国家自然科学基金(81270495)
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 相关作者：黄秀清唐蔚青黎健满永窦琳更多>>
- 相关机构：卫生部北京老年医学研究所北京大学第五临床医学院北京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- miRNA-152和miRNA-200s在IL-6诱导的肝胰岛素抵抗中的作用
- 2013年
- 目的胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要发病机制之一。microRNA（miRNA）是-簇长度约为20—24个核苷酸的单链非编码的小分子RNA。它们在转录后水平对下游靶基因进行调控。miRNA广泛表达于各种组织器官中，对组织器官的功能和发育具有重要的作用。miRNA参与糖尿病及其并发症的发生。它们调控胰岛素的合成、分泌、胰岛素信号通路和糖脂代谢等过程。目前，与肝胰岛素抵抗相关的miRNA报道尚少。研究证明miRNA．152和miRNA-200s与肿瘤的发生密切相关，但miR—NA-152和miRNA-200s是否在肝胰岛素抵抗发生中起重要作用？目前尚不清楚。本研究通过建立IL-6诱导的胰岛素抵抗的细胞和动物模型，分析细胞或肝脏组织中miRNA-152和miRNA-200s的表达变化，探讨miRNA-152和miRNA-200s在IL-6诱导的肝胰岛素抵抗中的作用，明确miRNA-152和miRNA．200s调节P13K／AKT信号通路的分子机制。方法（1）以12周龄db／db小鼠作为胰岛素抵抗模型小鼠，收集小鼠肝脏组织，用miRNA芯片分析肝脏中miRNA表达谱变化，并用Real—timePCR进一步验证芯片结果。（2）10斗∥LIL-6处理小鼠肝细胞系NCTCl469和C57BL／6小鼠原代肝细胞24h，建立胰岛素抵抗的细胞模型，检测P13K／AKT信号和miRNA．152、miRNA-200s表达水平；在c57BL／6J小鼠背部皮下埋泵缓释注射IL-61周，建立IL-6诱导的胰岛素抵抗动物模型，观察肝脏中P13K／AKT信号通路和miRNA-152、miRNA-200s表达水平。（3）合成miRNA-152、miRNA-200smimics和inhibitors，并转染入NCTCl469细胞，用Real—timePCR测定细胞中miRNA-152和miRNA．200S的水平，并且检测P13K／AKT信号通路和糖原水平。（4）用生物信息学方法预测miRNA-200s的下游靶基因；以Westernblot分析miRNA-200s对下游基因FOG2和PTEN表达的影响。（5）利用siRNA干扰FOG2和lrFEN的表达，检测P13K／AKT信号通路和糖原合成水平。结果（1）与对照组小鼠�
- 窦琳黎健
- 关键词：IL-6PTENP13KAKT信号通路糖原合成
- 双水平呼吸道正压通气治疗重叠综合征的临床效果观察被引量：9
- 2016年
- 目的 探讨双水平呼吸道正压通气（Bi-PAP）治疗重叠综合征的临床效果.方法 选择2013年8月至2014年12月首都医科大学附属北京世纪坛医院收治的慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）的重叠综合征患者50例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,各25例.观察组患者给予Bi-PAP呼吸机辅助通气治疗,对照组患者给予持续气道正压通气（CPAP）治疗,均连续治疗72 h.比较2组患者治疗前后动脉血pH值、动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、动脉血氧饱和度（SaO2）以及血清C反应蛋白（CRP）与肿瘤坏死因子α（TNF-o）水平变化.治疗后多导睡眠图指标[呼吸暂停低通气指数（AHI）和最长呼吸暂停时间]及肺功能[第1秒用力呼气容积（FEV1）及用力肺活量（FvC）]的变化.结果 2组患者治疗前pH值、PaO2、PaCO2、SaO2差异无统计学意义（P＞0.05）.治疗后观察组患者pH值、PaO2及SaO2高于对照组,PaCO2低于对照组,差异均有统计学意义[（7.41±0.05）比（7.31 ±0.04） 、（90 ±5）mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）比（76±7）mmHg、（98.3±1.2）％比（95.7±1.6）％、（45 ±6） mmHg比（57±8）mmHg,均P＜0.05];治疗前2组患者CRP及TNF-α水平差异无统计学意义（P＞0.05）,治疗后,观察组患者血清CRP及TNF-α水平低于对照组[（4.9±1.2） mg/L比（7.6±1.1） mg/L、（44±8） ng/L比（53±6） ng/L],AHI及最长呼吸暂停时间小于对照组[（7.2±2.9）比（15.6±3.2）、（10 ±4）s比（16±5）s],FEV1、FVC高于对照组[（1.71±0.24）L比（1.21±0.32）L、（2.78±0.31）L比（2.01±0.25）L],差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 Bi-PAP治疗COPD合并OSAHS的重叠综合征较CPAP获得了更好的疗效.
