中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(20132L033)
- 作品数：2 被引量：12H指数：2
- 相关作者：吴杰李继莲徐龙龙郭军更多>>
- 相关机构：中国农业科学院蜜蜂研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 共生菌群在熊蜂生长发育过程中的动态变化被引量：5
- 2014年
- 【目的】了解人工饲养的兰州熊蜂(Bombus lantschouensis)肠道内共生菌群的组成,探明主要肠道共生菌群在熊蜂生长发育过程中的变化规律,为进一步开展熊蜂共生菌功能的研究奠定基础。【方法】以兰州熊蜂肠道总DNA为模板,使用细菌通用的774F和1391R引物进行PCR扩增,构建细菌16S rDNA文库,挑取单克隆菌落测序,测得序列去除chimera后,以序列相似性97%为标准,划分分类操作单元(operational taxonomic units,OTU),采用BLASTn进行序列同源性分析,确定细菌种类,分析熊蜂肠道菌群的组成。根据克隆文库测得的Gilliamella apicola和Snodgrassella alvi细菌16S rDNA序列设计特异性引物。用G.apicola和S.alvi的特异性引物进行PCR扩增,构建重组子质粒,构建好的质粒经浓度测定后,10倍梯度稀释成5个浓度梯度,进行荧光定量PCR检测,绘制标准曲线。以兰州熊蜂的卵、幼虫、蛹以及0、5、10、15、20日龄的工蜂肠道DNA为模板,采用熊蜂β-actin为内参基因,对样品中的共生菌G.apicola和S.alvi进行荧光定量PCR分析,并比较不同日龄、不同虫态每微升肠道基因组DNA样品中检测到的细菌16S rDNA基因的拷贝数,分析共生菌数量在熊蜂生长发育过程中的变化。不同日龄、不同虫态之间相对表达量的显著性差异用软件SPSS19.0的单因素ANOVA方差分析进行统计。【结果】从文库中随机挑选213个单克隆进行测序,经过Chimeras分析后,共得到202个有效序列,这些序列共划分为16个OTU。测得的序列与登录的相应细菌16S rDNA序列的相似性在93%—99%。在克隆文库测得的细菌16S rDNA序列中,G.apicola占45%、S.alvi占30%、Bifidobacterium占10%、Fructobacillus fructose占5%、Lactobacillus占2%、Flavobacterium aciduliphilum占2%,其他细菌占6%。其中G.apicola和S.alvi为兰州熊蜂肠道内的主要共生菌,qPCR结果表明两种共生菌在不同日龄、不同虫态的熊蜂肠道内都能检测到,两种细菌�
- 徐龙龙吴杰郭军李继莲
- 关键词：熊蜂共生菌肠道微生物荧光定量PCR
- 蜜蜂共生菌研究进展被引量：8
- 2013年
- 蜂类昆虫是自然界最主要的授粉昆虫类群,它们在保护植物多样性及维持生态系统平衡等方面发挥着极为重要的作用。介绍了蜜蜂属(Apis)和熊蜂属(Bombus)昆虫体内共生菌的种类、分布以及部分共生菌在抑制病原菌生长、抵抗寄生虫侵染、提供营养物质等方面的作用,分析了研究中有待解决的问题,并探讨了未来的研究热点,旨在为提高蜜蜂的环境适应性和防治其病虫害提供一定的参考。
- 徐龙龙吴杰李继莲
- 关键词：共生菌蜜蜂熊蜂肠道微生物
