吉林省科技发展计划基金(20120235)
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 相关作者：葛淑敏钱爱东于源华何秀霞张淑华更多>>
- 相关机构：长春理工大学吉林农业大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 胞内分枝杆菌HBHA基因的克隆、分析及原核表达被引量：3
- 2014年
- 【目的】克隆胞内分枝杆菌肝素结合血凝素(HBHA)基因,并对其进行生物信息学分析和原核表达。【方法】应用巢式PCR克隆胞内分枝杆菌HBHA基因,利用在线分析软件对其基因序列及编码蛋白序列进行生物信息学分析。构建原核表达载体pET32a-HBHA,并进行诱导表达。【结果】胞内分枝杆菌HBHA基因完整的ORF全长618bp,编码205个氨基酸,该基因氨基酸序列与M.avium ATCC 25291有较高的相似性。HBHA蛋白为碱性、亲水性蛋白质,含12个潜在的磷酸化位点,存在抗原表位,亚细胞定位主要存在于细胞核,蛋白空间结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。构建了pET32a-HBHA原核表达载体,其可在原核表达系统中诱导表达大小约为38ku的HBHA重组蛋白。【结论】胞内分枝杆菌HBHA是一种抗原指数较高的碱性、亲水性蛋白,可在原核表达系统中被表达。
- 葛淑敏张淑华何秀霞于源华钱爱东
- 关键词：克隆生物信息学分析原核表达
- 胞内分枝杆菌HSP 70基因的克隆、分析及原核表达被引量：1
- 2014年
- 胞内分枝杆菌为致病性非结核分枝杆菌(NTM)之一,分布广泛,人畜均可感染,对人畜健康造成极大威胁。应用巢式PCR克隆胞内分枝杆菌HSP 70基因,利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。构建原核表达载体p ET15b-HSP 70,同时进行诱导表达。结果显示,胞内分枝杆菌HSP 70基因完整,ORF基因全长1860bp,共编码619个氨基酸,HSP 70为酸性、亲水性蛋白质,不存在明显跨膜结构,含14个潜在磷酸化位点,亚细胞定位主要存在于细胞质中,无信号肽结构。二级结构预测,蛋白空间结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。同时,以同源建模法预测了HSP 70基因编码蛋白的三维立体结构。成功构建p ET 15b-HSP 70原核表达载体,在原核表达系统中该载体可诱导表达70ku的HSP70重组蛋白。
- 葛淑敏王准王诚任梅钱爱东
- 关键词：HSP克隆原核表达
