河北省自然科学基金(C2005000267)
- 作品数：1 被引量：18H指数：1
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- 枣SSR-PCR体系的建立与优化
- 枣叶片为试材,采用正交设计L16(45)在4个水平上对影响枣SSR-PCR反应体系的Taq酶浓度、Mg2+含量、模板DNA用量、dNTP浓度及引物用量5个因素进行了试验优化和比较,建立了枣SSR-PCR反应的最佳体系:即...
- 肖京李慧赵锦刘孟军
- 关键词：正交试验
- 枣不同器官和组织RNA提取方法的研究被引量：18
- 2009年
- 以田间幼嫩叶片为试材,建立枣RNA改良CTAB提取法,改良之处包括利用巯基乙醇和PVP联合去除多酚、CTAB与异硫酸氰胍联合促进RNA释放及加入糖原提高产率等。改良CTAB法提取液组成:2%CTAB,4mol/L异硫酸氰胍,100mmol/LTris-HCl(pH8.0),20mmol/LEDTA(pH8.0),2%PVP,4%β-巯基乙醇,250μg/ml糖原。进而采用Trizol试剂法、改良CTAB法、改进SDS-酚法、热硼酸法和异硫氰酸胍法5种方法分别对枣组培苗、幼叶、幼嫩枝皮、根皮和枣果5种器官和组织进行了总RNA提取。结果表明,组培苗RNA提取以Trizol试剂法为最佳,田间幼叶和成熟果实宜采用改良CTAB法,幼嫩枝皮和根皮宜采用改良CTAB法或改进SDS-酚法;本研究建立的改良CTAB法可作为枣不同器官和组织RNA提取的通用方法;根据季节可从不同器官和组织中获得高质量RNA;枣组织RNA含量相差较大,以幼嫩叶片含量最高,其次为组培苗、枝皮、枣果和根皮。
- 赵锦刘中成代丽刘孟军
- 关键词：器官总RNA提取
