BPDE恶性转化细胞中,同时以阴性片段重组载体转染细胞(阴性对照)和空白细胞(16HBE—T)做对照,经嘌呤霉素筛选阳性转染细胞株。半定量RT—PCR和Western blotting技术分别检测分析各组细胞中HER2/neu基因mRNA和蛋白表达差异。结果获得载体介导靶向抑制反式BPDE恶性转化细胞中HER2/neu基因表达的细胞株。pSIREN—RetroQ—neu阳性转染细胞组分别比较阴性对照和空白细胞组HER2/neu mRNA表达量均下降(平均灰度值分别为0.114±0.003、0.186±0.001、0.182±0.015),其差异有统计学意义(t值分别为39.154、7.564,P值均〈0.05),而阴性与空白对照组间相比差异无统计学意义(t=-0.409,P〉0.05)。pSIREN—RetroQ—neu转染细胞组相比阴性对照和空白细胞组HER2/neu蛋白表达明显下降,其抑制率分别达40%和39%。结论成功构建pSIREN—RetroQ-neu重组质粒,并能有效抑制反式BPDE恶性转化细胞中HER2/neu表达。
傅娟蒋义国居颖沈月兰陈学敏
关键词:细胞系ERBB-2RNA干扰
miR-542-3p在反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘诱导致癌中的作用被引量:4
2011年
目的 探讨反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(anti-BPDE)诱导恶变的人支气管上皮细胞(16HBE-T)中miR-542-3p在细胞恶性转化中的作用.方法 运用实时荧光定量PCR法验证miR-542-3p成熟体在16HBE-T和非转化对照细胞(16HBE-N)中的表达水平.瞬时转染化学合成的miR-542-3p模拟物上调16HBE-T的miR-542-3p成熟体表达水平,检测miR-542-3p表达水平改变对16HBE-T细胞的增殖能力、细胞周期、细胞凋亡、软琼脂克隆形成率及细胞迁移能力的影响.结果 转染前16HBE-T中miR-542-3p成熟体表达水平是16HBE-N的(39.08±6.95)%(t=15.18,P<0.05).瞬时转染化学合成的miR-542-3p模拟物上调16HBE-T的miR-542-3p成熟体表达水平后,16HBE-T中miR-542-3p成熟体表达水平是转染前的(5.23±0.55)倍(t=17.37,P<0.05).miR-542-3p模拟物组(mimic组)与16HBE-T组(100%)相比,增殖率下降到(62.06±5.61)%(t=-17.28,P<0.05),G0/G1期比例上升到(74.76±4.86)%(t=4.53,P<0.05),克隆形成率降低为(5.87±0.67)%(t=-6.66,P<0.05).mimic组生长细胞覆盖区面积比(0.31±0.08)明显降低(t=-6.78,P<0.05),凋亡无改变.结论 miR-542-3p表达水平升高会降低anti-BPDE恶性转化细胞的增殖能力和恶性程度,推断miR-542-3p是类抑癌基因,在anti-BPDE诱导致癌过程中低表达的miR-542-3p可能是促成恶性转化的重要因素.
赵垚刘焕英李远奇蒋义国
关键词:MICRORNA人支气管上皮细胞细胞转化
N-Ras基因靶向的shRNA抑制二羟环氧苯并芘诱导的恶变细胞增殖
2009年
目的用小发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默N-Ras基因表达,探讨N-Ras基因表达对二羟环氧苯并芘(BPDE)转化人支气管上皮细胞(16HBE-T)恶性性状的影响。方法将已建立的针对N-Ras基因的shRNA干扰表达质粒载体pGPU6/GFP/Neo-NRas-566转染16HBE-T细胞,经G418筛选,建立稳定沉默N-Ras基因转化细胞系。采用Western blot筛选最佳N-Ras基因沉默细胞系,用流式检测N-Ras沉默细胞周期变化,用软琼脂实验和裸鼠成瘤实验进行细胞表型分析。结果成功培养出稳定沉默N-Ras基因的16HBE-T细胞系,Western blot显示N-Ras蛋白抑制率最高达86%。流式分析发现稳定沉默N-Ras基因表达诱导转化细胞G0/G1期捕获,软琼脂实验和裸鼠成瘤实验发现稳定沉默N-Ras基因降低了体外恶性转化细胞的集落形成率、抑制了体内肿瘤细胞生长。结论N-Ras基因沉默可以降低转化细胞的细胞周期进程和细胞恶性性状表型,提示N-Ras基因在二羟环氧苯并芘诱导细胞恶变过程中具有重要作用。
周兰兰蒋义国谭爱军沈月兰刘林华杨巧媛
关键词:二羟环氧苯并芘小发夹RNAN-RAS基因
二羟环氧苯并芘恶性转化细胞的microRNA表达谱被引量:2
2008年
目的检测二羟环氧苯并芘(BPDE)恶性转化细胞的microRNA(miRNA)表达谱,寻找恶性转化细胞与对照细胞差异表达的miRNA。方法以溶剂二甲亚砜助溶的终浓度为2.0μmol/L的BPDE培养液培养人支气管上皮细胞株16HBE,获得BPDE恶性转化的细胞模型为实验组,同时,以含二甲亚砜的培养液培养正常16HBE作为对照组。通过微阵列技术检测实验组与对照组327个人类miRNA,并选择差异表达明显的miR-10a和miR-320用反转录荧光定量PCR方法对微阵列结果加以验证。结果获得2组细胞327个miRNA表达谱,发现差异表达miRNA55个,其中46个表达上调,9个表达下调,并得到反转录荧光定量PCR的验证。结论获得BPDE恶性转化细胞与正常16HBE细胞差异表达的miRNA,为进一步寻找BPDE恶性转化细胞特征性miRNA提供了研究基础。
