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国家高技术研究发展计划(N20060102Z4055)

作品数：1 被引量：3H指数：1
相关作者：商燕甘丽红郭磊李爱清姒健敏更多>>
相关机构：浙江大学医学院附属邵逸夫医院浙江大学更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇增殖
  • 1篇增殖迁移
  • 1篇迁移
  • 1篇转录
  • 1篇胃癌
  • 1篇胃癌细胞
  • 1篇细胞
  • 1篇癌细胞
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇COL1A1
  • 1篇SHRNA

机构

  • 1篇浙江大学
  • 1篇浙江大学医学...

作者

  • 1篇周天华
  • 1篇姒健敏
  • 1篇李爱清
  • 1篇郭磊
  • 1篇甘丽红
  • 1篇商燕

传媒

  • 1篇浙江大学学报...

年份

  • 1篇2010
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
COL1A1-shRNA表达载体的构建及对胃癌细胞增殖迁移的影响被引量：3
2010年
目的:构建COL1A1特异小干扰RNA(siRNA)表达载体,体外评价其对胃癌细胞BGC-823增殖迁移的影响。方法:根据文献获得3个COL1A1的siRNA靶序列,设计能转录短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pSilencerTM4.1-CMV neo线性质粒载体连接,连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选获得重组质粒;经DNA测序鉴定重组体DNA序列正确后转染胃癌BGC-823细胞,利用G418筛选稳定表达COL1A1-shRNA的BGC-823细胞株。通过实时荧光定量RT-PCR及Western blot检测转染后细胞COL1A1在mRNA及蛋白质水平的表达;MTT法及Transwell法检测COL1A1干扰后胃癌细胞增殖及迁移能力的变化。结果:序列测定表明成功构建3个COL1A1-shRNA表达载体。实时荧光定量RT-PCR及Western blot检测显示,COL1A1-shRNA转染胃癌BGC-823细胞的COL1A1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);MTT试验及Transwell迁移试验显示,转染后细胞增殖及迁移能力明显降低(P<0.05)。结论:COL1A1-shRNA转染胃癌BGC-823细胞能有效抑制细胞COL1A1的表达及癌细胞的增殖迁移。
李爱清姒健敏商燕甘丽红郭磊周天华
关键词：RNA干扰
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