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单核苷酸突变基因型PCR-SSP快速检测方法的建立: 2011年; 目的:探讨多样本、多基因的单核苷酸突变基因分型操作的PCR-SSP的最优参数,建立最佳反应体系。方法:优化PCR-SSP反应中扩增体系参数,选取优化后的参数做为反应体系;在反应体系已优化的条件下,分别优化解链温度、循环参数。结果:优化后Mg2+、dNTPs、Taq酶、序列特异性引物、内对照引物、DNA模板在20μL反应体系中的终浓度分别为:3.75μmol/L、0.5m mol/L、2.5U、0.5μmol/L、0.2μmol/L、0.15μg;采用改良的TouchDown做为循环参数,其中DNA变性时间至15min,增加5个起始循环。结论:成功建立了PCR-SSP反应的快速操作体系,扩增条带清晰,普通、琼脂糖凝胶电泳即可检测单核苷酸突变基因型。优化后的体系适合对人、小鼠等各类型DNA样本进行快速多基因单核苷酸多态性分型。; 杨瑞李小英王天云; 关键词：基因型

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河南省教育厅自然科学基金(2007330003)