- 刘晓丽刘芳勋张华刘芳牛志红黄秀清蒋延文
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征重叠综合征持续气道正压通气
- 高脂饮食和西方饮食诱导的非酒精性脂肪肝小鼠模型的特征比较被引量：7
- 2018年
- 目的高脂饮食（highfatdiet，HFD）和西方饮食（westerndiet，WD）是两种常见的导致非酒精性脂肪肝病（non．alcoholicfattyliverdisease，NAFLD）的饮食方式。文章比较了C57BL／6J小鼠经高脂饮食或西方饮食喂养12周形成NAFLD模型时，肝脏组织中脂质蓄积、肝细胞损伤以及炎性反应等特征，旨在为NAFLD研究中选择合适小鼠模型提供依据。方法高脂饮食、西方饮食及对照小鼠喂养至12周。禁食8h后．检测体重和肝重：ISP半自动生化分析仪测定小鼠血清学指标；小鼠肝组织H＆E染色检测病理情况；油红O染色分析脂质蓄积；TUNEL染色检测凋亡；Western印迹比较肝脏中脂质代谢及脂性凋亡相关蛋白的表达：Real-timePCR分析肝脏中炎性因子mRNA水平。结果①与对照组比较，高脂饮食和西方饮食组小鼠体重和肝重增加，血糖和血脂水平升高；②H＆E及油红O染色结果显示，高脂饮食和西方饮食组小鼠肝脏中出现明显脂质蓄积；③Real．timePCR结果表明，高脂饮食和西方饮食组均引起肝脏内炎性反应：④TUNEL染色结果提示，西方饮食诱导小鼠肝脏中出现明显肝细胞凋亡及坏死损伤；⑤Western印迹结果显示，高脂饮食组小鼠肝脏中脂质合成蛋白表达升高，而西方饮食组小鼠肝脏脂性凋亡蛋白表达升高。结论高脂饮食和西方饮食均导致小鼠出现肥胖、糖脂代谢紊乱及非酒精性脂肪肝病，但高脂饮食组小鼠具有单纯性脂肪肝阶段的典型特征。而西方饮食组小鼠则表现出非酒精性脂肪肝炎的典型特征。
- 杨光窦琳唐蔚青沈涛满永黎健黄秀清
- 关键词：非酒精性脂肪肝病高脂饮食动物模型
- miRNA-291b-3p在胰岛素抵抗中的作用
- 2013年
- 目的本研究主要探讨microRNA-291b-3p（miRNA．291b-3p）在糖尿病小鼠中的异常表达情况，并进一步探讨其在原代肝细胞中对胰岛素信号通路的影响。方法首先，通过实时荧光PCR的方法，检测正常C57小鼠及db／db小鼠中microRNA-291b-3p的表达水平。其次，在体外构建高表达和低表达microRNA-291b-3p的腺病毒载体，并将其分剐转染进入小鼠原代肝细胞中。然后，荧光显微镜下检测腺病毒载体的转染效率并通过实时荧光定量PCR方法检测腺病毒载体高表达和低表达microRNA-291b．3p的情况。
- 郭君孟祥宇李萌唐蔚青黄秀清黎健
- 关键词：MICRO胰岛素抵抗糖代谢紊乱
- miR-291b-3p在脂质代谢中的作用及其机制
- 2013年
- 目的探讨在db／db小鼠模型中miR-291b-3p的表达并进一步探讨其在NCTCl469细胞系脂质代谢中的作用及其机制。方法首先通过qRT—PCR检测正常C57BIM6小鼠及db／db小鼠肝脏中miR-291b．3p的表达水平，wlesternblot检测肝脏中脂质代谢分子如FAS、LDLR、SREBPl等的表达。其次通过对NCTCl469细胞转染mimics48h建立miR-291b-3p高表达细胞模型，转染inhibitor48h建立miR-291b-3p低表达细胞模型，qRT—PCR检测模型的建立，油红O染色检测两种细胞模型中脂质蓄积情况，Westernblot检测细胞模型内脂质代谢通路分子的表达情况，酶法检测细胞内甘油三酯含量。结果与正常C57BIJ6小鼠相比，db／db小鼠肝脏中miR-291b-3p表达明显升高，FAS、LDLR、SREBPl等的表达明显上升；NCTCl469细胞中转染mimics可导致细胞内miR-291b．3p高表达，脂代谢通路激活，细胞油红O染色增强，甘油三酯含量增多；转染inhibitor可明显降低细胞内miR-291b-3p的表达，伴随脂代谢通路被抑制，细胞内油红O染色减弱，细胞内甘油三酯含量减少。结论miR-291b-3p参与NCTCl469细胞内脂质代谢，其机制可能与靶向多个脂代谢基因有关。
- 孟祥宇郭君黄秀清李萌唐蔚青黎健
- 关键词：MICRORNA脂代谢紊乱非酒精性脂肪肝
- miR-291b-3p在肝脏脂质代谢中的作用机制研究
- <正>目的:miR-291b-3p是miR-290家族中的一员,在胚胎发育过程中起重要作用,而在脂代谢中的作用尚未见报道,本研究旨在阐明其在肝脏脂质代谢中的作用及其机制。方法:首先在NCTC1469细胞内通过油酸/棕榈酸...
- 孟祥宇郭君李萌黄秀清黎健
- 文献传递
- miR-291b-3p在肝脏脂质代谢中的作用机制研究
- 目的:miR-291b-3p是miR-290家族中的一员,在胚胎发育过程中起重要作用,而在脂代谢中的作用尚未见报道,本研究旨在阐明其在肝脏脂质代谢中的作用及其机制。方法:首先在NCTC1469细胞内通过油酸/棕榈酸(2:...
- 孟祥宇郭君李萌黄秀清黎健
- 肝细胞脂性凋亡在NASH中的作用和机制研究被引量：4
- 2020年
- 非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)是非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)疾病谱中更具危害性的阶段。脂毒性引发的肝细胞脂性凋亡不仅是NASH病程中肝细胞损伤的主要形式,而且还推动了NASH病程的进展。充分了解肝细胞脂性凋亡在NASH中的作用及机制,可为NASH的诊断与治疗提供新思路。本文将从直接效应和间接效应两方面阐述肝细胞脂性凋亡在NASH中的作用,并从脂性凋亡调控的效应分子、核心信号通路及其上游调控因子三个层面对肝细胞脂性凋亡分子机制做简要的综述。
- 陈皓窦琳杨光沈涛唐蔚青满永张曦月黄秀清
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病非酒精性脂肪性肝炎脂性凋亡脂毒性
