国家自然科学基金(81272792)
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
- 相关作者：尤永平刘宁张军霞史岩王佳甲更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院南京医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA沉默PKM2抑制胶质瘤U87细胞的增殖和糖代谢能力被引量：3
- 2013年
- 目的探讨小分子RNA干扰(siRNA)沉默M2型丙酮酸激酶(PKM2)基因表达对人脑胶质瘤U87细胞增殖和代谢的影响。方法合成PKM2siRNA并转染胶质瘤U87细胞,靶向抑制PKM2表达;将未转染和转染无义siRNA的细胞分别作为空白组和阴性对照组。MTT法检测U87细胞增殖,葡萄糖和乳酸检测试剂盒检测培养基代谢物。结果 PKM2siRNA能有效抑制U87细胞PKM2表达。下调PKM2表达后,细胞增殖能力受到明显抑制,同时葡萄糖消耗量和乳酸生成量也显著下降。结论干扰PKM2表达可显著抑制胶质瘤的增殖和代谢能力,可作为胶质瘤治疗的潜在靶点。
- 王佳甲陶陶栾文康史岩刘宁尤永平
- 关键词：M2型丙酮酸激酶胶质瘤糖代谢
- miR-129-5p在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞糖代谢与生长的影响被引量：7
- 2013年
- 目的探讨微小RNA129-5p(miR-129-5p)在胶质瘤中的表达及其对人脑胶质瘤细胞糖代谢与生长的影响。方法采用RT-PCR技术检测miR-129-5p在胶质瘤组织中的表达水平。用miR-129-5p寡聚核苷酸转染胶质瘤细胞;通过MTT微量酶反应比色法、流式细胞术、葡萄糖和乳酸检测分析试剂盒,观察上调miR-129-5p表达后对胶质瘤细胞(U87)增殖、周期及糖代谢的影响。结果 miR-129-5p在胶质瘤组织中较正常脑组织呈低表达(P<0.01)。上调miR-129-5p的表达后,U87细胞的增殖受抑制,细胞周期阻滞在G1期,葡萄糖消耗量和乳酸生成量均降低(P<0.05)。结论 miR-129-5p在胶质瘤组织中呈低表达;上调其表达可以明显影响胶质瘤细胞的糖代谢和细胞的增殖能力。
- 栾文康史岩王佳甲陶陶钱进董庆生刘宁尤永平
- 关键词：胶质瘤
- 长链非编码RNAHOTAIR对人胶质瘤细胞代谢和生长的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨长链非编码RNAHOX转录反义RNA （HOX transcript antisense RNA,HOTAIR）对人脑胶质瘤细胞代谢和生长的影响。方法采用荧光标记的小干扰HOTAIR（si—HOTAIR）转染胶质瘤U87和U251细胞株，通过实时定量荧光聚合酶链式反应（RT．PCR）检测HOTAIR在胶质瘤细胞中的表达水平；利用CCK8实验和克隆形成实验检测细胞的生长变化；采用海马生物公司糖酵解应激实验和线粒体应激实验试剂盒检测细胞有氧糖酵解和线粒体功能。通过Westernblot检测有氧糖酵解相关酶[包括葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）、丙酮酸激酶M2（PKM2）及乳酸脱氢酶A（LDHA）]的表达水平。结果荧光显微镜下观察U87和U251细胞中si．HOTAIR转染效率均〉90％。与阴性对照（NC）组比较，si—HOTAIR组细胞中HOTAIR的表达均明显下调（P〈0．01）；si—HOTAIR组U87和U251胶质瘤细胞的增殖能力和克隆形成能力明显低于NC组（P〈0．01）；下调HOTAIR后，胶质瘤细胞有氧糖酵解能力减弱，表现为基础糖酵解水平降低（P〈0．05）、最大糖酵解能力减弱（P〈0．01）及糖酵解剩储备量下降（P〈0．01）；si—HOTAIR组GPI、PKM2和LDHA表达水平较NC组降低（P〈0．01）。下调HOTAIR后，胶质瘤细胞线粒体功能受损，与NC组比较，表现为基础呼吸水平下降（其中U87细胞P〈0．01）、线粒体偶联效率降低及剩余呼吸能力减弱（U87和U251组均P〈0．05）。结论下调HOTAIR表达可以使人胶质瘤细胞糖酵解能力和线粒体功能受损，同时影响胶质瘤细胞的生长能力。
- 魏文金韩东风李海林张军霞张雅旋胡奇李文涛俞天赋尤永平
