解放军总医院医药卫生科研基金
- 作品数：29 被引量：109H指数：6
- 相关作者：邢建华郭蓉史文慧罗朝利夏咸柱更多>>
- 相关机构：北京军区北戴河疗养院北京军区总医院军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立
- 目的:建 DNA 聚合酶 iota 在 HEK-293细胞中的高表达体系。方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将已构建的带有目的基因的真核表达质粒 PCDNA3.1转 HEK-293细胞,通过 G...
- 周虎传杨劲曾益军位全芳何凤田赵谦李劲刘洋李杰
- 关键词：HEK-293细胞
- DNA聚合酶Polι的研究进展
- 2011年
- Y家族DNA聚合酶是一种跨损伤复制酶,即能以损伤的DNA为模板进行复制。Y家族DNA聚合酶广泛分布生物界,人类细胞中Y家族DNA聚合酶至少包括Rev1、Polκ、Polι、Polη四种,Polι在以DNA为模板进行复制时错配率很高而不同于其他跨损伤DNA聚合酶,Polι是目前发现的所有DNA聚合酶中保真性最低的DNA聚合酶。很高的错配率导致很高的突变率,最后基因的突变导致癌症的发生,因此Polι在各个国家被广泛的研究,并且对Polι的各个不同的特性进行了研究,取得了一系列成果,现对Polι的研究进展予以综述,并展望了未来的研究趋势。
- 周虎传杨劲
- 关键词：DNA聚合酶
- 犬冠状病毒部分纤突蛋白基因的分子克隆被引量：1
- 2002年
- 以RT-PCR方法扩增出犬冠状病毒(CCV)YS1、CI1 2株国内分离病毒的部分纤突蛋白基因,经酶切鉴定为CCV特异性核苷酸片段。采用平端连接法将WizardTM PCR纯化试剂盒纯化的PCR产物克隆于pUC19Sma I酶切位点上,获得YS1pUC19、CI1pUC19重组质粒。琼脂糖凝胶电泳鉴定表明:重组质粒大于蓝斑菌质粒。以BarnH I、Kpn I双酶切重组质粒可获得比原PCR产物略大的核苷酸片段.并从中以PCR方法扩增出与原PCR产物大小相同的核苷酸片段。
- 胡桂学单晓枫夏咸柱鲍志宏杨明磊
- 关键词：冠状病毒纤突蛋白基因分子克隆
- DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立
- 2008年
- 目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polt)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础。方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,通过G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆。结果:通过G418筛选筛选出了具有G418抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系。结论:建立了高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础。
- 周虎传杨劲曾益军位全芳何凤田赵谦李劲刘洋李杰
- 关键词：HEK-293细胞DNA损伤DNA修复
- 表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒构建与包装被引量：7
- 2005年
- 为构建表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒,用MluⅠ和SphⅠ双酶切真核表达载体pVAXLPN,获得CDV N基因表达盒,将CDV N基因表达盒克隆入预先用SspⅠ酶切后的线性化质粒pVAXΔE3中,构建含CDV N基因表达盒的转移质粒pVAXΔE3LPN。用NruⅠ和SalⅠ双酶切转移质粒pVAXΔE3LPN,回收E3区部分缺失的含CDV N基因表达盒的目的片段,定向克隆入同样酶切处理含CAV-2全基因组的质粒载体ppoly2-CAV-2中,构建E3区部分缺失的包含CDV N基因表达盒的重组质粒pCAV-2-CDVLPN。重组质粒pCAV-2-CDVLPN经AscⅠ酶切获得线性化基因组CAV-2-CDVLPN。此基因组与NruⅠ和SalⅠ分别酶切CAV-2 SY基因组获得的片段混合,利用脂质体介导共转染MDCK细胞,重复转染3次后,出现典型CAV-2病变,经电镜观察和酶切鉴定,证明表达犬瘟热核蛋白的重组犬2型腺病毒包装成功。
- 鞠会艳李彦舫夏咸柱高玉伟杨松涛
- 关键词：犬瘟热病毒犬腺病毒重组病毒
- 抗氧化剂茶多酚对微循环的影响及成因探讨被引量：6
- 1999年
- 罗新民王红许庆元余杰胡永华詹皓
- 关键词：茶多酚微循环飞行人员球结膜
- 山东省沿海地区部队官兵健康状况调查分析被引量：1
- 2013年
- 目的调查分析山东省沿海地区部队官兵的健康状况及影响因素。方法应用整群抽样方法，采用自行设计的健康调查表进行问卷调查与分析。调查表含有与血液系统及消化系统疾病相关的20项自觉症状。结果调查表所列的20项自觉症状在山东省沿海地区接受调查的1372例部队官兵中均可见到，但发生率不同，其中烦躁、情绪低落、乏力、头晕、失眠的发生率分别为39．2％、31．1％、28．5％、23．5％和23．5％，列居前5位。不同职务、兵种、服役期限、文化程度和性别等5种常见自觉症状的发生率各不相同，其中干部常见症状的发生率均高于战士，且烦躁、情绪低落、头晕发生率差异有统计学意义（X2=4．804、6．996、4．461，均P〈0．05）；海军官兵5种常见症状的发生率均高于陆军（x2=61．114、53．179、59．142、30．948、25．539，均P〈0．01）；不同服役年限的官兵5种常见症状的发生率差异均有统计学意义（均P〈0．05）；头晕发生率以大学及以上学历最高，失眠发生率以大专学历最高，但差异无统计学意义（P〉0．05）；男性官兵失眠的发生率与女性官兵差异有统计学意义（x2=7．483，P〈0．05）。采用Logistic回归法分析影响因素显示兵种、服役期限和文化程度为影响因素，但最重要的影响因素是兵种、服役期限。结论部分官兵的健康状况存在问题，且受到文化程度尤其是兵种、服役期限等因素的影响，应针对不同兵种的特点，加强对长期服役期官兵开展健康教育和体检工作。
- 向阳宋伟娜孙雅宁尤婷玉李海霞杜欣周琳
- 基于质粒载体的转基因小鼠突变研究模型的建立被引量：1
- 1995年
- 基于质粒载体的转基因小鼠突变研究模型的建立黎怀星，李建秀，杨桦，胡以平，王肖鹏，傅继粱（上海第二军医大学生物教研室２００４３３华西医科大学分子生物学研究室成都６１００４１）本研究拟建立一个以ＬａｃＩ作为诱变靶基因，ｐＳＰＯＲＴＩ（４．１ｋｂ）作为载体...
- 黎怀星李建秀杨桦胡以平王肖鹏傅继粱
- 关键词：质粒转基因小鼠基因突变动物模型
- 胚胎操作方式对受精卵成活率影响的初步分析被引量：1
- 1995年
- 胚胎操作方式对受精卵成活率影响的初步分析黎怀星，李建秀，杨桦，胡以平，王肖鹏，傅继梁（上海第二军医大学生物教研室２００４３３成都华西医科大学分子生物学研究室成都６１００４１）正确的胚胎操作是以显微注射法制备转基因小鼠的主要步骤之一，它直接影响胚胎的成...
- 黎怀星李建秀杨桦胡以平王肖鹏傅继梁
- 关键词：受精卵成活率转基因小鼠
- 慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞HCV感染复制与干扰素治疗反应被引量：3
- 2001年
- 陈良标陈佩兰刘超英田惠英李琳
- 关键词：慢性丙型肝炎HCV干扰素抗病毒药单个核细胞