蒋义国沈月兰付娟周兰兰曹虹
关键词:二羟环氧苯并芘上皮细胞细胞恶性转化微阵列分析
基于语义聚类的协作推荐攻击检测模型被引量:4
2009年
协作过滤推荐模型目前已被广泛应用于电子商务等环境。由于其对用户偏好数据敏感,因此攻击者可以通过注入伪造的用户偏好数据来影响推荐系统的预测。提出了一个基于语义聚类的协作过滤攻击检测模型,从分析项目的语义入手,针对攻击数据中的随机性,通过分析用户兴趣的组合来评判用户偏好数据的真实与否。大量的实验证明,该模型能有效地检测协作过滤推荐中的注入攻击,从而大大提高了推荐系统的鲁棒性和可靠性。
陈健区庆勇郑宇欣李东
关键词:推荐系统语义聚类
环境化学致癌研究若干热点与问题
2010年
环境化学物的致癌机制研究是环境与健康研究的一项重要内容,广州医学院化学致癌研究所蒋义国教授从事环境化学致癌和分子毒理学研究并取得重要进展。本刊特邀蒋义国教授就近期研究成果组织和整理,进行集中报道,以促进该研究的深入和发展。
蒋义国杨巧媛
关键词:环境污染物基因
MicroRNA Expression Profiles and MiR-10a Target in Anti-benzo[a] pyrene-7,8-diol-9,10-epoxide-transformed Human 16HBE Cells被引量:26
2009年
<正>Objective To screen miRNA profiles of malignantly transformed human bronchial epithelial cells,16HBE-T,induced by anti-benzo[a]pyrene-trans-7,8-diol-9,10-epoxide(anti-BPDE),and to analyze putative miR-10a targets in 16HBE-T.Methods A hovel microarray platform was employed to screen miRNA profiles of 16HBE-T cells transformed by anti-BPDE.Microarray data for miR-10a and miR-320 were validated using quantitative real time polymerase chain reaction(QRT-PCR).The expression of a putative target for miR-10a,HOXA1,was analyzed by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) and QRT-PCR.Results In comparison with the vehicle-treated cells(16HBE-N),16HBE-T exhibited difierential expression of 54 miRNAs,in which,45 were over-expressed and 9 were down-regulated.The five most highly expressed miRNAs were miR-494,miR-320,miR-498,miR-129,and miR-106a.The lowest expressed miRNAs were miR-10a,miR-493-5p,and miR-363~*.Three members of miR-17-92 cluster,miR-17-5p,miR-20a,and miR-92,showed significantly higher abundance in 16BHE-T as miR-21,miR-141,miR-27a,miR-27b,miR-16 and miRNAs of the let-7 family.The putative target for miR-10a, HOXA1 mRNAwas up-regulated 3-9-foldin 16HBE-T,as compared with 16HBE-N.Conclusion Thefindings of the study provide information on differentially expressed miRNA in malignant 16HBE-T,and also suggest a potential role of these miRNAs in cell transformation induced by anti-BPDE.HOXA1 is similarly up-regulated,suggesting that miR-10a is associated with the process of HOXA1-mediated
YUE-LAN SHENYI-Guo JIANGANNE R. GREENLEELAN-LAN ZHOULIN-HUA LIU
关键词:上皮细胞
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