武汉市科技攻关计划项目(201120722216-2)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：马立新周玉玲康立新战飞翔常静更多>>
- 相关机构：湖北大学湖北省农业科学院更多>>
- 发文基金：武汉市科技攻关计划项目湖北省教育厅科学技术研究项目湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 去泛素化酶7与髓样分化因子88蛋白相互作用的研究被引量：1
- 2013年
- Toll-like受体(TLRs)介导的信号途径不仅参与机体识别病原微生物入侵、诱导免疫应答,而且还可诱导机体产生破坏性炎症反应.通过免疫共沉淀、免疫荧光共定位、间接免疫荧光等实验方法鉴定去泛素化酶7(USP7)和TLR信号途径中重要接头蛋白——髓样分化因子88(MyD88)的相互作用,结果表明USP7和MyD88可在细胞质中共定位并可发生相互作用.该研究对阐释TLR信号通路的机制奠定了重要的基础.
- 战飞翔常静马立新周玉玲
- 关键词：MYD88蛋白相互作用
- 粘质沙雷氏菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的体外表达
- 2013年
- 根据GenBank中α-乙酰乳酸脱羧酶的基因序列(slaA)设计引物,以粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)HU1基因组DNA为模板通过PCR扩增得到了目标基因,全长为780 bp。将该基因分别连接到大肠杆菌表达载体pET30a和毕赤酵母表达载体pPICZαA上,构建表达质粒pET30a-slaA和pPICZα-A-slaA,并在对应的宿主中进行了表达。结果表明,大肠杆菌和毕赤酵母的表达产物的最适温度和pH均分别为40℃和7,两者在不同pH下的稳定性也相似,只不过毕赤酵母的表达产物的热稳定性要略强于大肠杆菌的表达产物。
- 王亚平周荣华饶犇马立新
- 关键词：Α-乙酰乳酸脱羧酶体外表达
- 大肠杆菌K12植酸酶热稳定性突变体在毕赤酵母中的高效表达和性质研究(英文)
- 2013年
- 植酸酶广泛用作工业饲料添加剂。通过基因优化和两步法基因合成了E.coli K12植酸酶的耐热突变体AppA NR,将其克隆到毕赤酵母表达载体pHBM905A上,然后将构建好的质粒转入毕赤酵母GS115中表达。经过筛选得到了一株高表达毕赤酵母工程菌GS115/AppA NR,产量达到10mg·mL-1,活力为980U·mL-1。该重组酶在95℃加热10min,仍保留90%的活力,相比野生型植酸酶,更能抵抗高温。同时,该酶具有较宽的pH值范围和抗胃酶水解的能力。所有这些性质的改善表明该重组酶比较适合用作工业饲料添加剂。
- 周玉玲邹由付玲江维战飞翔康立新马向东马立新
- 关键词：基因合成酶特性
- 壳聚糖酶的克隆表达与壳寡糖的制备分析被引量：2
- 2012年
- 目的:克隆壳聚糖酶基因于大肠杆菌中实现高表达,制备壳寡糖。方法:以枯草芽孢杆菌总DNA为模板扩增壳聚糖酶基因(CSN),克隆至载体pET23a(+)上,转化菌株BL21(DE3)。重组子经0.5 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE和质谱检测与鉴定重组酶。酶纯化后水解壳聚糖,薄层色谱分析其水解产物。结果:质谱证明壳聚糖酶(31.5kDa)成功表达,表达量占菌体总蛋白的45%左右。纯化后重组酶浓度为900 mg/L,纯度95%、回收率85%,酶活力为10 000 U/mg。壳聚糖降解产物为壳二糖至壳四糖。结论:原核表达载体pET23a(+)-CSN构建正确,壳聚糖酶表达量与活性高,适用于水解壳聚糖制备壳寡糖。
- 康立新周玉玲马立新
- 关键词：壳聚糖酶IPTG重组蛋白壳寡糖
