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补肾中药骨灵片对人成骨细胞功能和p38活化原蛋白激酶通路的影响被引量：18: 2007年; 目的探讨含补肾中药骨灵片大鼠血清对人成骨细胞功能和对p38活化原蛋白激酶通路的影响。方法取人髂骨松质骨,采用改良胰酶-胶原酶消化法分离培养人成骨细胞;根据血清药理学的方法制备不同浓度(低、中、高剂量)的骨灵片血清,并以生理盐水处理的大鼠血清为阴性对照,将制备好的血清加入第二代的人成骨细胞培养液中培养。采用Western-blot及Real time RT-PCR的方法观察各组成骨细胞护骨素和护骨素配体基因表达和磷酸化p38含量,用MTT法测定各组成骨细胞增殖率,利用茜素红染色法测定矿化结节形成的数量。结果含骨灵片(低、中、高剂量)药液血清处理的大鼠血清均能上调成骨细胞护骨素基因表达,下调护骨素配体基因表达,刺激成骨细胞的增殖,增加矿化结节形成的数量,刺激p38磷酸化。结论补肾中药骨灵片可能通过p38活化原蛋白激酶通路调控护骨素以及护骨素配体的表达,促进成骨细胞增殖以及矿化结节形成,抑制骨破坏,维持骨平衡。; 黄少慧李娟赵毅张娟; 关键词：骨灵片人成骨细胞 P38 护骨素护骨素配体

骨灵片对原发性骨质疏松症大鼠骨密度及血清OPG/RANKL水平的影响被引量：3: 2008年; 目的:观察骨灵片对原发性骨质疏松症(POP)大鼠骨密度(BMD)及血清OPG、RANKL表达的影响。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、骨灵片高、中、低剂量组,采用去势法建立大鼠POP动物模型,正常饲养1月后,骨灵片3个剂量组和阳性对照组分别给予骨灵片和护骨胶囊治疗3个月后处死,采用X线骨密度仪和ELISA法分别测定大鼠股骨BMD及血清OPG、RANKL。结果:与模型组比较,各给药组BMD值均较高,其中骨灵片高、中剂量组BMD与模型组比较有显著性差异(P<0.05),骨灵片3个剂量组及阳性对照组与正常组比较无显著性差异(P>0.05)。骨灵片3个剂量组、阳性对照组及模型组的血清OPG和RANKL均较正常组升高,而骨灵片3个剂量组、阳性对照组测得较高的OPG和RANKL值,较之模型组有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:骨灵片可通过上调OPG,下调RANKL的表达,影响OPG/RANKL/RANK系统,抑制骨丢失,维持BMD,从而起到防治POP的作用。; 黄少慧曹艳艳蔡红兵李欣; 关键词：原发性骨质疏松症骨灵片骨密度护骨素护骨素配体

补肾中药对破骨细胞骨吸收功能的影响被引量：31: 2005年; 目的:探讨补肾中药对破骨细胞(osteoclast,OC)骨吸收功能的影响。方法:取新生(出生24h内)SD乳鼠四肢骨髓分离培养OC,实验组加入不同(高、中、低)剂量的补肾中药血清,对照组采用无中药血清,采用酶动力学法测定培养上清中抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)的活性;利用甲苯胺蓝对骨吸收陷窝染色并在图像分析仪下测定骨吸收陷窝的面积和数目。结果:补肾中药高、中剂量组均降低TRACP活性,减少骨片上骨吸收陷窝的面积及数目,与空白对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),高、中剂量组间比较差异有显著性意义(P<0.05),以中剂量组作用为明显。结论:补肾中药可降低破骨细胞培养上清中的TR ACP活性,减少骨吸收陷窝面积及数目,达到抑制破骨细胞的骨吸收功能目的。; 吴贺勇李娟唐井钢; 关键词：骨吸收功能破骨细胞 TRACP 补肾中药酶动力学法 SD乳鼠

骨灵片通过p38 MAPK信号通路影响成骨细胞功能的机制被引量：8: 2008年; 目的探讨骨灵片促进成骨细胞增殖、矿化以及基因表达的细胞信号通路。方法用含有骨灵片的大鼠血清、p38 MAPK抑制剂SB203580作用人成骨细胞MG-63,测定各组成骨细胞增殖率、矿化结节数量。采用Western-blotting及RealtimeRT-PCR方法观察各组成骨细胞护骨素(OPG)、护骨素配体(RANKL)以及巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)基因表达和磷酸化p38含量。结果经含骨灵片药液的大鼠血清作用后,MG-63细胞的增殖和矿化结节形成数明显增加,OPG基因表达增加,RANKL基因表达减少,OPG/RANKL比值显著增加,M-CSF有下降趋势,但没有显著性差异,同时刺激p38磷酸化。结论骨灵片可能通过p38 MAPK通路促进成骨细胞增殖以及矿化结节形成,调控OPG、RANKL以及M-CSF的表达,达到治疗骨质疏松症的作用。; 黄少慧张娟李娟蔡红兵; 关键词：人成骨细胞护骨素护骨素配体

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广东省中医药管理局基金(103080)