- 关键词：代谢糖酵解长链非编码RNA
- 额颞枕叶非功能区胶质瘤的手术策略被引量：2
- 2016年
- 目的探讨额、颞、枕叶非功能区胶质瘤的临床特征及手术治疗策略。方法回顾性分析南京医科大学第一附属医院2009年1月至2013年1月治疗的病变位于额、颞、枕叶非功能区，病例资料完整的胶质瘤患者的临床资料，共89例。术前根据影像学显示肿瘤的部位、大小及水肿程度进行分型并制定相应的手术策略，最大程度切除肿瘤组织。术中常规应用导航和B超定位，使用黄荧光显微镜辅助切除。结果89例患者中，病变局限于皮质者49例，局限于脑室深部者11例，同时侵犯脑室和皮质者29例；病变局限于1个脑叶者67例，侵犯多个脑叶者22例。术后病理学证实肿瘤为WHOⅠ级者12例，Ⅱ级者21例，Ⅲ级者29例，Ⅳ级者27例。术后MRI证实肿瘤全切除74例（83．1％），次全切除11例（12．4％），大部切除2例（2．2％），部分切除2例（2．2％）。术后平均随访（30．0＋3．6）个月，Kaplan—Meier生存曲线分析显示，WHOm级者2年的生存率为51．7％，Ⅳ级者为33．3％。随访期间共死亡41例（46．1％），其中WHOⅣ级者21例（77．8％），中位生存期为19．4（11．5～30．2）个月；WHOⅢ级者18例（62．1％），中位生存期为26．7（19．1—36．5）个月；WHOⅡ级者2例（9．5％）；WHOI级者无死亡。结论影像学指导下额、颞、枕叶非功能区胶质瘤的手术方法和切除范围有助于提高患者的肿瘤全切率和生存时间。
- 季晶张军霞颜伟曹胜武王颖毅王彬彬赵春生赵鹏刘宁尤永平
- 关键词：额叶颞叶枕叶
- FOS蛋白在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨FOS蛋白在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响。方法用免疫组化染色法检测FOS蛋白在各级别胶质瘤组织中的表达水平。应用RNA干扰技术降低FOS表达后，应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法和流式细胞技术检测胶质瘤细胞的增殖和周期的改变；应用Transwell实验检测胶质瘤细胞侵袭能力的改变；采用Western印迹法检测FOS下游功能蛋白的变化。结果胶质瘤组织中FOS的表达随着级别的增高而增高；抑制FOS的表达后，U87和U251细胞生长受抑制，细胞生长阻滞在G1期且细胞侵袭能力下降，下游的功能蛋白CyclinD1和MMP9表达水平降低。结论FOS在胶质瘤中高表达；抑制其表达可以下调功能蛋白CyclinD1和MMP9的表达，进而调控细胞的生长和侵袭能力。
- 陶陶陆小明姚磊王佳甲史岩骆慧刘宁尤永平
- 关键词：胶质瘤FOS蛋白CYCLIND1蛋白细胞周期细胞侵袭
- 过氧化物酶体增殖因子激活受体α在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞的影响
- 2014年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖因子激活受体a（peroxisomeproliferators—activatedreceptora，PPARa）蛋白在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响。方法应用实时荧光定量PCR法检测PPARα mRNA在各级别胶质瘤组织中的表达水平；四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法和流式细胞技术检测予PPARα激动剂后胶质瘤细胞的增殖、凋亡和周期的改变；应用荧光分子探针，2’，7＇-二氯二氢荧光素双乙酸盐法进行胶质瘤细胞内活性氧检测；Western印迹法检测AKT信号通路和PPARα下游功能蛋白的变化。结果胶质瘤组织中PPARα的表达随着胶质瘤级别的升高而降低，增加其蛋白活性后细胞内活性氧积聚增多，并引起AKT和CyclinD1蛋白表达下降；U87胶质瘤细胞生长受到抑制，细胞生长阻滞在G，期且凋亡增加。结论PPARα在胶质瘤中低表达；增强其蛋白活性可以造成细胞内活性氧积聚，并能影响AKT信号通路，抑制功能蛋白CyclinD1的表达，进而调控胶质瘤细胞的生长。
- 史岩栾文康陶陶王佳甲钱进董庆生刘宁尤永平
- 关键词：胶质瘤活性氧AKT蛋白
