国家自然科学基金(30771774)
- 作品数:5 被引量:8H指数:1
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- 内毒素多克隆抗体制备及其在ELISA中应用
- 2012年
- 目的制备抗大肠杆菌精制内毒素的兔多克隆抗体并建立检测内毒素的间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法大肠杆菌精制内毒素作为免疫原,采用逐渐加强免疫剂量的方法免疫家兔,制备抗体,将抗体用于ELISA检测精制内毒素;并与复合型内毒素进行反应。结果随着免疫次数增加,抗血清效价逐渐提高,最后一次免疫后血清效价达到1∶6 400;在包被抗原浓度100μg/mL和兔多抗稀释比1:500最佳使用条件下建立间接竞争性ELISA,内毒素浓度与吸光度(A)值成反比例关系,线性回归方程为:y=-0.1 ln(x)+0.765,检测最低内毒素浓度为50 ng/mL;兔血清与复合型内毒素反应效价为1∶16 000。结论成功制备出抗精制内毒素兔多克隆抗体,且能与复合型内毒素反应。
- 周卓晟罗中捷郝春慧郭寅生刘红艳黄正
- 关键词:内毒素多克隆抗体
- 武汉市自来水处理工艺过程中内毒素的含量被引量:6
- 2008年
- 目的了解武汉市主要饮用水中内毒素的污染现状以及自来水常规处理工艺对内毒素的去除效果。方法于2008年3月,采集以长江为水源的平湖门水厂和以汉江为水源的宗关水厂原水、一次加氯、混凝沉淀、过滤、二次加氯(出厂水)、管网末梢水环节水样进行检测。采用《中华人民共和国药典》(2005版)中细菌内毒素鲎试剂检查法的光度测定法检测水样中内毒素的含量。结果平湖门水厂的长江原水的内毒素含量范围为(100.98±2.75)EU/ml,管网末梢水中内毒素含量范围为(18.53±0.01)EU/ml;宗关水厂的汉江原水的内毒素含量范围为(86.40±1.69)EU/ml,管网末梢水中内毒素含量范围为(41.68±1.94)EU/ml。平湖门、宗关水厂自来水常规处理工艺对内毒素的总去除率分别为81.65%和51.76%。结论自来水处理工艺对内毒素有去除效果,但出厂水内毒素含量仍较高。
- 段凌王欣张怡刘红艳黄正
- 关键词:内毒素饮用水水处理工艺鲎试剂法
- 环境内毒素及检测技术研究进展被引量:1
- 2010年
- 周卓晟罗中捷刘红艳黄正
- 关键词:内毒素脂多糖
- 内毒素的多粘菌素B与抗体联用夹心ELISA检测法
- 2012年
- 目的建立细菌内毒素的多粘菌素B(PMB)与抗内毒素兔多克隆抗体联合夹心ELISA(sELISA)检测法。方法将PMB包被于酶标板作固相,封闭后逐次加入不同浓度的大肠杆菌内毒素,优化抗内毒素兔多抗和酶标抗体的浓度,建立sELISA方法。结果在0.1~100μg/ml范围内,内毒素浓度与OD值呈正相关关系,回归方程为y=0.094lnx+0.227,R2=0.914,最低检测限为100 ng/ml。结论该方法适用于内毒素检测。
- 周卓晟罗中捷郝春慧郭寅生刘红艳黄正
- 关键词:内毒素多粘菌素B多克隆抗体
- ELISA与免疫传感器在大肠杆菌内毒素检测中的应用被引量:1
- 2011年
- 目的:研究两种基于免疫反应和电化学的简便、灵敏、特异检测内毒素的新方法。方法:应用ELISA建立PMB-ET-ELISA法和免疫传感器法对大肠杆菌内毒素进行分析,并对两种方法检测范围和最低检测限进行分析和比较。结果:ELISA方法检测精制内毒素范围为1μg/ml~1 mg/ml,检测大肠杆菌O157:H7范围为105 CFU/ml~109 CFU/ml,相当于内毒素190μg/ml~2918μg/ml。免疫生物传感器法检测精制内毒素范围为1μg/ml~1 mg/ml;检测大肠杆菌O157:H7范围为106 CFU/ml~109 CFU/ml,相当于内毒素288μg/ml~1416μg/ml。结论:建立的ELISA和免疫传感器两种检测内毒素新方法有效、稳定、可用。
- 郭寅生郝春慧刘红艳黄正
- 关键词:ELISA免疫传感器大肠杆菌内毒素